基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法技术

本发明专利技术提供一种基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，包括选取与雄激素活性相关的“活性警示结构”；将“活性警示结构”进行分类，建立“活性警示结构”与质谱特征碎片结构相关关系；提取可表征活性的特征碎片，并通过标准品和质谱谱图数据库进行验证；构建基于特征碎片的雄激素活性物质筛选方法并应用。本发明专利技术方法相比传统方法通量更高，覆盖的化合物范围更广，类别更多，建立了毒性特征和质谱碎片之间的直接联系，能进行大量未知化合物的高通量筛选，无需确定化合物完整结构，依据二级碎片的匹配就可快速筛选出可能的雄激素活性物质，大大提高了非目标的筛查效率，进而为环境中关键毒性物质识别提供新的技术方案。

【技术实现步骤摘要】
基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法
：本专利技术属于环境检测
，具体涉及一种基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法。
技术介绍
：近年来，化学品合成和使用的数量急剧增加，它们通过各种途径进入到环境中，导致内分泌干扰效应在全球的各种环境介质中均有一定的检出，因此，急需鉴别造成内分泌干扰效应的主要致毒物质。在内分泌干扰效应中，相比于雌激素效应，雄激素效应的研究相对较少，而雄激素活性物质的作用模式也比较复杂，可能具备拟性又可能产生抗性，还有可能兼具拟性和抗性。已有的研究已经证实造成拟雄激素活性的化合物大多为天然和人工合成的甾体化合物，而对于抗雄激素效应，则可能由多类型的化合物引起，低通量的化学分析往往不能鉴别出主要的致毒物质。但在目前的效应导向的分析(EffectDirectedAnalysis,EDA)研究中，基于给定化合物清单鉴别致毒物质的成功率较低，而非目标化合物鉴别耗时耗力，并且由于谱库和毒性数据较为缺乏，同时具有质谱谱图和毒性信息的化合物数量较少，导致毒物鉴定的难度较大。具体来说，在To本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、选取雄激素活性物质高通量筛选模型，其中包含化合物的特征结构与其是否具有雄激素活性的相关关系，从中选取与雄激素活性相关的“活性警示结构”；/nS2、将S1中的“活性警示结构”所含官能团的类别通过官能团分类标准进行分类，查询现有的与化合物分类相对应的特征碎片库中各分类对应的特征二级碎片，整理归纳形成各“活性警示结构”所对应的二级碎片信息，建立“活性警示结构”与特征二级碎片结构相关关系，形成“活性警示结构”二级碎片库；/nS3、将S2中归纳的特征二级碎片通过标准品的甲醇溶液在液相色谱-高分辨质谱上获...

【技术特征摘要】
1.一种基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取雄激素活性物质高通量筛选模型，其中包含化合物的特征结构与其是否具有雄激素活性的相关关系，从中选取与雄激素活性相关的“活性警示结构”；
S2、将S1中的“活性警示结构”所含官能团的类别通过官能团分类标准进行分类，查询现有的与化合物分类相对应的特征碎片库中各分类对应的特征二级碎片，整理归纳形成各“活性警示结构”所对应的二级碎片信息，建立“活性警示结构”与特征二级碎片结构相关关系，形成“活性警示结构”二级碎片库；
S3、将S2中归纳的特征二级碎片通过标准品的甲醇溶液在液相色谱-高分辨质谱上获取的谱图进行验证，若所选标准品中不含有包含“活性警示结构”的化合物，则使用质谱谱图数据库中含有这些“活性警示结构”的化合物的谱图进行验证，建立标准品特征二级碎片数据库；
S4、将环境样品提取物的甲醇溶液，按照S3中的液相色谱-高分辨质谱方法进行上机测试，并进行非目标化合物的提取，选定某个关注的非目标峰，将其计算所得的分子式和所含二级碎片与S3中建立的标准品特征二级碎片数据库进行比对筛选，若不符合，则可判断其不具有雄激素活性；若符合，则可判断其可能具有雄激素活性，并进行后续毒物鉴别流程。


2.根据权利要求1所述的基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，其特征在于，S2中，所述官能团分类标准为Classyfire化合物分类标准，所述特征碎片库为MS-FINDER3.0软件的自带特征碎片库；S3中，所述质谱谱图数据库为mzCloud高分辨液质谱图数据库。


3.根据权利要求1所述的基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，其特征在于，S3中，所述标准品选择为428种环境样品中常见的化学物质，甲醇溶液浓度为50μg/L。


4.根据权利要求1所述的基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄激素活性物质的鉴别方法，其特征在于，S3中，
液相色谱条件为：超高效液相色谱仪：采用Ultimate3000UHPLC，ThermoScientificTM，美国；流动相：A相：Fisher水，B相：甲醇；色谱柱：WatersACQUITYUPLCBEHC18，1.7μm，2.1mm×150mm；进样量：10μL；柱温：40℃；梯度洗脱方法：0min5％B，1min5％B，36min5％B，50min100％B，50.1min5％B；
质谱条件为：采用质谱仪：QExactiveTMFocus组合型四极杆OrbitrapTM，ThermoScientificTM，美国；采集方式：FullMS-ddMS2；极性：正离子/负离子模式各进样一次；ddMS2模式：Discovery：FullMS参数：分辨率：35000(m/z200)，扫描范围：80-1000m/z，AGC目标值：1e6；最大IT：自动；谱图数据类型：轮廓图；ddMS2Discovery参数：分辨率17500(m/z200)，隔离窗口；1.0m/z；步进NCE：20,50,80/110,140,170各进样一次；AGC目标值：5e4；最大IT：自动；循环计数：3；顶点触发：2-6s；动态排除：6.0s；电荷数排除：2-8，>8，排除同位素：开；谱图数据类型：轮廓图。


5.根据权利要求1所述的基于特征液质碎片匹配的环境样品中雄...

【专利技术属性】
技术研发人员：史薇，周成卓，谭皓月，温家琦，于红霞，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32