一种治疗癌症的药物制造技术

本发明专利技术公开了一种治疗癌症的药物。本发明专利技术发现PRMT1表达在癌组织中相对于正常组织明显增加，并且与肿瘤恶性程度和更差的预后直接有关，开展对PRMT1介导的HSP70甲基化和其对癌细胞治疗效果的影响及根本机制的研究。本发明专利技术发现PRMT1过度表达增加了HSP70的精氨酸甲基化。它的甲基化是通过增强了HSP70和 BCL‑2 mRNA 3´‑UTR中富含AU的元件的结合和增加BCL‑2 mRNA稳定性，并相应增加BCL‑2蛋白表达，保护癌细胞免受各种细胞应急压力和治疗引起的凋亡。本发明专利技术提供的药物通抗体和小分子抑制物封闭热休克蛋白精氨酸甲基化位点，能降低癌细胞生存能力和增加治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗癌症的药物
本专利技术涉及药物
，具体涉及一种治疗癌症的药物。
技术介绍
在临床实践中，恶性肿瘤固有的和获得性的对治疗方式的耐药性或耐受性是一个关键的挑战，导致现有的治疗策略对总体生存影响很小。癌细胞内促凋亡信号和抗凋亡信号的平衡改变与治疗性耐药、癌症进展和转移有关，这些是癌症相关死亡的主要原因。70kDa热休克蛋白(HSP70s)是一个进化保守的蛋白家族，是ATP依赖的分子伴侣蛋白。HSP70由HSPA基因家族编码，哺乳动物中有13个HSP70家族成员。HSP70是该家族的主要成员，在各种应激条件下(包括细胞毒性化疗)促进细胞存活方面发挥着关键作用。HSP70是一种经典的蛋白伴侣蛋白，具有高度保守的结构域，有利于蛋白折叠。它直接与几种重要的蛋白结合，这些蛋白参与了内源性和外源性的凋亡途径，从而抑制细胞死亡，为肿瘤细胞提供生存优势。HSP70除了具有作为蛋白伴侣的典型功能外，还具有RNA结合能力，可以在3′-非翻译区(3′-UTR)结合并稳定含有AU富集元件(AREs)的特异性mRNA分子。HSP70RNA结合活性与其蛋白伴侣功能无关。HSP70的功能由多种翻译后修饰调控，如磷酸化、乙酰化、丙二酰化、泛素化和甲基化。首次发现HSP70蛋白甲基化是发生其保守的K561残基,这个赖氨酸残基的3甲基化会改变与α-synuclein的亲和力。最近,有文献表明CARM1/PRMT4介导的R469甲基化影响HSP70和TFIIH的结合，从而影响RARβ2基因的激活。
技术实现思路
>为了克服现有技术存在的上述不足，本专利技术的目的是提供一种治疗癌症的药物。本专利技术的目的在于针对恶性肿瘤治疗疗效不佳，提供一种药物用以抑制恶性肿瘤的增殖、侵袭和迁移。本专利技术的目的是针对恶性肿瘤固有的或获得性的对治疗方式的抵抗性或耐受性提供一种含精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70抗体或小分子抑制物的药物，用以抑制恶性肿瘤对治疗的抵抗性或耐受性，提高疗效。本专利技术提供的药物能降低热休克蛋白与BCL-2mRNA3′-UTR结合的亲和力，降低了BCL-2mRNA的稳定性，减少了BCL-2蛋白在肿瘤细胞中的量，提高肿瘤细胞对化疗或放疗的敏感性，使肿瘤细胞发生凋亡。本专利技术的目的至少通过如下技术方案之一实现。本专利技术提供的一种治疗癌症的药物，包括精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体、精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的多肽片段或精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的小分子抑制物。进一步地，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体为封闭热休克蛋白精氨酸甲基化或未甲基化氨酸残基的抗体。进一步地，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体为封闭HSP70第416位及第447位精氨酸残基的抗体。进一步地，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70小分子抑制物为抑制热休克蛋白甲基化或未甲基化精氨酸残基的小分子。所述小分子抑制物为天然或人工设计的小分子进一步地，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的多肽片段为包含人HSP70第416位精氨酸残基的多肽片段、包含人HSP70第447位精氨酸残基的多肽片段或者二者组合的多肽片段。所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的第416位精氨酸残基(R416)的多肽片段序列为GGVMTALIKRNSTIPTKQTQ；所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的第447位精氨酸残基(R447)的的多肽片段序列为GVLIQVYEGERAMTKDNNLL。二者组合的多肽片段序列为GGVMTALIKRNSTIPTKQTQIFTTYSDNQPGVLIQVYEGERAMTKDNNLL。所述热休克蛋白HSP70为蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的底物，PRMT1催化热休克蛋白HSP70精氨酸甲基化。