【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制备液体培养基的精简型方法
技术介绍
液体细胞培养基制造工艺利用大量的酸和碱来使某些培养基组分溶解。此类向液体调配物的添加会引起批次间变化,可能随时间推移而修饰或破坏敏感培养基组分,并且可能导致金属离子浓度发生变化。长期需要一种可靠、有效的用于制备液体细胞培养基的方法,在所述方法中金属离子的浓度可以得到控制并且重金属的引入会减少,从而减少了下游环境关注。附图说明图1描绘了通过浓缩液体方法(左表)与通过精简型液体方法(右表)制备的液体培养基的比较。在一个实施例中,浓缩液体技术采用平均7小时制备时间而精简型液体采用平均3-4小时制备时间。图2浓缩液体方法在液体储备组分的制备期间使用大量的酸和碱。所述表显示,在通过浓缩技术制备的示例性液体培养基中,酸&碱占最终体积的1.88%。在此,浓缩技术使用了18.804mL/L的酸/碱。精简型液体方法完全消除了12N浓酸的使用并且显著减少了5N酸和5N碱的使用,从而减少了将金属污染物引入到最终调配物中。图3描绘了在酸(5NHCl)和碱(5NNaOH)中所测量的各种金属浓度(污染物)。针对金属污染物,通过ICP-MS对四批5NHCl和5NNaOH进行了分析。目前的浓缩液体技术使用大量的酸和碱,这促成最终液体培养基中的金属污染物浓度的变化。(A)描绘了与(B)中显示的少于30μg/L的金属相比以更高浓度存在的金属的量。精简型液体方法消除了12N浓酸的使用并且显著减少了5N酸和5N碱的使用,从而减少了与金属污染物相关联的浓度和变化。图4显示了通过浓缩液体方法与 ...
【技术保护点】
1.一种制备液体培养基的方法,其包括:/ni)基于培养基组分的pH、溶解度和浓度将其分成组;/nii)根据调配物中的组分转化氨基酸的游离碱形式/盐形式,以针对特定pH;/niii)以允许所述组最佳溶解的顺序执行所述组的添加;/n其中与未使用以上步骤i)、ii)和iii)制备的培养基相比,所得液体培养基使所述组溶解所需要的酸和/或碱添加较少。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171116 US 62/587,3251.一种制备液体培养基的方法,其包括:
i)基于培养基组分的pH、溶解度和浓度将其分成组;
ii)根据调配物中的组分转化氨基酸的游离碱形式/盐形式,以针对特定pH;
iii)以允许所述组最佳溶解的顺序执行所述组的添加;
其中与未使用以上步骤i)、ii)和iii)制备的培养基相比,所得液体培养基使所述组溶解所需要的酸和/或碱添加较少。
2.根据权利要求1所述的制备液体培养基的方法,其中所述所得液体培养基:
(a)使所述组分溶解所需要的酸和/或碱添加较少;和/或
(b)来自酸和/或碱添加的金属污染物减少;和/或
(c)金属的批次间变化较小;
(d)因为需要制备较少的溶液,所以需要较少的调配时间,
这是与通过在液体培养基的制备中不使用根据权利要求1所述的步骤i)、ii)和iii)的另一方法制备的所述液体培养基相比。
3.根据权利要求1到2所述的制备液体培养基的方法,其中金属中的所述批次间变化小于10%。
4.根据权利要求1到3所述的制备液体培养基的方法,其中总金属浓度的批次间变化小于约0.001%、小于约0.01%、小于约0.1%、小于约1%、小于约1-2%、小于约1-3%、小于约1-4%、小于约1-5%、小于约1-6%、小于约1-10%、小于约1-20%、小于约1-30%、小于约1-40%、小于约1-50%、小于约1-60%、小于约1-70%、小于约1-80%或小于约1-90%。
5.根据权利要求1到4所述的制备液体培养基的方法,其中任何金属浓度的各个液体批次之间的批次间变化小于约0.001%、小于约0.01%、小于约0.1%、小于约1%、小于约2%、小于约3%、小于约4%、小于约5%、小于约6%、小于约10%、小于约15%、小于约20%、小于约30%、小于约40%、小于约50%、小于约0.001-1%、小于约0.001-5%、小于约0.001-10%、小于约1-10%、小于约10-20%、小于约20-30%、小于约30-40%、小于约40-50%、小于约50-100%、小于约50-90%、小于约50-80%、小于约50-70%、小于约50-60%等。
6.根据权利要求1到5所述的制备液体培养基的方法,其中所使用的酸和碱的体积的减少为约10-40倍。
7.根据权利要求1到6所述的制备液体培养基的方法,其中所使用的酸和碱的体积的减少为约22倍。
8.根据权利要求1到7所述的制备液体培养基的方法,其中在所述方法中消除了12N浓酸的使用。
9.根据权利要求1到8所述的制备液体培养基的方法,其中与通过任何其它方法制备的液体培养基相比,在通过根据权利要求1所述的方法制备的所得液体中,一种或多种污染物金属的减少为约0.0001%到100%。
10.根据权利要求1到9所述的制备液体培养基的方法,其中与通过任何其它方法制备的液体培养基相比,在通过根据权利要求1所述的方法制备的所得液体中,所述一种或多种污染物金属的减少为约0.0001%到0.001%、约0.0001%到0.01%、约0.0001%到0.1%、约0.0001%到1%、约0.0001%到2%、约0.0001%到3%、约0.0001%到4%、约0.0001%到5%、约0.0001%到10%、约1%-5%、约1%-10%、约1%-15%、约1%-20%、约1%-25%、约1%-35%、约10-20%、约10-30%、约10-40%、约10-50%、约10-60%、约10-70%、约10-80%、约10-90%、约10-1...
【专利技术属性】
技术研发人员:N·阿莱斯,D·艾伊希纳,G·洛伦佐,M·雷诺兹,P·古尔登,R·博尼法斯,M·菲尔普斯,M·卡恩,R·菲克,
申请(专利权)人:生命技术公司,
类型:发明
国别省市:美国;US
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