【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有改进的精确度的DPO4聚合酶变体关于序列表的申明与本申请相关联的序列表以文本格式代替纸质副本提供，并且在此通过引用并入本说明书中。包含序列表的文本文件的名称为870225_421WO_SEQUENCE_LISTING.txt。文本文件为100KB，创建于2018年12月8日，并经由EFS-Web电子提交。
本公开总体上涉及聚合酶组合物和方法。更特别地，本公开涉及改良的DPO4聚合酶及其在生物和生物分子应用中的用途，包括例如高精度的核苷酸类似物掺入、引物延伸和单分子测序系统。
技术介绍
DNA聚合酶复制生物体的基因组。除了在生物学中的该主要作用外，DNA聚合酶也是生物技术的普遍工具。它们被广泛地用于例如反转录、扩增、标记和测序，其均为用于各种应用的主要技术，如核酸测序、核酸扩增、克隆、蛋白质工程、诊断、分子医学和许多其他技术。由于其重要性，已经对DNA聚合酶进行了广泛的研究，重点是例如聚合酶之间的系统发育关系、聚合酶的结构、聚合酶的结构-功能特征，以及聚合酶在DNA复制和其他基本生物学过程中的作用，...
【技术保护点】
1.分离的重组DNA聚合酶，所述重组DNA聚合酶包含与SEQ ID NO:1的氨基酸1-340具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述重组聚合酶包含在氨基酸位置78处的突变以及选自31、36、62、63、79、243、252、253、254、331、332、334和338的氨基酸位置处的至少一个突变，其中所述氨基酸位置78处的突变是K78D，其中位置的识别为相对于野生型DPO4聚合酶(SEQID NO:1)，并且所述重组DNA聚合酶显示聚合酶活性。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171211 US 62/597,109;20180412 US 62/656,6961.分离的重组DNA聚合酶，所述重组DNA聚合酶包含与SEQIDNO:1的氨基酸1-340具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述重组聚合酶包含在氨基酸位置78处的突变以及选自31、36、62、63、79、243、252、253、254、331、332、334和338的氨基酸位置处的至少一个突变，其中所述氨基酸位置78处的突变是K78D，其中位置的识别为相对于野生型DPO4聚合酶(SEQIDNO:1)，并且所述重组DNA聚合酶显示聚合酶活性。
2.如权利要求1所述的聚合酶，其中所述聚合酶包含与SEQIDNO:1的氨基酸1-340具有至少85％同一性的氨基酸序列。
3.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置31处的突变是C31S。
4.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置36处的突变是R36K。
5.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置62处的突变是V62K。
6.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置63处的突变是E63R。
7.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置79处的突变选自：E79L、E79D和E79I。
8.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置243处的突变是K243R。
9.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置252处的突变选自：K252D、K252Q和K252R。
10.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置253处的突变是R253Q。
11.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置254处的突变是N254K或N254D。
12.如权利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置331处的突变选自：R331D、R331E、R331N和R331L。
13.如权利要求1或2所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：马克·可可里斯，马克·普林德，格雷戈里·斯科特·蒂森，亚历山大·艾萨克·莱曼，德鲁·古德曼，亚伦·雅各布斯，约翰·查瑟，
申请(专利权)人：斯特拉托斯基因公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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