一种欧李组织培养方法技术

本申请提供一种欧李组织培养方法，所述方法包括：(1)外植体采集与消毒：选择生长状况良好的欧李植株，将春季萌发的嫩枝并且带有腋芽的欧李茎段作为外植体，将外植体通过消毒液进行消毒，(2)腋芽诱导：将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，得到欧李组培苗，(3)增殖培养：将欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，得到欧李增殖苗，(4)生根培养：将欧李增殖苗转接至生根培养基，得到欧李生根苗，本申请的欧李组织培养方法，步骤简单，不需要诱导愈伤组织，直接利用带腋芽的茎段诱导产生芽，然后进行增殖培养和生根培养，可快速获得大量优质欧李生根组培苗，繁殖速度快，组培周期短。

【技术实现步骤摘要】
一种欧李组织培养方法
本申请涉及种植
，特别涉及一种欧李组织培养方法。
技术介绍
欧李(Cerasushumilis)是蔷薇科樱桃属多年生落叶小灌木，是我国特有的野生果树，其果实矿质元素铁和钙的含量高，俗称“钙果”。欧李是一种适应性很强的树种，具有耐干旱、耐瘠薄、耐寒冷、耐盐碱等特点，是一种良好的生态树种。欧李果实色泽鲜艳，风味独特，含有丰富的维生素、矿质元素以及有机酸、单宁等生物活性物质，果实既可鲜食，又能加工果汁、果酒、果酱等多种产品，欧李仁可入药。其用途广泛，经济价值极高。现有技术中，欧李通常采用种子和扦插等方法进行苗木繁育，但种子繁殖发芽较难，而扦插繁殖生根较难，因此常规育苗繁殖系数较低。通过组织培养的方法，可进行规模化生产，并且变异率低。现有欧李组培技术中大多先采用叶或茎段进行愈伤组织诱导，再用愈伤组织诱导产生芽，然后进行增殖培养和生根培养，方法步骤繁琐，不易操作，繁殖效率较低，组培周期长。
技术实现思路
有鉴于此，本申请实施例提供了一种欧李组织培养方法，以解决现有技术中存在的技术缺陷。本申请实施例提供了一种欧李组织培养方法，所述方法包括：(1)外植体采集与消毒：选择生长状况良好的欧李植株，将春季萌发的嫩枝并且带有腋芽的欧李茎段作为外植体，将所述外植体通过消毒液进行消毒，然后将消毒后的外植体进行切段，每段有1-2个腋芽；(2)腋芽诱导：将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，得到欧李组培苗，其中，所述启动培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；(3)增殖培养：将所述欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，得到欧李增殖苗，其中，所述增殖培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；(4)生根培养：将所述欧李增殖苗转接至生根培养基，得到欧李生根苗，其中，所述生根培养基包括：0.4～0.6质量份基本培养基、1.3～1.7质量份吲哚-3-乙酸、25～35质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.1。可选地，所述腋芽诱导、增殖培养和生根培养均在以下条件进行：25℃光照培养室中培养，每天光照14小时，光照强度2000-2500lx。可选地，将所述外植体通过消毒液进行消毒，然后将消毒后的外植体进行切段，包括：将所述外植体的枝条上叶片剪去，用自来水冲洗干净；将剪去叶片的所述外植体先放入75％乙醇溶液中消毒30～60秒，再放入2％次氯酸钠溶液中消毒15分钟；消毒完毕后用无菌水冲泡4-6遍，用灭菌滤纸吸干水分；将消毒后的所述外植体按照1节切1段的原则切段。可选地，将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，得到欧李组培苗，包括：将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，每瓶接种1个外植体，进行启动培养20～25天，得到欧李组培苗。可选地，将所述欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，得到欧李增殖苗，包括：将所述欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，每瓶接种7-10株所述欧李组培苗，培养25-45天，得到欧李增殖苗，其中，每个所述欧李增殖苗包括多节，每节增殖出8～12个的丛生枝条，每个所述丛生枝条的长度为3-4cm。可选地，将所述欧李增殖苗转接至生根培养基，得到欧李生根苗，包括：将所述欧李增殖苗从伸开的节间处倾斜剪断形成切口，保留茎尖，不保留基部的密集叶丛；将每节所述欧李增殖苗的切口端转接插入所述生根培养基内，转接大于20天，得到所述欧李生根苗，其中，每节的所述欧李增殖苗的高度大于2cm。可选地，所述启动培养基包括：1质量份基本培养基、0.6质量份6-苄氨基嘌呤、0.05质量份萘乙酸、40质量份糖、6质量份琼脂。可选地，所述增殖培养基包括：1质量份基本培养基、0.6质量份6-苄氨基嘌呤、0.05质量份萘乙酸、40质量份糖、6质量份琼脂。可选地，所述生根培养基包括：0.5质量份基本培养基、1.5质量份吲哚-3-乙酸、30质量份糖、6质量份琼脂。可选地，所述糖为白砂糖或蔗糖中的一种。本申请提供的欧李组织培养方法，步骤简单，不需要诱导愈伤组织，直接利用带腋芽的茎段诱导产生芽，然后进行增殖培养和生根培养，可快速获得大量优质欧李生根组培苗，繁殖速度快，组培周期短。附图说明图1是本申请实施例一的欧李组织培养方法的流程示意图；图2和图3是本申请实施例二的外植体执行腋芽诱导步骤后的效果图；图4和图5是本申请实施例二的欧李组培苗执行增殖培养步骤后的效果图；图6是本申请实施例中二的执行生根培养步骤后的效果图。具体实施方式在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本申请。但是本申请能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本申请内涵的情况下做类似推广，因此本申请不受下面公开的具体实施的限制。在本说明书一个或多个实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本说明书一个或多个实施例。在本说明书一个或多个实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。还应当理解，本说明书一个或多个实施例中使用的术语“和/或”是指并包含一个或多个相关联的列出项目的任何或所有可能组合。应当理解，尽管在本说明书一个或多个实施例中可能采用术语第一、第二等来描述各种信息，但这些信息不应限于这些术语。这些术语仅用来将同一类型的信息彼此区分开。例如，在不脱离本说明书一个或多个实施例范围的情况下，第一也可以被称为第二，类似地，第二也可以被称为第一。取决于语境，如在此所使用的词语“如果”可以被解释成为“在……时”或“当……时”或“响应于确定”。首先，对本申请中涉及的一个或多个术语名词进行示意性的解释。(1)基本培养基(MS)：植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。不同微生物的基本培养基是不相同的，例如：完全培养基：凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或者半天然培养基，成为完全培养基(completemedium,CM)，有时用符号“[+]”表示。完全培养基营养丰富，全面，一般可在基本培养基中加入富含氨基酸，维生素和碱基之类的天然物质配制而成。补充培养基：凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基，成为补充培养基(supplementalmedium,SM)。它是再基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。野生型菌株：从自然界分离得到的微生物再其发生突变前的原始菌株，成为野生型菌株(wildtypestrain)。营养缺陷型：野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养(氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种欧李组织培养方法，其特征在于，所述方法包括：/n(1)外植体采集与消毒：选择生长状况良好的欧李植株，将春季萌发的嫩枝并且带有腋芽的欧李茎段作为外植体，将所述外植体通过消毒液进行消毒，然后将消毒后的外植体进行切段，每段有1-2个腋芽；/n(2)腋芽诱导：将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，得到欧李组培苗，其中，所述启动培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；/n(3)增殖培养：将所述欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，得到欧李增殖苗，其中，所述增殖培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；/n(4)生根培养：将所述欧李增殖苗转接至生根培养基，得到欧李生根苗，其中，所述生根培养基包括：0.4～0.6质量份基本培养基、1.3～1.7质量份吲哚-3-乙酸、25～35质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.1。/n

