一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮及其制备方法与应用，可有效解决从小叶莲中提取异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，并用于制备抗前列腺癌药物的问题，所述的异戊烯基化黄酮类化合物是从小叶莲中提取的桃儿七酮为桃儿七酮NF（Sinoflavonoid NF Ⅰ）、桃儿七酮NG（Sinoflavonoid NG Ⅱ）、桃儿七酮NH（Sinoflavonoid NH Ⅲ）、桃儿七酮NI（Sinoflavonoid NI Ⅳ），本发明专利技术从小叶莲药材中提取分离新型异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮NF―NI(sinoflavonoid NF―NI)对人前列腺癌细胞株PC‑3具有细胞毒活性，具备抗前列腺癌药物的前景，制备方法重现性好，所得化合物纯度高，有利于对其进行进一步的药理和临床研究，开拓了小叶莲药物的药物价值和制备抗前列腺癌药物的新途径。

【技术实现步骤摘要】
一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮及其制备方法与应用
本专利技术涉及医药，特别是从小叶莲中提取异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，并用于制备抗前列腺癌药物的一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮及其制备方法与应用。
技术介绍
前列腺癌是男性最常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤，发生率在大多数国家呈现递增趋势，不仅是欧美男性中发病率最高的一种恶性肿瘤，也是我国近年来发病率和病死率升高速度最快的恶性肿瘤。50岁以后随着年龄的增长，前列腺癌发病率迅速升高，已经成为严重影响老年男性健康的问题之一。目前还没有明确用于根治前列腺癌的方法，手术和放疗是临床上常用的治疗手段，但都存在一定的局限性，治疗后的存活率不高，并发症较多。目前临床上广泛使用的合成的抗前列腺癌药物普遍存在着毒副作用如脱发、贫血和胃肠不适等现象。因此加强前列腺癌治疗的研究，延长患者的生存期，改善患者的生活质量是药学工作者的当务之急。中草药在抗肿瘤方面的应用历史悠久，从中草药中寻找高效低毒的抗肿瘤活性物质，研制选择性强、毒副作用低的新型抗肿瘤药物是药学科研工作者迫切解决的首要问题。小叶莲是小檗科桃儿七属植物鬼臼Sinopodophyllumemodi(Wall.)Ying.的干燥成熟果实。鬼臼是一种具有悠久历史的药用植物，古代《神农本草经》中就有记载：杀大毒，疗咳嗽喉疾，风邪烦感，失魄妄见。不入汤。以后的历代本草亦多有记载，主要用于活血散结、祛风除湿、虫蛇咬伤、跌打、心胃痛、风寒咳嗽、月经不调、铁棒锤中毒、风湿筋骨痛及气管炎等症。鬼臼分布比较广泛，我国主要分布在四川、青海、西藏、甘肃、陕西。小叶莲作为传统藏药始载于《月王药诊》，具有悠久的药用历史。化学成分研究表明主要含有木脂素和黄酮类化合物，其中异戊烯基化黄酮是小叶莲中代表性的活性成分，具有重要而广泛的生物活性如抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗骨质疏松、预防老年痴呆、抗糖尿病、心脑血管保护、雌激素样等。但如何从小叶莲提取异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，并实现在制备抗前列腺癌药物中的应用，迄今为止未见有专利或文献报道。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮及其制备方法与应用，可有效解决从小叶莲中提取异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，并用于制备抗前列腺癌药物的问题。本专利技术一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮为桃儿七酮NF(SinoflavonoidNFⅠ)、桃儿七酮NG(SinoflavonoidNGⅡ)、桃儿七酮NH(SinoflavonoidNHⅢ)、桃儿七酮NI(SinoflavonoidNIⅣ)，分子结构式分别为：其制备方法是，小叶莲药材6–9kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，每次提取时间为1.5–2h(小时，以下同)，减压回收乙醇得浸膏状乙醇提取物，混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2–3.2L，时间为1.5–2h；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱，每一梯度用9.1–13L洗脱液，流速为10–15mL/min，每350–500mL体积为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1:1的石油醚-丙酮和体积比5:1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到组份Fr.1–Fr.16；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为20–32mL/h，每5–9mL为一流份、收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比1:1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份3–11、流份12–18、流份19–25，得到3个亚组份Fr.2-1、Fr.2-2、Fr.2-3；将亚组份Fr.2-2经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为70:30的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，收集保留时间为19min的色谱峰，回收溶剂，得桃儿七酮NG(SinoflavonoidNGⅡ)；将组分Fr.7经开放ODS柱色谱，以体积比(v/v)60:40、70:30、80:20、90:10的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，每一梯度400–600mL，每一流份为40–60mL，流速为1mL/min，共收集40个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比2:3的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–7、流份8–14、流份16–25、流份26–32、流份33–36、流份37–40，得到6个亚组份Fr.7-1、Fr.7-2、Fr.7-3、Fr.7-4、Fr.7-5、Fr.7-6；亚组份Fr.7-5经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为80:20的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，分别收集保留时间为39min、42min、58min的色谱峰，回收溶剂，分别得桃儿七酮NF(SinoflavonoidNFⅠ)、桃儿七酮NH(SinoflavonoidNHⅢ)、桃儿七酮NI(SinoflavonoidNIⅣ)。本专利技术方法制得的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮具有抗前列腺癌细胞活性，可有效用于制备治疗抗前列腺癌的药物。本专利技术涉及从小叶莲药材中提取分离新型异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮NF―NI(sinoflavonoidNF―NI)及其在制备抗前列腺癌药物中的应用，该异戊烯基化黄酮类化合物对人前列腺癌细胞株PC-3具有细胞毒活性，具备抗前列腺癌药物的前景，且其制备方法重现性好，所得化合物纯度高，有利于对其进行进一步的药理和临床研究，开拓了小叶莲药物的药物价值和制备抗前列腺癌药物的新途径，有显著的经济和社会效益。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术在具体实施中可由以下实施例给出。实施例1本专利技术在具体实施中，一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮的制备方法，小叶莲药材9kg为原料，以18L本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，其特征在于，所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮为桃儿七酮NF(Sinoflavonoid NF Ⅰ)、桃儿七酮NG(Sinoflavonoid NG Ⅱ)、桃儿七酮NH(Sinoflavonoid NH Ⅲ)、桃儿七酮NI(Sinoflavonoid NI Ⅳ)，分子结构式分别为：/n

