一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法技术

本发明专利技术公开了一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，具体为准确称取葡萄皮渣粉末，按料液比为1∶8‑16加入DES溶剂，所述DES溶剂为氯化胆碱：乳酸＝1∶2，两者比例为体积比，于20‑60℃下磁力搅拌30‑50min；然后采用D101大孔吸附树脂湿法上柱，提取液加样量为1∶12.5，首先用纯化水洗脱5倍柱体积，然后加入45％乙醇缓慢洗脱至柱体无颜色，将洗脱液分段收集，采用减压浓缩法回收其中的乙醇，浓缩后的洗脱液冷冻干燥24h以上，得到葡萄皮渣提取物。该方法对环境友好，操作简单易行，提取方式容易实现，并且原花青素提取率高。

A method of extracting Proanthocyanidins from grape skin residue

【技术实现步骤摘要】
一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法
本专利技术属于葡萄皮渣提取
，具体涉及一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法。
技术介绍
葡萄是世界上经济价值较高的一种水果，为葡萄科(Vitaceae)葡萄属(Vitis)植物。葡萄果实中含有大量的酚类物质，其中30-40％存在于葡萄皮中，60-70％存在于葡萄籽中。其中葡萄皮中存在色素类物质，相对于化学合成的色素来讲，对人体无害，其中原花青素，简称OPC，是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，属于生物类黄酮。经过大量研究证实，原花青素对于改善血液循环、滋润皮肤、降低胆固醇等方面都有非常突出的作用。有研究报道表明葡萄皮中富含有原花青素，而葡萄本身作为一种日常的水果，从其中提取得到的花青素属于食药同源的产品，是理想的保健品原材料。随着人们对于饮食健康保健的广泛重视和追求，对于原花青素需求快速增长。亟需一种简单易行的能够从葡萄中大量提取原花青素的方法。葡萄籽中的原花青素物质通常以结合态与蛋白质、纤维素结合在一起，一般不易提出，提取原花青素常用的方法有水提取法、有机溶剂-水提取法和仪器辅助提取法，水提取法浸提耗时长，温度高，容易造成原花青素的损失，同时水的极性较大，溶出杂质也较多。有机溶剂-水提取法中大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。仪器辅助提取法由于设备昂贵，推广使用比较困难。因此急需一种新的方法来提取葡萄皮渣中的原花青素。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新的从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，用以解决现有技术中存在的问题。>为实现上述目的，本专利技术采取如下技术方案：一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，所述制备方法包括如下步骤：(1)提取：准确称取葡萄皮渣粉末，准确称取葡萄皮渣粉末，按照葡萄皮渣粉末与DES溶剂的料液比(g/m1)为1∶8-16的比例加入DES溶剂，所述DES溶剂为氯化胆碱∶乳酸＝1∶2，两者比例为摩尔比，于20-60℃下磁力搅拌20-60min；(2)分离：将提取液上D101大孔吸附树脂柱，提取液与D101大孔吸附树脂柱的体积比为1∶12.5，首先用纯化水洗脱，纯化水的用量为柱体积的5倍，然后加入45％乙醇缓慢洗脱至柱体无颜色，将洗脱液根据柱子上洗脱液颜色深浅分段收集，采用减压浓缩法回收其中的乙醇，浓缩后的洗脱液冷冻干燥24h以上，得到葡萄皮渣提取物。优选地，所述DES溶剂的含水量10-30％。更加优选地，所述DES溶剂的含水量16.02％。优选地，所述葡萄皮渣粉末与DES的料液比为1∶10.63。优选地，采用在50℃磁力搅拌40min效果最佳。优选地，所述减压浓缩法的压力范围为-0.07～-0.1MPa。其中，所述葡萄皮渣粉末是由取自葡萄酒厂的葡萄皮籽渣晾晒干燥后，使用中草药粉碎机进行粉碎，过40目筛收集而得。本专利技术具有如下优点：本专利技术采用DES(氯化胆碱∶乳酸＝1∶2，n/n)为提取溶剂，该溶剂萃取能力强，对环境友好，组成相对简单，操作简单易行，提取方式容易实现，并且原花青素提取率高。并且本专利技术对提取的各种条件进行了优化，原花青素提取率高。本专利技术从天然植物葡萄皮渣中提取原花青素，其中葡萄皮渣日常也可食用，根据提取物的抗氧化活性，将其用于制备天然色素类产品。相对于化学合成类色素，更加安全。