一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用，所述抗原表位肽为：(1)位于SEQIDNO.1中；或者，(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的2‑70％。所述抗原表位肽的应用可包括制备疫苗或抗体或抗体药等进行应用。本申请中的抗原表位肽具有免疫原性，其可诱导产生免疫应答反应。该抗原表位肽或含有该抗原表位肽的基因分子、融合蛋白、载体或宿主细胞等可用来制备生物药物、疫苗等，具有重要应用意义。

【技术实现步骤摘要】
一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用。
技术介绍
IL33是2005年发现的一个属于IL1家族的新成员。人源IL33基因定位在染色体9p24.1上，编码270个氨基酸。全长的IL33分子量大小约为30KDa，经剪切后成为大小约为18KDa的成熟蛋白。在人多种组织的平滑肌细胞，以及气管和支气管上皮细胞中，IL33是组成型表达的。而在肺组织纤维细胞及真皮的角质细胞中，IL33可被TNF-α的刺激下诱导表达。IL33具有双重生物学功能，在正常生理情况下，IL33以全长的形式定位在细胞核中发挥转录因子的作用，调控其他基因的表达。一旦细胞受到刺激或损伤，IL33就会从细胞核中转移到胞质中，进而被剪切为成熟的蛋白，发挥细胞因子的作用。成熟的IL33与其受体ST2分子结合，激活NF-kB通路，刺激IL5、IL13等促炎因子的产生。成熟的IL33像一个“警报素”一样，在机体受体损伤时释放出来，招募并激活多种免疫细胞如嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、Th2细胞等释放细胞因子引起炎症反应。IL33/ST2信号通路与人类多种疾病相关，如哮喘、类风湿性关节炎、败血症、心脏疾病、动脉粥样硬化、恶性肿瘤等。因此，研究出与IL33相关的抗原表位对于研发抗体药物或疫苗等具有具有重大意义，其可能直接决定着研发出新的甚至是效果非常好的治疗哮喘、类风湿性关节炎、败血症、心脏疾病、动脉粥样硬化、恶性肿瘤等方面的药物，因此，研发一种新的抗原表位对于医药领域非常重要，因此我们开展了本项研究工作。
技术实现思路
有鉴于此，专利技术的目的是提供一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用，解决了现有技术中存在的不足。专利技术的目的是通过以下技术方案来实现：本专利技术的一个目的为提供一种新型的抗原表位肽，所述抗原表位肽为：(1)位于SEQIDNO.1中；或者，(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的2-70％。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第65位～160位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第80位～117位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第100位～115位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽为位于SEQIDNO.1中第108位～112位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。进一步地，所述抗原表位肽为与SEQIDNO.1中第108位～112位的连续氨基酸具有80％以上重叠度的氨基酸序列。进一步地，所述SEQIDNO.1为位于IL33中的序列。本专利技术的另一个目的为提供一种融合蛋白，所述融合蛋白是由以上任一项所述的抗原表位肽与载体蛋白融合所形成的。本专利技术的又一个目的为提供一种能够编码所述抗原表位肽的基因分子，所述基因分子为能够编码以上任意一项所述的抗原表位肽的基因序列或基因片段。本专利技术的又一个目的为提供一种表达载体，所述表达载体含有以上所述的基因分子。本专利技术的又一个目的为提供一种宿主细胞，所述的宿主细胞含有以上所述的表达载体，或者在基因组中整合有以上所述的核酸分子。本专利技术的一个目的为提供一种抗体，所述抗体为能够结合以上任一项所述的抗原表位肽的抗体。本专利技术的再一个目的为提供一种分离的抗原抗体复合物，所述复合物的抗原中包含以上任意一项所述的抗原表位肽或以上所述的融合蛋白，所述抗原表位肽形成抗原表位，所述抗体特异性地结合于所述抗原表位。本专利技术的最后一个目的为提供一种疫苗，所述疫苗含有以上任一项所述的抗原表位肽、以上所述的融合蛋白、以上所述的核酸分子、以上所述的表达载体或者以上所述的宿主细胞。专利技术提供了一种与IL33相关疾病的新型的抗原表位肽及其应用，其至少具有以下有益效果：该抗原表位肽具有免疫原性，其可诱导产生免疫应答反应。该抗原表位肽或含有该抗原表位肽的基因分子、融合蛋白、载体或宿主细胞等可用来制备生物药物、疫苗等，具有重要应用意义。该抗原表位肽与本申请中的抗体具有特别强的结合效果，亲和力非常好，该抗体的浓度可低至pmol级别，其亲和力可与赫赛汀相媲美，非常惊喜，而且结合力稳定。