一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用，所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基包括基础培养基和添加剂，所述添加剂包括肝素钠、哌啶酸、γ‑氨基丁酸和锂离子盐。其是一种完全无异源(Xeno‑free)的培养体系，不会带来外源污染；培养基中的bFGF浓度可以被显著地降低，因而使培养基的制备成本显著降低，同时有效减少了bFGF的聚集现象，稳定性提高，使培养的胚胎干细胞或多能干细胞的质量维持稳定，能够长时间维持胚胎干细胞或多能干细胞的未分化状态和多能性；另外，哌啶酸、γ‑氨基丁酸和锂离子盐三种物质在促进胚胎干细胞或多能干细胞的生存、增殖、维持连续传代中具有难以预料的协同增效作用。

【技术实现步骤摘要】
一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用
本专利技术属于细胞培养
，涉及一种胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用，具体涉及一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用，尤其涉及一种稳定的、低蛋白含量的胚胎干细胞或多能干细胞培养基及其应用。
技术介绍
人胚胎干细胞(Humanembryonicstemcells，hESCs)是来源于体外受精的囊胚内细胞团的多能性细胞。hESCs具有向外胚层、内胚层和中胚层分化的能力，如心肌细胞、神经元、胶质细胞、肝细胞、胰岛细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞和内皮细胞等。传统的hESCs培养方法需要将hESCs置于丝裂霉素处理的饲养层细胞上(如胚胎成纤维细胞，MEFs)，这种方法虽然可以维持hESCs的生长和增殖，但是面临着饲养层细胞制备过程繁琐、不易分离饲养层细胞等问题。此外，饲养层细胞的质量也会对hESCs的生长造成影响，导致hESCs质量不一，批次性差异大，而且饲养层细胞也可能是动物病原体和支原体污染的来源。为了进一步提高hESCs体外培养时的质量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基包括基础培养基和添加剂，所述添加剂包括肝素钠、哌啶酸、γ-氨基丁酸和锂离子盐。/n

【技术特征摘要】
1.一种无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基包括基础培养基和添加剂，所述添加剂包括肝素钠、哌啶酸、γ-氨基丁酸和锂离子盐。


2.如权利要求1所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述肝素钠在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为10-200ng/mL；优选60-100ng/mL。


3.如权利要求1或2所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述哌啶酸在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为0.05-5μg/mL；优选0.05-0.15μg/mL。


4.如权利要求1-3中任一项所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述γ-氨基丁酸在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为10-200μg/mL；优选30-70μg/mL。


5.如权利要求1-4中任一项所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述锂离子盐在所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基中的浓度为10-150μg/mL；优选20-60μg/mL。


6.如权利要求1-5中任一项所述的无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基，其特征在于，所述基础培养基包括DMEM/F12培养基；
优选地，所述锂离子盐包括氯化锂；
优选地，所述无血清无饲养层的胚胎干细胞或多能干细胞培养基的pH值为7.0-7.4。


7.如权利要求1-6中任一项所述的无血清无饲养层的胚胎干...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈东煌，陈海佳，姜交华，张兆清，王小燕，李学家，
申请(专利权)人：生物岛实验室，广东国科细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44