细胞培养方法、改造抗体、细胞培养基、细胞产品及其应用技术

技术编号:24882264 阅读:51 留言:0更新日期:2020-07-14 18:08
本发明专利技术涉及一种细胞培养方法、改造抗体、细胞培养基、细胞产品及其应用,所述细胞培养方法包括以下步骤:在培养体系中添加改造抗体;所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体,所述改造抗体与Fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与Fc受体的亲和力。本发明专利技术的细胞培养方法和细胞培养基可用于多种细胞的体外培养,获得更高纯度、更高活力的目标细胞,所获得的细胞产品可用于临床应用研究。

【技术实现步骤摘要】
细胞培养方法、改造抗体、细胞培养基、细胞产品及其应用
本专利技术涉及分子生物学及细胞生物学
,特别是涉及一种细胞培养方法、改造抗体、细胞培养基、细胞产品及其应用。
技术介绍
目前,常用的细胞体外培养方法大量应用了细胞培养用抗体来结合目标细胞表面的特定受体分子,以达到激活(activating)或是抑制(blocking)信号通路的目的,促使目标细胞定向分化、持续扩增或凋亡。在小规模培养时,通常将这些抗体包被(coating)在培养皿表面,或是交联到磁珠上。在大规模培养时,为了避免冗长的难以控制的包被过程,或是为了节省高昂的磁珠成本、避免引入外源物质,或是出于其他优化工艺的目的,经常会将这些抗体直接加入培养基中。但是,这样获得的终产品普遍存在着纯度较低、活力较低的问题。目标细胞纯度低,意味着终产品中有过多的其他类型的细胞。这些非目标细胞的功能与目标细胞的不同,其成分通常难以控制,会极大增加科学试验、特别是动物和人体体内试验的复杂程度,严重影响研究的重复性。同样,在临床治疗应用上出于安全性和有效性考虑,获得尽可能高的纯度和高的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:在培养体系中添加改造抗体;所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体,所述改造抗体与Fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与Fc受体的亲和力。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞培养方法,其特征在于,包括以下步骤:在培养体系中添加改造抗体;所述改造抗体为将互补决定区以外的区域经过蛋白质改造的细胞培养用抗体,所述改造抗体与Fc受体的亲和力低于未经过蛋白质改造的细胞培养用抗体与Fc受体的亲和力。


2.根据权利要求1所述的细胞培养方法,其特征在于,所述蛋白质改造的方式包括序列替换、点突变、序列插入、序列缺失、糖基化修饰和化学修饰中的一种或多种。


3.根据权利要求2所述的细胞培养方法,其特征在于,所述序列替换为将所述细胞培养用抗体的铰链区和Fc段替换为IgG2抗体或IgG4抗体的铰链区和Fc段;所述点突变为将所述细胞培养用抗体的铰链区和Fc段中的一个或多个位点的氨基酸进行突变;所述序列插入为将所述细胞培养用抗体的互补决定区插入到IgG2抗体、IgG4抗体或其他改造抗体的骨架上。


4.根据权利要求2所述的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞培养用抗体为IgG1抗体,所述点突变为将所述细胞培养用抗体的第228位、第233位、第234位、第235位、第236位、第239位、第250位、第252位、第254位、第256位、第257位、第311位、第318位、第320位、第322位、第326位、第327位、第329位、第330位、第331位、第332位、第333位、第428位、第433位和第434位氨基酸中的一个或多个进行突变。


5.根据权利要求1~4任一项所述的细胞培养方法,其特征在于,所述细胞培养用抗体为抗CD3抗体、抗CD16抗体、抗CD28抗体、抗CD52抗体或抗CD137抗...

【专利技术属性】
技术研发人员:程源
申请(专利权)人:北京时合生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1