鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽及其制备方法、含半胱氨酸肽-锌螯合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于食品生物技术领域，具体涉及鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽及其制备方法，以及含半胱氨酸肽‑锌螯合物及其制备方法和应用。本发明专利技术通过运用植物油料(大豆、花生和菜籽)以及鳜鱼中的蛋白质为底物，分别制备不同来源的含半胱氨酸肽(Cys‑containing peptide，CCP)，其中相对于鳜鱼来说，鳜鱼来源的CCP为同源型，植物油料来源的CCP为异源型。对同源CPP和异源CCP进行复配制备其螯合物，或同源CCP‑Zn螯合物和异源CCP‑Zn螯合物的混合物，通过运用这两类螯和物能够有效提升鳜鱼的保鲜效果，延长了鳜鱼的食用期限。

【技术实现步骤摘要】
鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽及其制备方法、含半胱氨酸肽-锌螯合物及其制备方法和应用
本专利技术属于食品生物
，具体涉及鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽及其制备方法，以及含半胱氨酸肽-锌螯合物及其制备方法和应用。
技术介绍
多肽金属螯合物是由金属离子与多肽配位结合形成的一类具有环状结构的物质，其具有促进微量元素吸收、抗氧化等多种生理活性。近年来，随着研究的不断深入，多肽金属螯合物又被证明具有较好的抑菌活性。肽锌螯合物是蛋白水解产生的锌螯和肽与锌离子发生螯和反应制成的螯和产物。有研究成果指出，肽锌螯和物的抑菌作用有利于促进针对草鱼的保鲜效果。鳜鱼(Sinipercachuatsi)属鲈形目鮨科、鳜亚科、鳜属，是我国名贵食用鱼类，广泛分布于我国主要江河湖泊中。近年来，全国鳜鱼主产区的年产量已超过30万吨，且消费者对鳜鱼的需求量逐年提升。传统的鳜鱼保鲜技术，保鲜期限短，保鲜值低下，大大降低了鳜鱼的食用效果。因此，亟待开发对于鳜鱼具有保鲜效果的新物质及其新技术。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术提供了鳜鱼蛋白源的含半胱氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1，将鳜鱼蛋白配置浓度为12-20％鳜鱼蛋白液，倒入发酵罐中，按3％-8％接种量分别接种清酒乳杆菌和腐生葡萄球菌，发酵温度设为20-40℃，发酵时间为3-7d，获得鳜鱼蛋白发酵液；/nS2，将步骤S1中的鳜鱼蛋白发酵液进行灭菌和过滤，取滤液，将所述滤液放置于-18℃冷冻24h，再于4-10℃解冻24h，解冻液进行离心，去除沉淀，取上层清液，将所述上清液旋转蒸发、浓缩后、冷冻干燥，获得鳜鱼蛋白肽粗粉；/nS3，将步骤S2中的鳜鱼蛋白肽粗粉进行亲和柱层析，获得鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽。/n

【技术特征摘要】
1.鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1，将鳜鱼蛋白配置浓度为12-20％鳜鱼蛋白液，倒入发酵罐中，按3％-8％接种量分别接种清酒乳杆菌和腐生葡萄球菌，发酵温度设为20-40℃，发酵时间为3-7d，获得鳜鱼蛋白发酵液；
S2，将步骤S1中的鳜鱼蛋白发酵液进行灭菌和过滤，取滤液，将所述滤液放置于-18℃冷冻24h，再于4-10℃解冻24h，解冻液进行离心，去除沉淀，取上层清液，将所述上清液旋转蒸发、浓缩后、冷冻干燥，获得鳜鱼蛋白肽粗粉；
S3，将步骤S2中的鳜鱼蛋白肽粗粉进行亲和柱层析，获得鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽。


2.根据权利要求1所述的鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述灭菌温度为121℃，灭菌时间为30min；所述过滤采用2层滤纸或8层纱布；所述离心的转速为3000-5000转/分钟，所述离心时间为10-20min。


3.根据权利要求1所述的鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽的制备方法，其特征在于，步骤S3中，亲和填料包括螯合琼脂糖凝胶、高效亲和琼脂糖凝胶、琼脂糖亲和介质、金属镍螯合琼脂糖凝胶；所述亲和填料与锌离子结合，生成琼脂糖-锌填料，之后装柱，采用检测波长为220nm；平衡液为pH7.4的水溶液；洗脱液为pH3.5的水溶液，将所述鳜鱼蛋白肽粗粉溶于pH7.4的水溶液，浓度为40-100mg/mL，上样量为柱体积的2-3％，采用平衡液洗3个柱体积，去除未螯和的肽，再采用洗脱液洗脱，收集洗脱液，即为所述鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽。


4.如权利要求1-3任一项所述的制备方法获得的鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽。


5.含半胱氨酸肽-锌螯合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将碱性蛋白酶、胰酶、氨肽酶和羧肽酶，进行混合，制成混合酶，将所述混合酶添加至植物油料蛋白中，所述植物油料蛋白包括大豆油料蛋白、花生油料蛋白和菜籽油料蛋白，进行酶解反应，反应结束后，灭酶得到酶解液，再将酶解液离心去除残渣，获得的上清液经干燥，植物油料蛋白肽粗品粉末；所述油料蛋白肽粗品粉末进行亲和柱层析，获得植物油料源的含半胱氨酸肽，所述植物油料源的含半胱氨酸肽包括大豆源含半胱氨酸肽、花生源含半胱氨酸肽和菜籽源含半胱氨酸肽；
(2)将权利要求4所述的鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽与步骤(1)中的植物油料源的含半胱氨酸肽分别与ZnSO4·7H2O或ZnCl2进行螯和反应之后，经过浓缩冷冻干燥，分别获得鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽-锌粉末和植物油料源的含半胱氨酸肽-锌粉末；
(3)将步骤(2)中的鳜鱼蛋白源的含半胱氨酸肽-锌粉末和植物油料源的含半胱氨酸肽-锌粉末进行混合，获得含半胱氨酸肽-锌螯合物。


6.根据权利要求5所述的含半胱氨酸肽-锌螯合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述碱性蛋白酶、所述胰酶、所述氨肽酶和所述羧肽酶酶活比为20:4:1:2或15:15:1:1，所述植物油料蛋白按1:1-1:10的比例加入水，并且调节pH值至8.0-9.0，形成植物油料蛋白液，向所述植物油料蛋白液中按照蛋白活性与底物比10:1-100:1(u/g)加入所述混合酶，所述酶解温度为45-65℃，所述酶解反应时间为12-24h；所述亲和填料包括螯合琼脂糖凝胶、高效亲和琼脂糖凝胶、琼脂糖亲和介质、金属镍螯合琼脂糖凝胶；所述亲和填料与锌离子结合，生成琼脂糖-锌填料，之后装柱，采用检测波长为220nm；平衡液为pH7.4的...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢宁宁，黄晶晶，周迎芹，鄢嫣，殷俊峰，张福生，杨明柳，
申请(专利权)人：安徽省农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：安徽;34