这对于抗原或抗体发挥药物作用具有极其重要的作用。由于本申请中抗原抗体之间的相互作用效果好，使其具有极大的制备成药药的潜在药用价值，并可包含抗体的药物可治疗、预防或减轻与IL-33相关疾病，如哮喘、类风湿性关节炎、败血症、心脏疾病、动脉粥样硬化、恶性肿瘤的药物等等。此外，本申请中的抗体其中和活性也非常好，其能够中和IL33协同LPS刺激巨噬细胞(PM)诱导产生IL6和TNF-α的生物活性，抑制效果明显。还能够中和IL6在肥大细胞和骨髓细胞中的表达，并可中和OVA诱发的哮喘，其能够降低支气管肺泡灌洗液中细胞总数及蛋白含量，效果显著，等等。附图说明图1为SEQIDNO.1序列示意图；图2为SEQIDNO.1序列中不同片段的载体构建示意图；图3为三个片段经IPTG诱导表达电泳示意图；图4为三个片段与抗体结合情况示意图；图5为片段1-9与抗体结合情况示意图；图6为四个氨基酸片段与抗体结合情况示意图。图7为抗体中和IL33协同LPS诱导巨噬细胞产生IL6的示意图；图8为抗体中和IL33协同LPS诱导巨噬细胞产生TNF-α的示意图；图9为所诱导的肥大细胞的纯度示意图；图10为在检测IL6的量时所绘制的ELISA标准曲线图；图11为用所诱导的肥大细胞测试IL33抗体的阻断活性的示意图；图12为用所诱导的肥大细胞测试IL33抗体的阻断活性的另一个示意图；图13为IL33抗体可中和IL6在骨髓细胞中的表达；图14为反映了IL33抗体治疗OVA诱导的哮喘模型的有效性；图15为抗体中和OVA诱发的哮喘的示意图；图16为抗原抗体结合情况示意图；图17为McAb-IL33的不同稀释浓度的结合状况示意图；图18为CA-IL33的不同稀释浓度的结合状况示意图；图19为所拟合的正态分布标准曲线；图20为本申请中抗体的Tm值的检测示意图。具体实施方式下面对专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。以下提供的专利技术的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的专利技术的范围，而是仅仅表示专利技术的选定实施例。基于专利技术中的实施例，本领域普通方法人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于专利技术保护的范围。实施例1一种新型的抗原表位肽，所述抗原表位肽为：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为：/n(1)位于SEQIDNO.1中；或者，(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；/n且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的2-70％。/n

【技术特征摘要】
1.一种新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为：
(1)位于SEQIDNO.1中；或者，(2)位于与(1)中SEQIDNO.1序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；
且上述SEQIDNO.1中包含一个或多个抗原表位，并且所述抗原表位肽的氨基酸序列长度为SEQIDNO.1全长的2-70％。


2.根据权利要求1所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第65位～160位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


3.根据权利要求2所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第80位～117位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


4.根据权利要求3所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽位于SEQIDNO.1中第100位～115位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


5.根据权利要求4所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为位于SEQIDNO.1中第108位～112位氨基酸序列中的连续氨基酸序列。


6.根据权利要求5所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为SEQIDNO.1中第108位～112位的连续氨基酸序列。


7.根据权利要求6所述的新型的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽为与SEQIDNO.1中第108位～112位的连续氨基酸具有80％以上重叠度的氨基酸序列。

【专利技术属性】
技术研发人员：钱峰，王军，
申请(专利权)人：南京赛新生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32