【技术特征摘要】
1.一种异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮，其特征在于，所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮为桃儿七酮NF(SinoflavonoidNFⅠ)、桃儿七酮NG(SinoflavonoidNGⅡ)、桃儿七酮NH(SinoflavonoidNHⅢ)、桃儿七酮NI(SinoflavonoidNIⅣ)，分子结构式分别为：





2.权利要求1所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮的制备方法，其特征在于，以小叶莲药材6–9kg为原料，以2–5倍原料重量、体积浓度为75％–95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90–95℃，每次提取时间为1.5–2h，减压回收乙醇得浸膏状乙醇提取物，混悬于2–3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2–3.2L，时间为1.5–2h；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱，每一梯度用9.1–13L洗脱液，流速为10–15mL/min，每350–500mL体积为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1:1的石油醚-丙酮和体积比5:1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到组份Fr.1–Fr.16；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为20–32mL/h，每5–9mL为一流份、收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比1:1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份3–11、流份12–18、流份19–25，得到3个亚组份Fr.2-1、Fr.2-2、Fr.2-3；将亚组份Fr.2-2经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为70:30的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，收集保留时间为19min的色谱峰，回收溶剂，得桃儿七酮NG(SinoflavonoidNGⅡ)；将组分Fr.7经开放ODS柱色谱，以体积比60:40、70:30、80:20、90:10的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，每一梯度400–600mL，每一流份为40–60mL，流速为1mL/min，共收集40个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比2:3的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–7、流份8–14、流份16–25、流份26–32、流份33–36、流份37–40，得到6个亚组份Fr.7-1、Fr.7-2、Fr.7-3、Fr.7-4、Fr.7-5、Fr.7-6；亚组份Fr.7-5经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为80:20的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，分别收集保留时间为39min、42min、58min的色谱峰，回收溶剂，分别得桃儿七酮NF(SinoflavonoidNFⅠ)、桃儿七酮NH(SinoflavonoidNHⅢ)、桃儿七酮NI(SinoflavonoidNIⅣ)。


