一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物、制备方法及其用途技术

本发明专利技术公开了一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物、制备方法及其用途。所述苯并二呋喃酮类化合物对胃癌细胞系有明显的细胞毒性。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物、制备方法及其用途
本专利技术涉及化合物领域，尤其涉及一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物、制备方法及其用途。
技术介绍
癌症是一大类恶性肿瘤的统称。癌细胞的特点是无限制、无止境地增生，使患者体内的营养物质被大量消耗；癌细胞释放出多种毒素，使人体产生一系列症状；癌细胞还可转移到全身各处生长繁殖，导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热以及严重的脏器功能受损等。海洋微生物，由于其特殊的生存环境，在适应环境的进化过程中形成了独特的遗传代谢机制和化学防御机制，是目前新结构或新活性天然产物的主要来源。海洋抗癌药物研究在海洋药物研究中一直起着主导作用。美国每年有1500个海洋产物被分离出来，1％具有抗癌活性，目前至少已有10个以上海洋抗癌药物进入临床或临床前研究阶段。近年来，加强海洋微生物的活性筛选，寻找高效低毒的抗癌药物，直接用于临床或作为先导化合物进行结构修饰，已经成为海洋抗癌药物研究的发展趋势。另外，海洋微生物容易采集和培养，具有可规模化获取、环境友好、应用成本低等特点，其开发应用前景已获得国际共识。化学药物治疗是治疗癌症的重要临床手段，抗肿瘤药物的开发着重于靶向性药物的研究。肿瘤发展过程中，许多促癌转录因子在调节癌细胞的基因表达中具有重要作用，为开发新型癌症治疗药物提供重要的分子靶标。其中信号转导与转录激活因子3(Signaltransducersandactivatorsoftranscription3(STAT3))作为STAT家族成员之一，可以对酪氨酸激酶活化膜受体引发的基因转录进行调控。STAT3蛋白的异常性激活可能导致细胞的异常增殖和凋亡障碍，并促进正常细胞向恶性细胞转化。因而，以STAT3为靶点的抑制剂研发越来越成为国际生物公司开发治疗癌症药物的热点。STAT3抑制剂的抗肿瘤机制主要包括：(1)抑制STAT3—STAT3二聚体的形成；(2)抑制STAT3磷酸化；(3)抑制STAT3与DNA在细胞核内的结合。STAT3抑制剂有天然产物、肽类及拟肽类、小分子抑制剂；其中天然产物STAT3抑制剂结构复杂，研究较少；肽类及拟肽类活性好，但是由于体内生物利用度不高，发展成临床药物还有很大难度；因此，具有活性好、理化性质、药代性质理想等优势的小分子抑制剂是STAT3抑制剂研究的热点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AtrA。为实现上述目的，本专利技术提供一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA，其特征在于，其结构式如式(A)所示，本专利技术还提供一种所述具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的曲霉属真菌，作为菌种；发酵种子液制备：在锥形瓶中装入海水PDA液体培养基，高温灭菌后，接种上述菌种培养，将该培养物作为种子液；接种：采用固体发酵方式，准备发酵瓶，加入高温灭菌后的大米固体发酵培养基，接种上述种子液后室温静置培养；所述大米固体发酵培养基为大米70g，蛋白胨0.3g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水；萃取：待室温静置培养20-30天后，加入乙酸乙酯溶液浸泡发酵产物，发酵产物溶入乙酸乙酯溶液中，浸泡后，将上层乙酸乙酯溶液倒出，每瓶提取1-4次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到乙酸乙酯提取浸膏；分离：将乙酸乙酯提取浸膏经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～70:30进行梯度洗脱，得到9个组分，分别命名为组分F1到F9；组分F3以凝胶柱层析法得到7个亚组分，分别命名为亚组份SF3-1到SF3-7；亚组分SF3-7以制备高效液相色谱法分离，得到化合物苯并二呋喃酮类化合物AtrA。进一步，所述曲霉属真菌为曲霉属真菌AspergillusterreusCC-S06-18；任选的，所述海水PDA培养基成分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，1L海水；所述大米固体发酵培养基为大米70g，蛋白胨0.3g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水；优选厦门市白城海滩的海水。进一步，所述萃取为，待室温静置培养25天后，加入乙酸乙酯溶液500mL/瓶浸泡发酵产物，发酵产物溶入乙酸乙酯溶液中，浸泡后，将上层乙酸乙酯溶液倒出，每瓶提取3次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到乙酸乙酯提取浸膏；任选的，所述分离步骤中石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～70:30进行梯度洗脱为用石油醚-乙酸乙酯洗脱的体积比依次为95:5，92:8，90:10，88:12，85:15，83:17，80:20，75:25，70:30进行梯度洗脱。进一步，所述分离步骤中，凝胶柱层析法中使用的是SephadexLH-20为填料，甲醇为洗脱溶剂；任选的，所述高效液相色谱法是从20％的乙腈到70％的乙腈梯度洗脱20分钟，流速10毫升/分钟。进一步，所述的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA在制备抗肿瘤药物中的用途；优选的，所述抗肿瘤药物为防治胃癌药物。本专利技术还提供一种药物制剂，其特征在于，包括所述的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA。进一步，所述的制剂为丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或注射剂。本专利技术确定了海洋衍生的苯并二呋喃酮(AspeterreuroneA，简称AtrA)作为新的STAT3抑制剂。同时发现苯并二呋喃酮类化合物AtrA对胃癌细胞系有细胞毒性作用，并能诱导细胞周期停滞和凋亡。进一步的研究表明，苯并二呋喃酮类化合物AtrA能抑制STAT3磷酸化并诱导PARP蛋白的裂解。总的来说，苯并二呋喃酮类化合物AtrA代表了一类新型STAT3抑制剂，具有开发为用于治疗人类癌症(尤其是胃癌)药物的潜力。附图说明图1是化合物AtrA对人胃癌细胞的细胞周期进程的影响结果图。图2是化合物AtrA对人胃癌细胞凋亡的影响结果图。图3是化合物AtrA诱导人胃癌细胞凋亡的统计结果图。图4是化合物AtrA对STAT3磷酸化的影响结果图。具体实施方式下面详细描述本专利技术的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本专利技术，而不能理解为对本专利技术的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。实施例1：苯并二呋喃酮类化合物的提取与分离菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的曲霉属真菌AspergillusterreusCC-S06-18，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物Aspeterreurone A，其特征在于，其结构式如式(A)所示，/n

