一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组、试剂盒及检测方法技术

技术编号:24989348 阅读:35 留言:0更新日期:2020-07-24 17:52
本发明专利技术公开了一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组、试剂盒以及检测方法,引物组包括用于检测肠杆菌碳青霉烯酶耐药基因KPC、NDM、OXA48、VIM和IMP的扩增引物对和分子信标探针,核苷酸序列SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:15所示。本发明专利技术公开的试剂盒只需要一次加样、一个反应管和一个反应体系在2小时内完成五个肠杆菌常见的碳青霉烯酶耐药基因检测,具有快速、高效和准确等优点,大大缩短了检测时间,节约了检测成本,提高了检测效率;并且相比现有的探针法多重PCR,减少了引物设计以及引物间的干扰,可减少假阳性/假阴性的出现。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及核酸检测
,特别是涉及一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组、试剂盒及检测方法。
技术介绍
细菌耐药性已成为全球性关注的问题,耐药细菌所致感染己成为临床抗感染治疗的新挑战,是当前人类健康和生命的主要威胁。肠杆菌科细菌分布广,与人类关系密切,并且肠杆菌是重要的医院感染菌,碳青霉烯类抗生素是治疗肠杆菌感染的主要抗生素,但近年来,随着碳青霉烯类抗菌药的大量使用,临床出现碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CarbapenemresistantEnterobacteriaceae,CRE)。目前,在临床上常见的碳青霉烯酶耐药基因主要有KPC、NDM、OXA48、VIM和IMP。虽然市场上已有碳青霉烯酶耐药基因检测的相关试剂盒,但大多是单一检测KPC、NDM、OXA48、VIM和IMP等耐药基因中的一种。对CRE细菌尽早鉴定和及时报告药敏对指导临床使用合理抗生素至关重要,可有效降低发病率和死亡率。培养鉴定是诊断病原学感染的传统手段,对临床的早期诊治具有重要意义。目前国内实验室普遍采用的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组,其特征在于,包括用于检测肠杆菌碳青霉烯酶耐药基因KPC、NDM、OXA48、VIM和IMP的扩增引物对和分子信标探针;/n其中,KPC基因的引物组为:/nKPC-F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;/nKPC-R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;/n分子信标探针KPC-probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;/nNDM基因的引物组为:/nNDM-F的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;/nNDM-R的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;/n分子信标探针NDM-probe的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示;/nOX...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测碳青霉烯酶基因的引物组,其特征在于,包括用于检测肠杆菌碳青霉烯酶耐药基因KPC、NDM、OXA48、VIM和IMP的扩增引物对和分子信标探针;
其中,KPC基因的引物组为:
KPC-F的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示;
KPC-R的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示;
分子信标探针KPC-probe的核苷酸序列如SEQIDNO:3所示;
NDM基因的引物组为:
NDM-F的核苷酸序列如SEQIDNO:4所示;
NDM-R的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示;
分子信标探针NDM-probe的核苷酸序列如SEQIDNO:6所示;
OXA48基因的引物组为:
OXA48-F的核苷酸序列如SEQIDNO:7所示;
OXA48-R的核苷酸序列如SEQIDNO:8所示;
分子信标探针OXA48-probe的核苷酸序列如SEQIDNO:9所示;
VIM基因的引物组为:
VIM-F的核苷酸序列如SEQIDNO:10所示;
VIM-R的核苷酸序列如SEQIDNO:11所示;
分子信标探针VIM-probe的核苷酸序列如SEQIDNO:12所示;
IMP基因的引物组为:
IMP-F的核苷酸序列如SEQIDNO:13所示;
IMP-R的核苷酸序列如SEQIDNO:14所示;
分子信标探针IMP-probe的核苷酸序列如SEQIDNO:15所示。


2.一种快速检测碳青霉烯酶基因的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的快速检测碳青霉烯酶基因的引物组。


3.如权利要求2所述的快速检测碳青霉烯酶...

【专利技术属性】
技术研发人员:杜鸿张海方张碧颖朱志宸闻奕丞
申请(专利权)人:核工业总医院
类型:发明
国别省市:江苏;32

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