一种从花生衣中分离多种活性成分的方法技术

本发明专利技术提供了一种从花生衣中分离多种活性成分的方法，包括以下步骤：对花生衣原料采用亲脂性有机溶剂加热回流提取2次以上提取高级脂肪酸，提取渣再次经过热水提取，经过超滤、纳滤后，纳滤膜截留液处理得到花生衣原花青素，纳滤膜透过液用聚酰胺树脂柱吸附，洗脱后得到花生衣儿茶素；热水提取渣加入低碳醇，通过层析氧化铝树脂柱得到花生衣白藜芦醇。本发明专利技术方法，简单地，可连续提取多种花生衣活性成分，可将花生衣资源综合利用，工艺连贯、简单，且各种活性成分的含量高、收率高、不含黄曲霉毒素，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种从花生衣中分离多种活性成分的方法
本专利技术涉及花生衣活性成分的分离方法，具体涉及一种从花生衣中分离多种活性成分的方法。
技术介绍
花生衣是豆科落花生属植物落花生ArachishypogaeaL.的种皮，即花生外面那层紫红色的薄皮。花生衣含有丰富的活性成分，并有止血、散瘀、消肿的功效，临床上有广泛的应用，食用方法以煮为佳。中医认为，花生红衣能够补脾胃之气，能达到养血止血的作用。西医认为，花生红衣能抑制纤维蛋白的溶解，增加血小板的含量，改善血小板的质量，改善凝血因子的缺陷，加强毛细血管的收缩机能，促进骨髓造血机能。近代科学研究发现，花生衣中富含多种对健康有益的天然活性成分。花生衣含有高级脂肪酸，尤其是不饱和脂肪酸，具有降低血脂和血清胆固醇的功能，可以减少冠心病的发病危险，防止血小板聚集，阻止血栓形成。花生衣富含原花青素，具有强抗氧化、消除自由基的作用，可有效消除超氧阴离子自由基和羟基自由基，还可以改善血液循环、保护视力、消除水肿、滋润皮肤、保护心脑血管、抗炎抗过敏等。花生衣中还含有白藜芦醇和儿茶素，都是抗氧化性极强的天然化合物。然而生产和生活实际中，人们往往忽略了花生衣的营养保健价值。食用花生时，往往将花生衣除去，就是重要的体现。现有的工艺技术对花生衣的利用，通常是针对其中的某一种活性成分，没有实现同时获得多种花生衣活性成分，花生衣资源没有得到综合利用，造成了极大的浪费和环境污染。例如：CN101665482A公开了花生衣原花青素纯化方法，是以脱脂花生衣为原料，经乙醇微波萃取、浓缩、真空冷冻干燥、溶解、HPD-826大孔吸附树脂吸附、乙醇洗脱、浓缩、干燥等步骤，得到花生衣原花青素精制品。CN103194089A公开了一种利用微波辅助提取花生衣红色素的方法，是以花生衣为原料，经乙醇水浸泡、微波提取、无水乙醇二级提取、膜过滤、浓缩、冷冻干燥等步骤，得到花生衣红色素产品。CN103877144A公开了花生衣活性组分的应用及包含该花生衣活性组分的组合物，是以花生衣为原料，经乙醇和水的混合溶液浸提、HP-20树脂吸附、水洗、乙醇洗脱、浓缩、干燥，得到花生衣活性组分(花青素)。CN108285458A公开了从花生衣中提取原花青素A2的方法，是以花生衣为原料，经热水提取、大孔树脂吸附、洗脱、中低压制备色谱精细分离，得到原花青素A2。此外，市面上现有的花生衣提取物中，普遍存在的一个严重的质量问题——黄曲霉毒素超标——一直未得到妥善的解决。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素，黄曲霉毒素及其产生菌在自然界中分布广泛。谷物和油料作物的种子及加工产品、干鲜果品、调味品、烟草、乳及乳制品、肉类、鱼虾类和动物饲料中均能检出黄曲霉毒素，花生和玉米最容易污染。黄曲霉毒素能通过食料转移到动物的乳汁、肝、肾和肌肉组织中积留。黄曲霉毒素属于超剧毒物质，能诱发动物肝癌，对某些动物能引起急性中毒致死。因此，目前亟需一种即能够连续分离多种花生衣活性成分、实现花生衣资源综合利用，又能够彻底解决花生衣相关产品黄曲霉毒素残留的方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种全新的、可连续提取多种花生衣活性成分，可将花生衣资源综合利用，工艺连贯、简单，可操作性强，生产成本低，不使用有毒有害化工溶剂，安全环保，且各种活性成分的含量高、收率高、不含黄曲霉毒素，适合工业化生产的从花生衣中分离多种活性成分的方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从花生衣中分离多种活性成分的方法，包括以下步骤：(1)高级脂肪酸的提取与分离：将花生衣破碎，加入亲脂性有机溶剂，加热回流提取2次以上，过滤，得到提取渣1待用；合并提取液为提取液1，将提取液1通过硅胶层析柱，收集硅胶层析柱流出液，浓缩得到淡黄色油状物，即花生衣高级脂肪酸；(2)超滤、纳滤：将步骤(1)提取渣1用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，再加入热水提取，过滤得