一种康复新液的PCR鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种康复新液的PCR鉴定方法，使用该方法进行聚合酶链式反应(PCR)扩增出美洲大蠊COI基因序列(140bp)，PCR产物经过琼脂糖胶进行验证后送至测序公司进行测序，将测序结果通过手工校对、序列拼接，并与公开序列进行比对，如果与所述基因序列SEQ ID NO.1的一致性在99％以上，即可判断所述的样品为美洲大蠊来源。本发明专利技术采用了可靠的PCR鉴定技术，快速、准确地实现了对康复新液的快速鉴定，增强了准确性和可靠性，确保了康复新液以美洲大蠊作为药材入药的安全性。

【技术实现步骤摘要】
一种康复新液的PCR鉴定方法
本专利技术涉及中药及中药材、中药提取物鉴定
，特别是一种能够对美洲大蠊药材、美洲大蠊提取物(水提物和醇提物)及极限条件处理的样品及康复新液药品进行快速地鉴定。
技术介绍
美洲大蠊(PeriplanetaAmericanaL)系蜚蠊科大蠊属昆虫，其入药始载于《神农本草经》，列为中品；据历代本草记载，其主治：“瘀血癥坚寒热，破积聚，喉咽闭，内寒无子”、“通利血脉”、“食之下气”。其“【性味与归经】咸、平；归肝、肾、脾经。【功能与主治】活血化瘀，清热解毒，消积，生肌。用于癥瘕积聚，小儿疳积，咽喉肿痛，虫蛇咬伤，疮痈肿痛及痔疮出血，口腔溃疡，胃、十二指肠溃疡。外用：消肿生肌，用于外伤、溃疡，烧伤、烫伤、褥疮之创面”。康复新液系中药材美洲大蠊干燥虫体乙醇提取物，具有通利血脉，养阴生肌功效。内服用于瘀血阻滞，胃痛出血，胃、十二指肠溃疡；以及阴虚肺痨，肺结核的辅助治疗。外用用于金疮、外伤、溃疡、瘘管、烧伤、烫伤、褥疮之刨面。目前，根据国家药品监督管理局康复新液的质量标准(WS3-B-3674-2000(Z)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种康复新液的PCR鉴定方法，其特征在于采用PCR技术从康复新液中扩增出美洲大蠊COI基因序列，其步骤主要包括：/n(1)从待测康复新液样品中分离提取DNA；/n(2)以该DNA为模板设计一对引物，通过聚合酶链式反应扩增出美洲大蠊COI基因；其中所述引物DNA的序列为：/n正向引物JWF1：5′-ATTCTGATTATTACCACCTTCA-3’/n反向引物JWR1：5′-AAATTGCTAGATCAACAGATGC-3’/n(3)PCR扩增反应；/n(4)取适量步骤(3)的聚合酶链式反应扩增出的PCR产物用2％的琼脂糖电泳分离扩增产物的大小，送生物公司测序；/n(5)根据测序结果，进行序...

【技术特征摘要】
20190114 CN 201910031161X1.一种康复新液的PCR鉴定方法，其特征在于采用PCR技术从康复新液中扩增出美洲大蠊COI基因序列，其步骤主要包括：
(1)从待测康复新液样品中分离提取DNA；
(2)以该DNA为模板设计一对引物，通过聚合酶链式反应扩增出美洲大蠊COI基因；其中所述引物DNA的序列为：
正向引物JWF1：5′-ATTCTGATTATTACCACCTTCA-3’
反向引物JWR1：5′-AAATTGCTAGATCAACAGATGC-3’
(3)PCR扩增反应；
(4)取适量步骤(3)的聚合酶链式反应扩增出的PCR产物用2％的琼脂糖电泳分离扩增产物的大小，送生物公司测序；
(5)根据测序结果，进行序列分析比对，如果与所述美洲大蠊的检测基因序列SEQIDNO.1的一致性在99％以上，即可判断所述样品含有美洲大蠊来源。
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【专利技术属性】
技术研发人员：耿越飞，姜顺日，耿福能，王杉杉，刘彬，吴桃清，唐艳萍，
申请(专利权)人：四川好医生攀西药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51