【技术特征摘要】
1.一种具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA，其特征在于，其结构式如式(A)所示，





2.一种权利要求1所述具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
菌种的准备：使用海水PDA培养基，高温灭菌，制成平板，置于常温状态下，接种活化好的曲霉属真菌，作为菌种；
发酵种子液制备：在锥形瓶中装入海水PDA液体培养基，高温灭菌后，接种上述菌种培养，将该培养物作为种子液；
接种：采用固体发酵方式，准备发酵瓶，加入高温灭菌后的大米固体发酵培养基，接种上述种子液后室温静置培养；所述大米固体发酵培养基为大米70g，蛋白胨0.3g，谷氨酸钠0.1g，100ml海水；
萃取：待室温静置培养20-30天后，加入乙酸乙酯溶液浸泡发酵产物，发酵产物溶入乙酸乙酯溶液中，浸泡后，将上层乙酸乙酯溶液倒出，每瓶提取1-4次，所得提取液用滤纸过滤，减压浓缩至固态，即得到乙酸乙酯提取浸膏；
分离：将乙酸乙酯提取浸膏经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比95:5～70:30进行梯度洗脱，得到9个组分，分别命名为组分F1到F9；组分F3以凝胶柱层析法得到7个亚组分，分别命名为亚组份SF3-1到SF3-7；亚组分SF3-7以制备高效液相色谱法分离，得到化合物苯并二呋喃酮类化合物AtrA。


3.根据权利要求2所述具有抗肿瘤活性的苯并二呋喃酮类化合物AspeterreuroneA的制备方法，其特征在于，所述曲霉属真菌为曲霉属真菌AspergillusterreusCC-S06-18；
任选的，所述海水PDA培养基成分为马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15-20g，1...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟毅，覃江江，邵宗泽，杨静，
申请(专利权)人：自然资源部第三海洋研究所，中国大洋矿产资源研究开发协会中国大洋事务管理局，
类型：发明
国别省市：福建;35