到提取渣2待用，合并热水提取液得提取液2，冷却至室温，先用超滤膜过滤，收集超滤膜透过液；超滤膜透过液再用纳滤膜过滤，分别收集纳滤膜截留液和纳滤膜透过液待用；(3)原花青素的分离：取步骤(2)纳滤膜截留液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣原花青素；(4)儿茶素的分离：取步骤(2)纳滤膜透过液，用聚酰胺树脂柱吸附，乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣儿茶素；(5)白藜芦醇的提取与分离：往步骤(2)提取渣2中加入低碳醇，加热提取，过滤，得低碳醇提取液，将低碳醇提取液通过层析氧化铝树脂柱，收集层析氧化铝树脂柱流出液，减压浓缩，浓缩液降温冷冻，搅拌析晶，将晶体过滤，真空干燥，得花生衣白藜芦醇。优选的，步骤(1)中，所述亲脂性有机溶剂是指乙酸乙酯，乙醚、石油醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油中的一种或几种，优选地分为两次提取，所用亲脂性有机溶剂的用量依次为花生衣原料重量的8～10倍、5～8倍(L/kg)，回流提取的时间依次为2～3小时、1～2小时。有机溶剂加热提取的温度为60～80℃。专利技术人发现，若花生衣只经过一次提取，还会残存部分黄曲霉毒素，因此，本专利技术采用2次以上的亲脂性有机溶剂进行提取。优选地，第一次提取时，有机溶剂为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂，优选为石油醚和乙酸乙酯按照体积比4～6:1的混合溶剂；第二次提取时，有机溶剂为6#溶剂油和/或120#溶剂油，优选6#溶剂油和/或120#溶剂油的体积比为1～3:1～3。专利技术人预料不到地发现，按照上述溶剂分为2次进行提取，能够将花生衣中的高级脂肪酸充分浸出；同时最大限度将花生衣原料中普遍存在的黄曲霉毒素充分浸出，防止后续步骤的产品中有黄曲霉毒素残留。也即同时达到了活性成分的收率和杂质黄曲霉毒素的充分除去的完美平衡。优选的，步骤(1)中，所述柱层析硅胶的用量为花生衣原料重量的0.1～0.2倍(L/kg)，所述硅胶层析柱的高径比为5～8:1，上柱的流速为0.5～1.0BV/小时。将有机溶剂提取液通过硅胶层析柱的目的，第一是除去有机溶剂提取液中的脂溶性色素等杂质，第二是吸附有机溶剂提取液中来源于花生衣原料本身的黄曲霉毒素，从而得到纯度高、色泽浅、无黄曲霉毒素的花生衣高级脂肪酸。优选的，步骤(2)中，所述热水的温度为50～70℃，优选进行两次以上的热水提取，总的热水用量为花生衣原料重量的10～20倍。更为优选地，进行两次热水提取，两次热水的用量依次为花生衣原料重量的8～10倍、5～8倍(L/kg)，两次热水提取的时间依次为2～3小时、1～2小时。热水提取的目的，是将花生衣原料中不溶于亲脂性有机溶剂、但易溶于水的原花青素和儿茶素充分浸出。优选的，步骤(2)中，所述超滤膜的孔径为10～50nm，过滤的压力为0.1～0.3Mpa。使用超滤膜过滤的目的，是除去热水提取液中的蛋白质和鞣质等大分子杂质，有利于后续原花青素和儿茶素的分离；所述纳滤膜的截留分子量为500～1000Da，过滤的压力为0.3～0.5Mpa。使本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从花生衣中分离多种活性成分的方法，包括以下步骤：/n(1)高级脂肪酸的提取与分离：将花生衣破碎，加入亲脂性有机溶剂，加热回流提取2次以上，过滤，得到提取渣1待用；合并提取液为提取液1，将提取液1通过硅胶层析柱，收集硅胶层析柱流出液，浓缩得到淡黄色油状物，即花生衣高级脂肪酸；/n(2)超滤、纳滤：将步骤(1)提取渣1用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，再加入热水提取，过滤得到提取渣2待用，合并热水提取液得提取液2，冷却至室温，先用超滤膜过滤，收集超滤膜透过液；超滤膜透过液再用纳滤膜过滤，分别收集纳滤膜截留液和纳滤膜透过液待用；/n(3)原花青素的分离：取步骤(2)纳滤膜截留液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣原花青素；/n(4)儿茶素的分离：取步骤(2)纳滤膜透过液，用聚酰胺树脂柱吸附，乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣儿茶素；/n(5)白藜芦醇的提取与分离：往步骤(2)提取渣2中加入低碳醇，加热提取，过滤，得低碳醇提取液，将低碳醇提取液通过层析氧化铝树脂柱，收集层析氧化铝树脂柱流出液，减压浓缩，浓缩液降温冷冻，搅拌析晶，将晶体过滤，真空干燥，得花生衣白藜芦醇。/n...