附图说明图1是不同DES提取葡萄皮渣原花青素对比；图2是不同料液比提取葡萄皮渣原花青素的对比；图3是不同提取方式提取葡萄皮渣原花青素对比；图4是不同提取时间条件下葡萄皮渣原花青素含量对比；图5是不同提取温度提取葡萄皮渣原花青素对比；图6是不同含水量的DES提取葡萄皮渣原花青素对比；图7是不同提取次数提取葡萄皮渣原花青素对比；图8是避光与否提取葡萄皮渣原花青素对比；图9是两种因素交互作用对葡萄皮渣原花青素含量影响的等高线；图10是两种因素交互作用对葡萄皮渣原花青素含量影响的响应面图；图11是加样量对吸附效果的影响；图12是解吸液浓度对解吸效果的影响；图13是各个流分原花青素含量对比；图14是葡萄皮渣提取物的DPPH自由基清除活性对比。具体实施方式下面将通过具体实施例对本专利技术进行详细的描述。提供这些实施例是为了能够更透彻地理解本专利技术，并且能够将本专利技术的范围完整的传达给本领域的技术人员。如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”或“包括”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。说明书后续描述为实施本专利技术的较佳实施方式，然所述描述乃以说明书的一般原则为目的，并非用以限定本专利技术的范围。本专利技术的保护范围当视所附权利要求所界定者为准。本专利技术以葡萄皮渣为基础，提取其中的色素类物质，通过对其提取物中的主要成分原花青素为目标，来得到最佳的提取原花青素的工艺，具体地，专利技术人进行了如下试验，具体试验过程如下：一、DES的筛选专利技术人查阅文献，从众多可能形成低共熔溶剂的组分，将其组成中的HBA与HBD按特定摩尔比计算称量至50mL具塞锥形瓶中，置于水浴锅中，缓慢升温加热至融化。加热至80℃为止，确定可以形成的低共熔溶剂的组分，所选择的低共熔溶剂和性状如表1所示。表1低共熔溶剂的制备及性状表述根据表中描述，DES(氯化胆碱∶甘油和氯化胆碱∶丙二酸)形成的低共熔溶剂黏度过大，不利于葡萄皮渣的提取，可选择基于LA(乙酰丙酸)的5种DES(编号21，22，23，24，25)和基于ChCL(氯化胆碱)的3种DES(编，4，11，20)为提取溶剂。其中，TEAC为四乙基氯化铵，TEAB为四乙基溴化铵，TBAC为四丁基氯化铵，TBAB为四丁基溴化铵，CHCL为氯化胆碱。然后对DES进行优化，具体如下：准确称取处理后的葡萄皮渣粉末1g，按料液比1∶15加入不同的DES，55℃提取2h，提取液离心(3500RPM，5min)收集上清液，将上清液稀释10倍，取稀释液0.5mL，加入2％的硫酸铁铵溶液(2mol/L的盐酸溶液配制)0.2mL，正丁醇-盐酸(95∶5，v/v)溶液6mL，摇匀，60℃水浴40min，取出后立即置于冷水浴冷却15min，在550nm处测定吸光度，计算原花青素含量。计算结果见图1。从图1可以看出，DES(氯化胆碱∶甘油和氯化胆碱∶丙二酸)黏度过大，不利于溶剂的渗透和活性成分的扩散，根据不同提取液中原花青素的含量测定结果(如图1)可知基于乙酰丙酸的DES(乙酰丙酸∶TBAB＝3∶1，v/v)和基于氯化胆碱的DES(氯化胆碱∶乳酸＝1∶2,v/v)提取原花青素含量相当，从经济和安全方面考虑，本实验最终选择基于氯化胆碱的DES(氯化胆碱∶乳酸＝1∶2,v/v)为原花青素的提取溶剂。二、料液比的选择准确称取葡萄皮渣粉末0.5g，按料液比1∶8、1∶10、1∶12、1∶14、1∶16加入DES(氯化胆碱∶乳酸＝1∶2)，37℃水浴磁力搅拌提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/n(1)提取：准确称取葡萄皮渣粉末，按照葡萄皮渣粉末与DES溶剂的料液比为1∶8-16的比例加入DES溶剂，所述料液比单位为g/ml，所述DES溶剂为氯化胆碱∶乳酸＝1∶2，两者比例为摩尔比，于20-60℃下磁力搅拌20-60min；/n(2)分离：将提取液上D101大孔吸附树脂柱，提取液与D101大孔吸附树脂柱的体积比为1∶12.5，首先用纯化水洗脱，纯化水的用量为柱体积的5倍，然后加入45％乙醇缓慢洗脱至柱体无颜色，将洗脱液分段收集，采用减压浓缩法回收其中的乙醇，浓缩后的洗脱液冷冻干燥24h以上，得到葡萄皮渣提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)提取：准确称取葡萄皮渣粉末，按照葡萄皮渣粉末与DES溶剂的料液比为1∶8-16的比例加入DES溶剂，所述料液比单位为g/ml，所述DES溶剂为氯化胆碱∶乳酸＝1∶2，两者比例为摩尔比，于20-60℃下磁力搅拌20-60min；
(2)分离：将提取液上D101大孔吸附树脂柱，提取液与D101大孔吸附树脂柱的体积比为1∶12.5，首先用纯化水洗脱，纯化水的用量为柱体积的5倍，然后加入45％乙醇缓慢洗脱至柱体无颜色，将洗脱液分段收集，采用减压浓缩法回收其中的乙醇，浓缩后的洗脱液冷冻干燥24h以上，得到葡萄皮渣提取物。


2.根据权利要求1所述的从葡萄皮渣中提取原花青素的方法，其特征在于，所述DES溶剂的含水...

【专利技术属性】
技术研发人员：白长财，任凤英，崔承乾，韩璐，王文苹，魏世杰，陆强，王怡，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：宁夏;64