【技术特征摘要】
1.一种欧李组织培养方法，其特征在于，所述方法包括：
(1)外植体采集与消毒：选择生长状况良好的欧李植株，将春季萌发的嫩枝并且带有腋芽的欧李茎段作为外植体，将所述外植体通过消毒液进行消毒，然后将消毒后的外植体进行切段，每段有1-2个腋芽；
(2)腋芽诱导：将切段后的所述外植体接种到启动培养基的瓶中，得到欧李组培苗，其中，所述启动培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；
(3)增殖培养：将所述欧李组培苗转接至增殖培养基的瓶中进行增殖培养，得到欧李增殖苗，其中，所述增殖培养基包括：1质量份基本培养基、0.3～0.7质量份6-苄氨基嘌呤、0.03～0.06质量份萘乙酸、35～45质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.2；
(4)生根培养：将所述欧李增殖苗转接至生根培养基，得到欧李生根苗，其中，所述生根培养基包括：0.4～0.6质量份基本培养基、1.3～1.7质量份吲哚-3-乙酸、25～35质量份糖、6～6.5质量份琼脂，pH6-6.1。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述腋芽诱导、增殖培养和生根培养均在以下条件进行：25℃光照培养室中培养，每天光照14小时，光照强度2000-2500lx。


3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述外植体通过消毒液进行消毒，然后将消毒后的外植体进行切段，包括：
将所述外植体的枝条上叶片剪去，用自来水冲洗干净；
将剪去叶片的所述外植体先放入75％乙醇溶液中消毒30～60秒，再放入2％次氯酸钠溶液中消毒15分钟；
消毒完毕后用无菌水冲泡4-6遍，用灭菌滤纸吸干水分；
将消毒后的所述外植体按照1节切1段的原则切段...

【专利技术属性】
技术研发人员：李相儒，吕涛，袁勤，苏建英，张吉树，隋嫣鸿，
申请(专利权)人：内蒙古库布其沙漠技术研究院，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15