一种越橘提取物的制备方法技术

一种橘提取物的制备方法，以越橘生物酶发酵液为原料制备越橘提取物，所述越橘生物酶发酵液包括以下处理工序：步骤一：将越橘浆果和/或加工余料破碎后经混合菌发酵过滤后得到发酵提取液a，所述混合菌为能产生纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的菌种；步骤二：将所述发酵提取液a经二次发酵过滤后得到发酵提取液b，精提所述发酵提取液b后即得越橘提取物，所述二次发酵工序采用将苹果黑星菌孢子悬浮液接种于所述发酵提取液a中发酵的工艺。本发明专利技术得到的提取物中花青素类物质产率高，纯化效果较好，同时还减少了废料的产生，绿色环保。

【技术实现步骤摘要】
一种越橘提取物的制备方法
本专利技术属于植物提取精制
，具体涉及一种越橘提取物的制备方法。
技术介绍
越橘，杜鹃花科越橘属植物，包括：欧洲越橘、美洲越橘、西伯利亚越橘等400多个品种，以瑞典、芬兰、挪威等出产的欧洲越橘最佳。越橘果实平均重0.5-2.5g，果实色泽美丽，果实细腻，种子极小，可食用率达100%。越橘中含有丰富的生物活性体质，除供食用外，还具有极强的药用价值及营养保健功能，国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。越橘含有的氨基酸、维生素、花青素、黄酮、有机硒和果酸等特殊营养成分是任何植物所无法比拟的，有着比一般植物包括蓝莓更加优越的抗氧化活性。当前人们对越橘的关注度越来越高，其相关产业也逐渐壮大。越橘深加工的开发市场广阔，今后深加工也将成为越橘发展的重点发展方向。欧洲越橘中富含的花色苷，或称花色苷、花色素苷，其结构为花青素与糖类以糖苷键结合。由于其独特的功能性，而被应用于清除体内自由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等。花色苷作为一种天然色素，安全、无毒，且对人体具有许多保健功能，已被应用于食品、保健品、化妆品、医药等行业。目前花色苷的制备工艺基本是采用有机溶剂提取或酸化醇水溶液提取，通过大孔树脂纯化和浓缩后，利用喷雾干燥技术得到产品，如申请号201310461582.9的中国专利申请公开了一种从欧洲越橘中提取花色苷的方法，以欧洲越橘为原料，以9倍原料量的乙醇加热回流提取2-3次，减压浓缩，D101树脂吸附、解吸、浓缩、干燥得粗提物，粗提物再用丙酮萃取，得到总花色苷含量约70％的欧洲越橘提取物，该方法得到的欧洲越橘提取物虽然纯度较高，但是产品收率只有0.5％，另外，萃取所用的丙酮为有毒溶剂，产品有严格的限量要求，容易导致产品丙酮残留超标；申请号201410253728.5的中国专利申请公开了一种欧洲越橘提取物及其制备方法，该方法以欧洲越橘为原料，加入果浆3倍量体积分数为60％的酸化乙醇，50℃加热回流提取2次，浓缩后用自制的以聚苯乙烯为主要骨架的大孔树脂进行吸附，再用酸性水洗，酸性乙醇、甲醇或丙酮解吸，喷雾干燥得到总花色苷含量在55％-95％的欧洲越橘提取物，且谱图符合欧洲药典规定，但该方法得到的欧洲越橘提取物尽管花色苷纯度高，但采用加热回流方式进行提取容易导致作为主要活性成分的花色苷受热分解，影响花色苷总收率，其次，提取、水洗、解吸工艺过程中均用盐酸对溶剂进行酸化，容易把氯离子带入产品中，导致产品氯离子超标；申请号201710522268.5的中国专利申请公开了一种欧洲越橘提取物的制备方法，该方法以欧洲越橘为原料，用果实重量3倍(二提4.5倍)体积量的95％乙醇常温搅拌提取，一提时需加硫酸进行提取，提取结束后再用饱和柠檬酸钠溶液调节提取液pH为3.0-3.5，离心过滤，浓缩，浓缩液再加水稀释得料液，料液用HPD100树脂吸附，pH为3.0-3.5的柠檬酸水溶液洗脱，80％-90％乙醇解吸，解吸的料液经浓缩、干燥得欧洲越橘提取物，该方法工艺过程简单，容易操作，便于工业化生产，但提取过程中乙醇用量大，乙醇浓度高，使得后续提取浓缩成本高。
技术实现思路
针对上述存在的问题，本专利技术的目的是提供一种越橘提取物的制备方法，得到的提取物中花青素类物质产率高，纯化效果较好，同时还减少了废料的产生，绿色环保。本专利技术的技术构思如下：一种越橘提取物的制备方法，以越橘生物酶发酵液为原料制备越橘提取物，所述越橘生物酶发酵液包括以下处理工序：步骤一：将越橘浆果和/或加工余料破碎后经混合菌发酵过滤后得到发酵提取液a，所述混合菌为能产生纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的菌种；步骤二：将所述发酵提取液a经二次发酵过滤后得到发酵提取液b，精提所述发酵提取液b后即得越橘提取物，所述二次发酵工序采用将苹果黑星菌孢子悬浮液接种于所述发酵提取液a中发酵的工艺。在本方案设计中，所用的混合菌菌种可以通过各种商业途径购买得到，例如可以通过中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）购买得到，所用苹果黑星菌为当地采集并通过单孢分离试管扩大培养得到。