一种治疗脓毒症的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种治疗脓毒症的多肽PEP‑C1，其氨基酸序列为Asp‑Ser‑Leu‑Trp‑Asn‑Ile‑Pro。本发明专利技术研究结果显示多肽PEP‑C1对脓毒症小鼠具有良好的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗脓毒症的多肽及其应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种治疗脓毒症的多肽及其应用。
技术介绍
脓毒症是指临床上由病菌感染引起的全身炎症反应综合征。虽然脓毒症是由感染引起，但是一旦发生后，其发生发展遵循其自身的病理过程和规律，故从本质上讲脓毒症是机体对感染性因素的反应。临床上，常见于手术创伤及免疫力低下等情况引起的细菌进入血液循环，在其中生长繁殖并产生毒素而引起的全身性严重感染，还可进一步发展为脓毒症休克和多器官功能衰竭。脓毒症的死亡率高达30％-70％，全球每年有超过1800万严重脓毒症病例，并且这一数字还以每年1.5％～8.0％的速度上升。脓毒症治疗花费高，医疗资源消耗大，严重影响人类的生活质量，已经对人类健康造成巨大威胁，且至今无有效的药物用于脓毒症的治疗，因此临床上迫切需要用于脓毒症治疗的防治药物。脓毒症涉及到复杂的全身炎症网络效应、免疫功能障碍、凝血功能异常以及宿主对不同病原物的异常反应等多方面的因素。近年来的研究发现，补体系统在脓毒症的发病机制中起重要的作用。在脓毒症起始阶段存在补体系统的过度激活，导致血浆C5a水平的升高，并诱导其受体C5aR在细胞上的表达异常，C5a-C5aR之间过度作用对机体产生损害，造成脓毒症休克等严重病症表现。在炎症介质的调节中C5a和C5aR起重要作用，因此以C5a及C5aR为靶向蛋白，筛选或者设计用于治疗脓毒症的分子抑制剂或抗体药物是非常有价值和前景的。多肽药物是近年来世界新药研究开发的热点，也是我国生物医药研究的重点方向之一。与传统药物相比，多肽药物具有以下明显的优势：(1)活性高，在很低的剂量和浓度下即可表现出显著的高活性；(2)分子量小，相对蛋白质而言易于人工化学合成，方便进行结构改造；(3)合成效率高。近年来技术的进步使多肽的固相合成变得简单，过程自动化，易于控制；(4)副作用小。由于许多多肽药物采用与人同源的序列，加之分子量小，无抗原性，不易引起免疫反应。开发特异性高、且耐受性好的治疗脓毒症的多肽药物，是临床上急需解决的问题。
技术实现思路
针对现有技术缺乏针对脓毒症的专门治疗药物的状况，本专利技术提供一种针对特异蛋白靶点治疗脓毒症的多肽PEP-C1。根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供一种治疗脓毒症的多肽PEP-C1，其氨基酸序列为：Asp-Ser-Leu-Trp-Asn-Ile-Pro(SEQIDNO：1)。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提供所述多肽在制备治疗脓毒症的药物中的应用。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提供一种药物组合物，该药物组合物包括活性成分多肽PEP-C1和药学上可接受的载体。所述药物组合物包括但不限于注射剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液、丸剂等。所述药学上可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等，必要时还可以加入香味剂、甜味剂等。本专利技术所述多肽作为活性成分时应为“有效量”的，所述“有效量”是指无毒性，但足够量的提供所需的作用的药物或药剂。在本专利技术的药物组合物中，一种成分的“有效量”是指该成分在和其他成分联合应用时有效提供所需效应的量。“有效量”会因受试者的不同而不同，依据年龄和个体的一般情况，特定的活性药物等等。因此，不可能总是指精确的“有效量”，然而，任何个体病例中合适的“有效量”可以由本领域普通技术人员应用常规的实验方法来测定。本专利技术所述多肽可以采用本领域技术人员已知的方法(例如固相合成方法)制备得到，以及可以采用本领域已知的分离纯化方法(例如高效液相色谱法)分离纯化。