表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术属于基因工程技术领域，具体涉及一种表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌及其构建方法与应用。本发明专利技术采用异化金属还原菌希瓦氏菌MR‑1作为功能化curli的宿主，肽结构域LACQCL翻译成核苷酸序列，通过柔性序列与大肠杆菌的淀粉样纤维curli的亚基csgA基因的C端连接，最终构建表达功能化淀粉样纤维curli的基因片段csgA‑LACQCL，从而实现肽结构域的功能。本发明专利技术还提供了一种重金属离子吸附生物膜，其对多种重金属离子均表现出很强的耐受性及吸附效果，且多次重复吸附后仍具有较优的金属离子去除率，克服了传统工艺存在的合成时间长、专一吸附、成本高等缺点，在水环境中金属离子吸附处理方面具有较好的商业应用价值。

【技术实现步骤摘要】
表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌及其构建方法与应用
本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌及其构建方法与应用。
技术介绍
重金属污染是水体污染的重要问题之一，其主要来源便是工业废水。水生生态系统中的重金属不会被降解，它们在自然界中的存在会导致它们在食物链中积聚，从而对动植物产生毒害作用，过多的重金属会积累在植物，并可以通过食物链进入人类和动物的身体和并且累积起来，造成急性或者慢性中毒，严重威胁人体生命。因此从废水中去除有毒重金属亟需解决。生物吸附是生物材料通过代谢过程或物理化学吸附途径从废水中积累重金属的能力。与物理化学修复法比较，生物吸附法具有成本低，修复快，不产生二次污染等诸多优点。生物材料主要有藻类、细菌、真菌以及酵母等。目前，通过生物材料从废水中去除重金属，除受到物理化学参数的影响外，在生物吸附过程中还存在竞争有机和无机物质浓度以及对金属离子的亲和力等方面的影响。另外，由于重金属离子的特异性，某些生物材料虽然对特定的重金属离子表现非常好的吸附能力，但处理其他金属污染物方面的效率却很低，不能同时去本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌，其特征在于，以希瓦氏菌MR-1为宿主，其基因组DNA中含有在淀粉样蛋白CsgA序列C端连接肽结构域LACQCL的基因片段csgA-LACQCL；所述基因片段csgA-LACQCL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌，其特征在于，以希瓦氏菌MR-1为宿主，其基因组DNA中含有在淀粉样蛋白CsgA序列C端连接肽结构域LACQCL的基因片段csgA-LACQCL；所述基因片段csgA-LACQCL的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


2.一种表达功能化淀粉样纤维的希瓦氏菌的构建方法，其特征在于，包括步骤：
（1）将肽结构域LACQCL翻译成核苷酸序列，通过柔性序列GSGGSG与大肠杆菌的淀粉样纤维curli的亚基csgA基因的C端连接，最终构建表达功能化淀粉样纤维curli的基因片段csgA-LACQCL；
（2）将步骤（1）中的基因片段csgA-LACQCL与表达载体pBBR-ParcA双酶切连接构建重组质粒pBBR-ParcA-csgA-LACQCL；
（3）将步骤（2）构建的重组质粒pBBR-ParcA-csgA-LACQCL转化至宿主大肠杆菌WM3064中，再结合转移至希瓦氏菌中，构成重组希瓦氏菌。


3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述基因片段csgA-LACQCL的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，编码步骤（1）中所述csgA-LACQCL的核苷酸序列，如SEQIDNO.2所示。

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【专利技术属性】
技术研发人员：雍阳春，索迪，方真，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32