3.根据权利要求2所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮的制备方法，其特征在于，以小叶莲药材9kg为原料，以18L、体积浓度为95％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为95℃，每次提取时间为1.5h，减压回收乙醇得浸膏状乙醇提取物，混悬于3.2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次3.2L，时间为1.5h；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱，每一梯度用13L洗脱液，流速为15mL/min，每500mL体积为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1:1的石油醚-丙酮和体积比5:1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到组份Fr.1–Fr.16；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为32mL/h，每6–9mL为一流份、收集25个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，以体积比1:1的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份3–11、流份12–18、流份19–25，得到3个亚组份Fr.2-1、Fr.2-2、Fr.2-3；将亚组份Fr.2-2经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为70:30的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，收集保留时间为19min的色谱峰，回收溶剂，得桃儿七酮NG(SinoflavonoidNGⅡ)；将组分Fr.7经开放ODS柱色谱，以体积比60:40、70:30、80:20、90:10的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，每一梯度600mL，每一流份为60mL，流速为1mL/min，共收集40个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比2:3的石油醚-丙酮作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–7、流份8–14、流份16–25、流份26–32、流份33–36、流份37–40，得到6个亚组份Fr.7-1、Fr.7-2、Fr.7-3、Fr.7-4、Fr.7-5、Fr.7-6；亚组份Fr.7-5经制备型高效液相色谱纯化，以体积比为80:20的甲醇-水混合溶剂系统洗脱，色谱柱为YMC-PackODS-A，流速为7mL/min，分别收集保留时间为39min、42min、58min的色谱峰，回收溶剂，分别得桃儿七酮NF(SinoflavonoidNFⅠ)、桃儿七酮NH(SinoflavonoidNHⅢ)、桃儿七酮NI(SinoflavonoidNIⅣ)。


4.根据权利要求2所述的异戊烯基化黄酮类化合物桃儿七酮的制备方法，其特征在于，以小叶莲药材6kg为原料，以5倍原料重量、体积浓度为75％的乙醇加热回流提取3次，提取温度为90℃，每次提取时间为2h，减压回收乙醇得浸膏状乙醇提取物，混悬于2L的蒸馏水中，依次以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，每次2L，时间为1.5h；将乙酸乙酯萃取部位经硅胶柱色谱分离，依次用体积比为100:0、100:5、100:7、100:10、100:30、100:50、100:70、100:100、100:200、0:100的石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱，每一梯度用9.1L洗脱液，流速为10mL/min，每350mL体积为一流份，收集260个流份，各个流份经硅胶薄层色谱检测分析，用GF254薄层板，分别以体积比1:1的石油醚-丙酮和体积比5:1的二氯甲烷-甲醇作为展开剂，以体积比10:90的硫酸-乙醇溶液作为显色剂，105℃加热3–5min，根据薄层色谱检测结果，分别合并流份1–35、流份36–85、流份86–104、流份105–115、流份116–132、流份133–144、流份145–157、流份158–163、流份164–170、流份171–182、流份183–188、流份189–195、流份196–204、流份205–208、流份209–234、流份235–260，得到组份Fr.1–Fr.16；将组份Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱，甲醇洗脱，流速为20m...

【专利技术属性】
技术研发人员：王俊敏，刘延霆，孙彦君，冯卫生，陈辉，陈豪杰，赵晨，韩瑞杰，潘如意，柴站，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南;41