一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法技术

本发明专利技术涉及农产品安全检测技术领域，具体的说是一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，检测方法包括提取、净化、测定、定性定量分析。本发明专利技术考虑花椒样品含脂量高的特殊性，采用乙腈提取，结合涡旋振荡和超声提取的方式，再利用固相萃取柱(在Carb/NH

【技术实现步骤摘要】
一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法
本专利技术涉及农产品安全检测
，具体的说是一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法。
技术介绍
花椒作为“八大调味品”之一，在我国已经有两千多年的使用历史了，2002年卫生部确认为药食两用原料。它含有天然的特殊香气，能赋予食物香、麻、辣等口感，还具有抑菌、抗氧化作用，可提高食物贮藏的稳定性。花椒用作中药有杀虫、麻醉、止痛等作用，因此花椒在百姓餐桌上有着举足轻重的作用。为保证花椒的质量和产量，其种植过程离不开农药的使用，而农药残留对人体健康的危害不容忽视。花椒所含的特殊芳香油会影响检测效果，需要寻找一种对含脂类样品净化效果较好的前处理萃取技术。而农药残留测定存在同系物、异构体、降解产物、基质等影响，减少检测干扰峰，优化样品前处理和仪器方法至关重要。在诸多样品前处理方法中，QuEChERS法凭借其简单简单、高效、快捷的特点广泛应用于水果蔬菜的多农残检测，但无法做到对基质的完全净化。而固相萃取法具有操作方便、分离效率高、杂质干扰低等优点。对于一些含脂类作物，其高油脂严重妨碍了农药残留的提取和净化。尤其是气相气质方法检测，高油脂类样品容易对色谱柱、检测器造成损伤，并对信号产生抑制作用。
技术实现思路
本专利技术为解决现有QuEChERS法净化不完全，高油脂严重妨碍农药残留的提取和净化，并对气相气质检测的色谱柱、检测器造成损伤，信号产生抑制作用等问题，本专利技术提供一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，适用于脂类样品中农药残留的高效、快速检测，主要针对含脂类样品净化技术，实现高效提取农药残留又能有效去除脂类以减少对仪器损伤的方法。本专利技术的目的在于提供一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，检测方法包括如下步骤：提取、净化、测定、定性定量分析。进一步，检测方法包括如下步骤：(1)提取：取均质样品，于50mL离心管中，加入乙腈，涡旋振荡，加入硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠，涡旋混匀，超声萃取，离心，取上清液，备用；(2)净化：将上述上清液用固相萃取柱进行净化，收集流出液，氮吹近干，丙酮溶解过膜，装入样品瓶，待GC-MS测试；(3)测定：采用气相色谱质谱仪进行检测；(4)定性定量分析：样品峰与标品峰相对照，进行定性定量分析。进一步，检测方法包括如下步骤：(1)提取：取均质样品2g，于50mL离心管中，加入乙腈10mL，涡旋振荡5分钟，加入3g硫酸镁、2g氯化钠、1g柠檬酸钠Nacitrate，涡旋混匀，超声萃取10分钟，转速为8000r/min，离心5min，取上清液，备用；(2)净化：将上清液用固相萃取柱(在Carb/NH2复合柱基础上加入中性氧化铝100mg、C18100mg)净化，先用5mL乙腈活化，之后取5mL上清液过柱，分别用2mL乙腈溶液重复洗涤两次，收集流出液，对流出液进行50℃水浴氮吹近干(吹至流出液的液体含量小于2％)，用2.0mL丙酮溶解残渣，过0.2μm微孔滤膜，得到样品检测液，装入样品瓶，待上机分析；(3)测定：采用气相色谱质谱仪进行GC-MS检测，检测样品的农药残留含量；(4)定性定量分析：样品检测液中的样品峰分别与浓度为1μg/mL混合标准工作溶液中的25种标准品峰进行对照，根据保留时间的一致性、定性定量离子的相对丰度比等特征，判定样品中是否含有目标物，同时以空白样品溶液为空白对照，进行定性定量分析。进一步，所述步骤(3)中气相色谱法，包括色谱测定条件，其色谱柱为DB-17MS(30m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱，色谱柱的升温程序：初始温度40℃保持1min，以30℃/min升至130℃，再以5℃/min升至250℃，再以5℃/min升至300℃，保持10min，总运行时间为48min。进一步，所述步骤(3)中质谱条件，其色谱柱的进样口温度为290℃，电子轰击源为70eV，离子源温度为230℃，扫描方式为SIM，四级杆温度为150℃；气相色谱法–质谱法联用(GC-MS)的接口温度(传输线温度)为280℃，载气及流量为1mL/min，进样体积为1μL，进样方式为不分流进样。进一步，所述步骤(4)中空白样品溶液的配制：按照步骤(1)(2)中的提取和净化方法对空白样品进行处理，作为空白样品溶液，上机测定分析。进一步，所述1μg/mL混合标准工作溶液的配制：分别取25种农药标准溶液用丙酮溶解并定容至10mL，配制成浓度为10μg/mL的单个标准储备溶液，置于-18℃温度条件下保存待用；样品实际测定时，取100μL的单个标准储备溶液于5mL离心管中，氮吹(不要吹干，吹至单个标准储备溶液的液体含量小于2％，以免影响结果的准确性)，之后用1mL丙酮复溶，过膜装入上机小瓶中，即配制成1μg/mL混合标准工作溶液。进一步，所述农药标准溶液为灭幼脲、a-666、五氯硝基苯、c-666、b-666、乙烯菌核利、d-666、百菌清、三唑酮、毒死蜱、氟虫腈、三氯杀螨醇、腐霉利、联苯菊酯、异菌脲、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、哒螨灵、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯、苯醚甲环唑中的任意一种或多种。进一步，所述步骤(3)中样品中农药残留最低检出浓度为0.01mg/kg。进一步，本专利技术所用的试剂与材料：乙腈，丙酮，硫酸镁，氯化钠，Nacitrate，中性氧化铝，C18(十八烷基硅烷键合硅胶)，Carb/NH2复合柱(500mg/500mg/6mL，Agilent公司)，0.2μm微孔滤膜均为市售产品。进一步，本专利技术所用仪器为气相色谱质谱仪(Agilent公司)，电子天平(FA2004B)，固相萃取仪(Waters公司)，高速离心机，氮吹仪，超声波萃取仪，涡旋振荡器，万能粉碎机。本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术中根据花椒样品含脂量高的特性，采用极性较强的乙腈提取，能有效减少色素和脂肪类杂质，提取过程中溶解的油脂不多，相应地降低了基质干扰。(2)本专利技术的检测方法中通过涡旋振荡和超声提取相结合的方式，大大提高了目标物的提取效果，其中采用3g硫酸镁、2g氯化钠、1gNacitrate用于优化盐析脱水，避免提取过程中出现乳化现象，更有利于乙腈层与水层的分开，提取步骤优化选取最佳时间，以便于实验室操作用于流水化作业。(3)本专利技术中的净化过程选用固相萃取法，并进行了试验条件优化，Carb/NH2复合柱的去脂和去色素效果较NH2柱效果好，综合考虑添加填料过多成本过大，且会对农药残留回收率造成影响，所以对比添加不同体积的中性氧化铝、GCB、C18，最佳结果是以Carb/NH2复合柱为基础添加中性氧化铝100mg、C18100mg进行净化，因此可以去除花椒中的大量油脂，提高目标物的提取效果。而且，与QuEChERS法萃取相比，净化效果更好，能够降低对仪器的损伤。(4)本专利技术中采用气相色谱质谱仪测定，优化了仪器条件，1μg/mL混合标准工作溶液的配制引入了前处理的氮吹浓缩步骤，最大可能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，其特征在于，检测方法包括如下步骤：提取、净化、测定、定性定量分析。/n

