δ样配体1用于诊断严重感染制造技术

本发明专利技术涉及一种用于体外诊断严重感染的方法，该方法包括确定生物样品中的δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列，其中δ样配体1蛋白的表达水平升高或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列的水平升高则表明严重感染；本发明专利技术还涉及δ样配体1蛋白作为用于体外诊断严重感染(如脓毒症)的生物标志物的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】δ样配体1用于诊断严重感染
本专利技术涉及δ样配体1作为生物标志物在严重感染的诊断中的应用，并且涉及通过控制生物样品中δ样配体1的水平在体外快速诊断严重感染(如脓毒症)的方法。
技术介绍
生物标志物是生物体的可测量特征，其反映特定的生理状态。在医学中，生物标志物通常是从生物组织中分离出来的化合物，可以用作特定疾病状态的存在或严重程度的指标，或监测所用干预措施的有效性。生物标志物在疾病的诊断和可能的预后中、以及在监测疾病的进展或对治疗的反应中特别有用。理想的生物标志物应易于获得和测量，并且在对疾病具有高的灵敏度和特异性方面应该是可靠的。严重的感染(尤其是脓毒症)是应特别避免的医学病症，但对其没有高度可靠的生物标志物。严重感染(包括脓毒症)的特点是由失调的针对感染的免疫反应而诱发的威胁生命的器官衰竭，并且/或者会引起由失调的针对感染的免疫反应而诱发的威胁生命的器官衰竭。在脓毒症中，由微生物病原体引发的宿主反应在病理综合征中达到高峰，该综合征的特征是炎症过度和随后的免疫抑制。尽管重症监护医学和抗微生物治疗取得了稳步改进，但这种感染仍然是全世界所有年龄段重症监护病房死亡的主要原因。为了改善结局并且同时避免不必要的抗生素治疗，用于诊断严重感染的快速、可靠的检测是必不可少的。脓毒症是一种严重的威胁生命的感染。到目前为止，血液培养仍是诊断脓毒症的金标准，但是血液培养需要时间，而且许多具有脓毒症征兆和症状的患者的血液培养为阴性。因此，迫切需要一种用于诊断严重感染、特别是用于诊断脓毒症的补充方法。>文献“C.PierrakosandJ.-L.Vincent(2010)CriticalCare,14:R15”描述了本领域已知的生物标志物可用于鉴定或排除脓毒症。这些生物标志物包括针对细胞因子/趋化因子、细胞、受体、凝聚物、血管内皮损伤、血管舒张、器官功能障碍和急性期蛋白的各种生物标志物。该文献没有提及Notch配体，特别是δ样配体1。文献“VanEngelen等人，(2018)“BiomarkersinSepsis”,CriticalCareClinics,34(1):129-152”描述了用于诊断脓毒症的各种生物标志物，并且特别指出系统生物学的生物组学领域(即基因组学、表观遗传学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学)是具有前景的用于发现新型生物标志物的工具。WO2016/145426A1描述了一种使用CEACAM1、ZDHHC19、C9orf95、GNA15、BATF、C3AR1、KIAA1370、TGFBI、MTCH1、RPGRIP1和HLA-DPB1的表达水平作为生物标志物来诊断脓毒症的方法。US2005/059093A1描述了一种用于检测Notch信号通路的调节剂的方法，其包括以下步骤：在存在和不存在候选调节剂的情况下，监测免疫系统的细胞中的Notch信号通路，以及确定候选调节剂是否调节Notch信号通路。WO2017/004159A1描述了与可溶性生物分子结合并抑制该可溶性生物分子的生物学活性以抑制靶标或病原体与其他分子或细胞相互作用的组合物。其中提到Notch配体(包括δ样配体1(DLL1))对治疗或预防动脉粥样硬化、钙化主动脉瓣狭窄、心力衰竭、中风和癌症特别有用。为了治疗或预防与由病原体引起的感染相关的脓毒症，WO2017/004159A1提出选择性结合TNFα、白介素1、白介素6、白介素8、白介素12、干扰素γ、巨噬细胞游走抑制因子、GM-CSF和/或凝血因子。US2006/140943A1描述了Notch信号通路调节剂在制备药物中的用途，该药物用于治疗移植物抗宿主病(GVHD)以及由移植物(例如器官、组织和/或细胞的移植物(例如骨髓移植物))引起或与之相关的疾病和病症，其中所述调节剂用于降低免疫系统细胞的反应性。WO2012/092539A2描述了针对DLL4的抗体和用于治疗与DLL4相关的疾病的方法，所述疾病例如为细胞增生性疾病或与血管生成有关的病理学病症。WO2012/092539A2描述了血管生成失调可导致赘生性和非赘生性疾病，并将脓毒症指定为许多此类非赘生性疾病之一。US9,731,024B2和US2017/0240590A1描述了将水溶性聚合物与治疗性蛋白质的经氧化的碳水化合物部分缀合的材料和方法。许多蛋白质被列为治疗性蛋白质，其中之一是δ样蛋白1。目前，一些生物标志物被用来诊断严重感染，例如脓毒症。急性期蛋白前降钙素(PCT)和C反应蛋白(CRP)以及白细胞计数已被最广泛地使用。但是，PCT和CRP的有效性受到其对于脓毒症缺乏特异性和灵敏度的限制。特别地，仍然难以将脓毒症与其他非感染性原因的炎症进行区分。因此，需要新的具有更高可靠性的脓毒症生物标志物。
技术实现思路
本专利技术所基于的问题是提供一种可用于以高可靠性水平诊断严重感染的生物标志物。该问题通过使用δ样配体1蛋白(DLL1)或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列作为用于体外(离体)诊断严重感染的生物标志物来解决。因此，患者的生物样品中δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列的水平升高则表明存在严重感染。此外，本专利技术涉及一种用于体外诊断严重感染的方法，该方法包括确定生物样品中的δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列，其中δ样配体1蛋白的表达水平升高或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列的水平升高则表示感染。令人惊讶的是，发现δ样配体1作为严重感染(特别是脓毒症)的生物标志物具有高可靠性水平。本专利技术的所述诊断性生物标志物的优点是更早的感染诊断、及时的治疗和改善的疾病结果。还会减少与检测其他生物标志物相关的不必要成本，而这些其他生物标志物显示出比δ样配体1更低的灵敏度和选择性。具体实施方式δ样蛋白是单次跨膜蛋白，其在Notch信号通路中的作用是已知的，其是首次在果蝇中描述的Notchδ配体的同系物。DLL-1的别名是δ样配体1、δ样蛋白、H-δ,1、果蝇δ同系物1、δ样经典Notch配体1、DL1、Notch配体δ样1。在哺乳动物中存在三种δ样基因，其编码δ样配体1(DLL1编码DLL1)、δ样配体3(DLL3编码DLL3)和δ样配体4(DLL4编码DLL4)，所有配体均包含一个被称为DSL(δ，锯齿状，Lag2)结构域的保守的富含半胱氨酸的区域、几个表皮生长因子(EGF)样重复和一个跨膜结构域。δ样配体1蛋白的氨基酸序列和编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列是已知的。例如，DLL1的氨基酸序列在文献“AmericanJournalofPathology,Vol.154,No.3,March1999,785-794”或在国家生物技术信息中心(NationalCenterforBiotechnologyInformation)的数据库中(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/NP_005609.3)有所描述。人类直系同源物(orthologue)的染色体定位是6q27。本专利技术中使用的δ样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列作为用于体外诊断严重感染的生物标志物的应用。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171025 EP 17198330.71.δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列作为用于体外诊断严重感染的生物标志物的应用。