在本方案设计中，首先采用复合生物酶温和酶解辅助有益微生物发酵，发酵过程中由于不断溶出的有机酸，使得发酵环境成呈酸性且在常温条件下，越橘原花青素不会造成流失；由于发酵产生的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶对原料进行了进一步分解，使得越橘中的有效成分得到充分释放，经测定发酵提取液a中原青花素含量可达70-85mg/ml。本专利技术采用苹果黑星菌对发酵提取液a进行二次发酵，目的在于纯化青花素提取物，这是由于苹果黑星菌不仅具有耐酸性且在常温条件下活性较高，且苹果黑星菌可产生高活性的果胶酶和角质酶，果胶酶可对发酵液进行进一步的分解，而角质酶则起到至关重要的催化原青花素上的酚羟基与有机酸的酯化反应，生成溶于发酵液且稳定的酯化产物，降低了原青花素易分解导致青花素产率低的不良效果，而产生的酯化产物在弱碱性环境下即可分解提取得到花青素提取物，是一种得到高产率花青素提取物的有效方法。作为本专利技术的优选，苹果黑星菌孢子悬浮液为将制备发酵提取液a后剩余的滤渣作诱导产孢培养基进行黑星菌诱导产孢制备得到的苹果黑星菌孢子悬浮液。在本方案设计中，采用滤渣作为苹果黑星菌的诱导产孢培养基可以充分利用提取废料，节约资源，且经本专利技术人试验验证滤渣作为苹果黑星菌的诱导产孢培养基，可达到与常规培养基相当的效果，其原因在于，提取废料中含有苹果黑星菌所需的氨源、碳源，更具有相当含量的有机酸和有机硒以及菌体产生的矿物质，具有有利于苹果黑星菌产孢的效果。作为本专利技术的优选，苹果黑星菌孢子悬浮液：发酵提取液a为1：15~25。作为本专利技术的优选，苹果黑星菌孢子悬浮液浓度为0.8~1.2个/ml。作为本专利技术的优选，诱导产孢养基的成分包括：滤渣、大麦粒，所述滤渣：大麦粒为1~2:2。作为本专利技术的优选，步骤一种混合菌包括：酵母菌、植物乳酸杆菌、绿色木霉、嗜热链球菌、双歧杆菌中的二种或两种以上。作为本专利技术的进一步优选，步骤一中混合菌包括：酵母菌、植物乳酸杆菌、绿色木霉。作为本专利技术的进一步优选，酵母菌：植物乳酸杆菌：绿色木霉为3:2:1。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术采用复合酶发酵越橘混合料，再对得到的发酵液进一步进行纯化发酵，在温和的酶解条件下对原花青素进行保护，并在第二次发酵过程中催化了原花青素的酯化过程，使发酵液中的花青素转化为稳定的花青素酯化物，使得最后得到的提取物中花青素类物质产率高，纯化效果较好，而得到的花青素酯化物在弱碱环境下即可水解还原成花青素、花色苷。本专利技术采用越橘混合料初次发酵后的滤渣作为苹果黑星菌的诱导产孢培养基，可达到与常规使用的诱导产孢培养基相当的效果，同时还减少了废料的产生，绿色环保。具体实施方式实施例1一种橘提取物的制备方法，（1）备料：以欧洲越橘冻果为原料，按料液质量体积比(W:V)1：2加入温度为50℃~60℃热水解冻，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种越橘提取物的制备方法，其特征在于，以越橘生物酶发酵液为原料制备越橘提取物，所述越橘生物酶发酵液包括以下处理工序：/n步骤一：将越橘浆果和/或加工余料破碎后经混合菌发酵过滤后得到发酵提取液a，所述混合菌为能产生纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的菌种；/n步骤二：将所述发酵提取液a经二次发酵过滤后得到发酵提取液b，精提所述发酵提取液b后即得越橘提取物，所述二次发酵工序采用将苹果黑星菌孢子悬浮液接种于所述发酵提取液a中发酵的工艺。/n

【技术特征摘要】
1.一种越橘提取物的制备方法，其特征在于，以越橘生物酶发酵液为原料制备越橘提取物，所述越橘生物酶发酵液包括以下处理工序：
步骤一：将越橘浆果和/或加工余料破碎后经混合菌发酵过滤后得到发酵提取液a，所述混合菌为能产生纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的菌种；
步骤二：将所述发酵提取液a经二次发酵过滤后得到发酵提取液b，精提所述发酵提取液b后即得越橘提取物，所述二次发酵工序采用将苹果黑星菌孢子悬浮液接种于所述发酵提取液a中发酵的工艺。


2.根据权利要求1所述的一种越橘提取物的制备方法，其特征在于，所述苹果黑星菌孢子悬浮液为将制备发酵提取液a后剩余的滤渣作诱导产孢培养基进行黑星菌诱导产孢制备得到的苹果黑星菌孢子悬浮液。


3.根据权利要求2所述的一种越橘提取物的制备方法，其特征在于，所述苹果黑星菌孢子悬浮液：发酵提取液a...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝成兵，程勇，邵云东，李若鹏，
申请(专利权)人：浙江天草生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33