所述PRMT1催化热休克蛋白HSP70精氨酸甲基化的位点为第416和447位的精氨酸残基(R416和R447)。本专利技术提供的治疗癌症的药物能够抑制所述热休克蛋白HSP70精氨酸甲基化的位点为第416和447位的精氨酸残基(R416和R447)甲基化，降低了热休克蛋白HSP70与BCL-2mRNA3′-UTR结合的亲和力，降低了BCL-2mRNA的稳定性，抑制恶性肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，促进恶性肿瘤细胞的凋亡。本专利技术提供的药物能用以抑制肿瘤对化疗药物的抵抗性或耐受性，提高肿瘤治疗方法疗效。所述肿瘤治疗方法包括吉西他滨等化疗方法以及辐射治疗。本专利技术提供的药物能治疗胰腺导管腺癌、胃癌等恶性肿瘤，还能治疗克罗恩病和溃疡性结肠炎等炎症性疾病。本专利技术首次发现HSP70与RNA的结合直接与癌细胞的治疗耐受性有关，并且依赖于HSP70蛋白精氨酸甲基化。本专利技术的发现进一步揭示抑制PRMT1-HSP70-BCL-2信号轴可以降低癌细胞生存能力和增加治疗效果。因此，靶向抑制这个信号轴代表一个新的恶性肿瘤治疗策略和方案。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和有益效果：本专利技术提供的药物，通过精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70抗体和小分子抑制物封闭热休克蛋白精氨酸甲基化位点，促进恶性肿瘤细胞的凋亡，抑制了恶性肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭；其次，本专利技术提供的药物包括精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70抗体和小分子抑制物，能够与肿瘤治疗方法的组合，提高恶性肿瘤细胞对化疗和放疗的敏感性，解决恶性肿瘤细胞对放化疗的抵抗性或耐受性。附图说明图1-A为小鼠胰腺导管腺癌(胰腺癌)移植瘤模型随时间变化的体积变化结果图；图1-B为小鼠胰腺导管腺癌(胰腺癌)移植瘤模型随时间变化的质量变化结果图；图1-C为在蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)高表达的MDA28细胞中敲低PRMT1及在PRMT1低表达的PANC-1细胞中过表达PRMT1的伤口愈合和侵袭实验结果图；图1-D为在蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)高表达的MDA28细胞中敲低PRMT1，通过Transwell实验并计数，计算出的细胞迁移和侵袭的能力的定量结果图；图1-E为在蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)低表达的PANC-1细胞中过表达PRMT1，通过Transwell实验并计数，计算出的细胞迁移和侵袭的能力的定量结果图；图2-A为PRMT1甲基化HSP70的结果图；图2-B为验证HSP70的精氨酸残基是否PRMT1甲基化位点的结果图；图3-A为HSP70两个精氨酸残基R416和R447甲基化对BCL-2mRNA表达水平的影响结果图；图3-B为重组野生型(WT)在HSP70缺失细胞中增加了BCL-2的表达结果图；图3-C为HSP70甲基化影响BCL-2mRNA的稳定性的结果图；图3-D为在HSP70敲除MiaPaCa-2细胞中进行核糖核蛋白免疫沉淀(RNP-IP)实验结果图；图3-E为利用图像软件定量图3-D的结果图；图3-F为在HSP70敲除HEK-293细胞中进行核糖核蛋白免疫沉淀(RNP-IP)实验结果图；图3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗癌症的药物，其特征在于，包括精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体、精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的多肽片段或者精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的小分子抑制物。/n

【技术特征摘要】
1.一种治疗癌症的药物，其特征在于，包括精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体、精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的多肽片段或者精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的小分子抑制物。


2.根据权利要求1所述的治疗癌症的药物，其特征在于，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体为封闭热休克蛋白精氨酸甲基化或未甲基化氨酸残基的抗体。


3.根据权利要求1所述的治疗癌症的药物，其特征在于，所述精氨酸甲基化热休克蛋白HSP70的抗体为封...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢克平，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：广东;44