一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基及其配制方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基及其配制方法和应用，每300μL的培养基中包括纤维蛋白原90‑150μL、抑肽酶15‑25μL、基质胶60‑100μL、凝血酶10μL、壳聚糖浓度为1‑3％，余量为心肌细胞培养液；心肌细胞培养液由RPMI 1640培养液加入终体积浓度为3％的KnockOut

【技术实现步骤摘要】
一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基及其配制方法和应用
本专利技术涉及一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基及其配制方法和应用。
技术介绍
诱导多能干细胞(iPSCs)是2007年日本学家山中伸弥通过重编程技术获得的一种具有和胚胎干细胞(ES)相似的全能性能力的干细胞。目前人源iPS已成功分化成各种组织细胞，利用其培育出软骨、肾小管、心脏组织等组织器官。这种技术可避免伦理问题，能够培养出自体的心肌细胞，为各种心血管疾病治疗、药物开发提供研究平台。心肌细胞体外培养一般是在传统的培养皿上进行，在这种二维环境下培养不能良好的模拟人体微环境，导致细胞在结构和功能上发生一系列适应性改变，影响后续检测结果。三维培养体系下培养的心肌细胞能更为准确地体现成熟心肌细胞的生理特性，既能为心血管药物的筛选、心血管疾病的研究提供实验模型，也可为组织再造、细胞移植等提供成熟的生物材料。三维培养支架为细胞粘附、散布、迁移、增殖、分化提供结构支持，是组织工程技术的关键，要在体外培养出理想的心肌细胞，就必须制备出一种生物相容性良好，机本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基，其特征在于，每300μL的培养基中包括纤维蛋白原90-150μL、抑肽酶15-25μL、基质胶60-100μL、凝血酶10μL、壳聚糖浓度为1-3％，余量为心肌细胞培养液；/n其中，所述心肌细胞培养液是由RPMI 1640培养液加入终体积浓度为3％的KnockOut

【技术特征摘要】
1.一种人源iPS分化的心肌细胞用的新型3D培养基，其特征在于，每300μL的培养基中包括纤维蛋白原90-150μL、抑肽酶15-25μL、基质胶60-100μL、凝血酶10μL、壳聚糖浓度为1-3％，余量为心肌细胞培养液；
其中，所述心肌细胞培养液是由RPMI1640培养液加入终体积浓度为3％的KnockOutTM血清替代物配制而成。


2.根据权利要求1所述的新型3D培养基，其特征在于，每300μL新型3D培养基中包括纤维蛋白原120μL、抑肽酶20μL、基质胶80μL、凝血酶10μL、壳聚糖浓度为2.0％。


3.根据权利要求1所述的新型3D培养基，其特征在于，所述纤维蛋白原的工作浓度为50-100mg/ml，用PBS缓冲液配制而成。


4.根据权利要求1所述的新型3D培养基，其特征在于，所述抑肽酶的工作浓度为50-100mg/ml，用PBS缓冲液配制而成。


5.根据权利要求1所述的新型3D培养基，其特征在于，所述凝血酶的工作浓度为1000U/ml，用PBS缓冲液配制而成。


6.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：林彬，高强，岑坚正，庄建，林泽斌，林先明，周丽诗，
申请(专利权)人：广东源心再生医学有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44