2.根据权利要求1所述的应用，其中所述δ样配体1蛋白由核苷酸序列SEQIDNO:1编码。


3.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述δ样配体1蛋白是与氨基酸序列SEQIDNO:2和SEQIDNO:3具有至少90％同一性的蛋白。


4.根据权利要求1至3所述的应用，其中所述δ样配体1蛋白是δ样配体1蛋白的切割产物，特别地，其中所述切割产物是具有氨基酸序列SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6和/或SEQIDNO:7的蛋白。


5.根据前述权利要求中任一项所述的应用，其中δ样配体1蛋白或编码δ样配体1蛋白的核苷酸序列的表达水平升高则指示感染的诊断。


6.根据前述权利要求中任一项所述的应用，其中所述严重感染是脓毒症。


7.根据前述权利要求中任一项所述的应用，其中所述表达水平是在生物样品中确定的。


8.根据权利要求7所述的应用，其中所述生物样品选自由全血、血沉棕黄层、血浆、血清、外周血单个核细胞(PBMCS)、中性粒细胞、单核细胞、T细胞、尿、脊髓液、淋巴液、皮肤外部分泌物、眼泪和/或唾液组成的组中。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：达格玛·希尔德勃兰特，克劳斯·黑格，弗洛里安·乌勒，马库斯·韦根，
申请(专利权)人：海德堡大学，
类型：发明
国别省市：德国;DE