【技术特征摘要】
1.一种从花生衣中分离多种活性成分的方法，包括以下步骤：
(1)高级脂肪酸的提取与分离：将花生衣破碎，加入亲脂性有机溶剂，加热回流提取2次以上，过滤，得到提取渣1待用；合并提取液为提取液1，将提取液1通过硅胶层析柱，收集硅胶层析柱流出液，浓缩得到淡黄色油状物，即花生衣高级脂肪酸；
(2)超滤、纳滤：将步骤(1)提取渣1用水蒸汽将其中残留的有机溶剂蒸馏干净，再加入热水提取，过滤得到提取渣2待用，合并热水提取液得提取液2，冷却至室温，先用超滤膜过滤，收集超滤膜透过液；超滤膜透过液再用纳滤膜过滤，分别收集纳滤膜截留液和纳滤膜透过液待用；
(3)原花青素的分离：取步骤(2)纳滤膜截留液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣原花青素；
(4)儿茶素的分离：取步骤(2)纳滤膜透过液，用聚酰胺树脂柱吸附，乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，微波干燥，得花生衣儿茶素；
(5)白藜芦醇的提取与分离：往步骤(2)提取渣2中加入低碳醇，加热提取，过滤，得低碳醇提取液，将低碳醇提取液通过层析氧化铝树脂柱，收集层析氧化铝树脂柱流出液，减压浓缩，浓缩液降温冷冻，搅拌析晶，将晶体过滤，真空干燥，得花生衣白藜芦醇。


2.如权利要求1所述的优选的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述亲脂性有机溶剂是指乙酸乙酯，乙醚、石油醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油中的一种或几种。


3.如权利要求1所述的优选的方法，其特征在于，步骤(1)中分为两次提取，所用亲脂性有机溶剂的用量依次为花生衣原料重量的8～10倍、5～8倍(L/kg)，回流提取的时间依次为2～3小时、1～2小时。


4.如权利要求1所述的优选的方法，其特征在于，步骤(1)中采用2次亲脂性有机溶剂进行提取；第一次提取时，有机溶剂为石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂；第二次提取时，有机溶剂为6#溶剂油和/或120#溶剂油。


5.如权利要求4所述的优选的方法，其特征在于，第一次提取时...

【专利技术属性】
技术研发人员：李伟，黄华学，
申请(专利权)人：湖南华诚生物资源股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43