【技术特征摘要】
20200309 CN 20201015974771.一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，其特征在于，检测方法包括如下步骤：提取、净化、测定、定性定量分析。


2.根据权利要求1所述的一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，其特征在于，检测方法包括如下步骤：
(1)提取：取均质样品，于50mL离心管中，加入乙腈，涡旋振荡，加入硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠，涡旋混匀，超声萃取，离心，取上清液，备用；
(2)净化：将上述上清液用固相萃取柱进行净化，收集流出液，氮吹近干，丙酮溶解过膜，装入样品瓶，待上机分析；
(3)测定：采用气相色谱质谱仪进行检测；
(4)定性定量分析：样品峰与标品峰相对照，进行定性定量分析。


3.根据权利要求1所述的一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，其特征在于：检测方法包括如下步骤：
(1)提取：取均质样品2g，于50mL离心管中，加入乙腈10mL，涡旋振荡5分钟，加入3g硫酸镁、2g氯化钠、1g柠檬酸钠Nacitrate，涡旋混匀，超声萃取10分钟，转速为8000r/min，离心5min，取上清液，备用；
(2)净化：将上清液用固相萃取柱(在Carb/NH2复合柱基础上加入中性氧化铝100mg、C18100mg)净化，先用5mL乙腈活化，之后取5mL上清液过柱，分别用2mL乙腈溶液重复洗涤两次，收集流出液，对流出液进行50℃水浴氮吹近干(吹至流出液的液体含量小于2％)，用2.0mL丙酮溶解残渣，过0.2μm微孔滤膜，得到样品检测液，装入样品瓶，待上机分析；
(3)测定：采用气相色谱质谱仪进行GC-MS检测，检测样品的农药残留含量；
(4)定性定量分析：样品检测液中的样品峰分别与浓度为1μg/mL混合标准工作溶液中的25种标准品峰进行对照，根据保留时间的一致性、定性定量离子的相对丰度比等特征，判定样品中是否含有目标物，同时以空白样品溶液为空白对照，进行定性定量分析。


4.根据权利要求3所述的一种花椒中25种农药残留的气质联用检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中气...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永慧，张学娜，周鑫，范维江，房晓，
申请(专利权)人：山东商业职业技术学院，
类型：发明
国别省市：山东;37