本专利技术的有益效果：目前研究发现脓毒症涉及的信号通路中，C5a和C5aR分子起着极为关键的作用，本专利技术基于C5a这个靶点蛋白，应用专有的多肽分子系统，通过模拟C5a蛋白分子立体结构，应用包括分子对接、同源模建、组合库设计、化学信息学、从头设计、结构生物学、生物大分子模拟、药效团、ADME分析等分子模拟和药物设计方法，以C5a蛋白为靶向分子，设计出能够阻断C5a-C5aR结合的特异性多肽若干条。通过一系列的活性验证试验，筛选出一条对脓毒症有显著治疗作用的多肽PEP-C1。本专利技术研究结果显示多肽PEP-C1在治疗盲肠结扎穿孔模型(CLP)脓毒症小鼠过程中显示出良好的效果，并且具有良好的稳定性。附图说明图1为多肽PEP-C1的MS图谱；图2为多肽PEP-C1的HPLC图谱；图3为多肽对脓毒症小鼠细胞因子TNFα的影响；图4为多肽对脓毒症小鼠细胞因子IL-1β的影响；图5为多肽对脓毒症小鼠细胞因子MIP-2的影响。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外，应理解，在阅读了本专利技术所记载的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本专利技术所限定的范围。实施例1多肽PEP-C1的化学合成合成采用固相合成法从C-端到N-端合成多肽。合成采用化学合成仪(AMS586MultiplePeptideSynthesiser，ABIMED，Germany)合成，用Fmoc保护的氨基酸作为原料，以Fmoc-Rinklinkerresin树脂为附着基质，用HOBT作为缩合剂，DIC作为激活剂，逐层合成多肽。合成过程中用2％乙酸酐的DMF溶液做侧链封闭试剂；用20％哌啶做Fmoc去除试剂，合成完毕经过TFA切割和侧链基团的去除操作。合成完毕的粗产物经离心收集，用R-HPLC(Waters741)和C18-column(WatersDelta-pakTM，40*100mm，15um，100埃)纯化得到纯度大于98％的多肽，冻干成粉末。多肽Asp-Ser-Leu-Trp-Asn-Ile-Pro，其MS图谱和HPLC图谱分别见图1、2。如附图所示，多肽在7.698min处有一特征峰，分子量为843.1(理论分子量为843.93)。HPLC色谱条件为：流动相：流动相A：含0.1％三氟乙酸的水溶液；流动相B：含0.1％三氟乙酸的乙腈(80％)-水(20％)溶液；洗脱程序：0→20min，流动相B38％→58％；流速：1ml/min；检测波长：220nm；保留时间：20min。实施例2多肽PEP-C1的活性试验目前脓毒症的动物实验研究主要基于诱导方法的脓毒症动物模型，其中小鼠盲肠结扎穿孔模型(CLP)，因动物价廉易操作、简单等优点被广泛应用。本研究将利用CLP建立小鼠脓毒症模型，通过评价小鼠生存率、细胞炎症因子水平测定(TNFa、IL-1β、MIP-2)等指标的变化，对CLP诱导脓毒症的致病机制进行研究，为后期开展抗炎药物筛选提供技术支撑。本研究采用这一模型进行多肽PEP-C1对脓毒症的研究。1实验方法1.1盲肠结扎穿孔模型(CLP)建立C57BL/6小鼠麻醉后仰本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种治疗脓毒症的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为：/nAsp-Ser-Leu-Trp-Asn-Ile-Pro。/n

【技术特征摘要】
1.一种治疗脓毒症的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为：
Asp-Ser-Leu-Trp-Asn-Ile-Pro。


2.如权利要求1所述的多肽在制备治疗脓毒症的药物中的应用。


3.一种药物组合物，其特征在于，所述药物...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵树民，石松传，鲍勇刚，威廉姆·坎贝尔，
申请(专利权)人：北京博肽未名生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11