从头合成的基因文库制造技术

本文提供了具有低错误率的从头合成的核酸大文库。此外，本文描述了用于制备高质量结构单元如寡核苷酸的装置。较长的核酸可使用微流体组装件平行合成。此外，本文的方法允许快速构建高质量长基因的大文库。本文进一步描述了用于制备高质量长核酸的大文库的装置。

【技术实现步骤摘要】
从头合成的基因文库本申请是2014年08月05日提交的专利技术名称为“从头合成的基因文库”的第201480054963.8号(国际申请号PCT/US2014/049834)中国专利申请的分案申请。交叉引用本申请要求2013年8月5日提交的美国临时申请号61/862445和2013年8月5日提交的美国临时申请号61/862457的权益，这些申请通过引用并入本文。
技术介绍
具有高保真度和低成本的高效化学基因合成在生物技术和医学以及基础生物医学研究中发挥核心作用。从头基因合成是基础生物学研究和生物技术应用的强大工具。尽管已知用于以小规模合成相对较短片段的各种方法，但这些技术在可放大性、自动化、速度、精确度和成本方面却不尽人意。需要用于保证所需基因的成功合成并适于自动化的简单、可重现、可放大、不易出错并具成本效益的方法的装置。
技术实现思路
如上所述，迫切需要能够以较少的错误快速而高效地合成大基因文库或相对较长的寡核苷酸片段的方法、装置和系统。类似地，还需要能够以微流体规模划分(partition)和混合液体试剂以供平行进行大量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基因文库，其包含基因的集合，其中所述集合包含至少50种不同的预选合成基因，这些预选合成基因各自具有至少0.5kb的长度，并且相比于包含这些基因的预定序列具有小于1/3000bp的错误率。/n

【技术特征摘要】
20130805 US 61/862,445;20130805 US 61/862,4571.一种基因文库，其包含基因的集合，其中所述集合包含至少50种不同的预选合成基因，这些预选合成基因各自具有至少0.5kb的长度，并且相比于包含这些基因的预定序列具有小于1/3000bp的错误率。


2.一种基因文库，其包含基因的集合，其中所述集合包含各自具有至少0.5kb长度的至少50种不同的预选合成基因，其中至少90％的预选合成基因相比于包含这些基因的预定序列包含小于1/3000bp的错误率。


3.一种构建基因文库的方法，其包括：
(a)在第一时间点之前在计算机可读非暂时性介质中输入至少第一基因列表和第二基因列表，其中所述基因为至少500bp并且其中当编译成联合列表时，该联合列表包含至少100种基因；
(b)在第二时间点之前合成所述联合列表中超过90％的基因，从而构建具有可传送基因的基因文库；
其中所述第二时间点与第一时间点相隔少于一个月。


4.一种构建基因文库的方法，其包括：
(a)在第一时间点在计算机可读非暂时性介质中输入基因列表，其中所述列表包含至少100种基因并且其中所述基因为至少500bp；
(b)合成所述基因列表中超过90％的基因，从而构建具有可传送基因的基因文库；以及
(c)在第二时间点传送所述可传送基因，其中所述第二时间点与第一时间点相隔少于一个月。


5.一种在基底上合成n-聚体寡核苷酸的方法，其包括：
(a)提供具有解析座位的基底，该解析座位用适合于核苷酸偶联的化学部分功能化；以及
(b)根据座位特异性预定序列，使至少两个结构单元与各自位于其中一个解析座位上的多个生长寡核苷酸链以每小时至少10个核苷酸的速率偶联，从而合成n个碱基对长的多个寡核苷酸。


6.一种在具有功能化表面的基底上合成寡核苷酸的方法，其包括：
(a)通过至少一个喷墨泵向多个座位中的第一座位施加至少一滴第一试剂；
(b)向所述基底施加负压；以及
(c)通过至少一个喷墨泵向所述第一座位施加至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：威廉·巴尼亚伊，比尔·詹姆士·佩克，安德烈斯·费尔南德斯，陈思远，皮埃尔·尹德穆勒，
申请(专利权)人：特韦斯特生物科学公司，
类型：发明
国别省市：美国;US