【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】一种改进的生物技术生产L-色氨酸的方法
本专利技术涉及利用生物技术生产色氨酸及其衍生物的方法。
技术介绍
L-色氨酸(L-trp)是一种营养必需的氨基酸,广泛用于食品和制药行业。L-trp还可以作为多种活性次级代谢产物和抗肿瘤药物的合成前体[1],例如紫丁香素和脱氧紫丁香素[2-4],这为基于L-trp的高价值生物疗法奠定了基础。目前,工业上通常通过微生物合成法等生物技术手段来生产L-trp。在微生物中,色氨酸是由分支酸产生的,是莽草酸途径的代谢终产物。从分支酸开始,色氨酸通过邻氨基苯甲酸(ANT)、磷酸核糖氨基苯甲酸(PRA或PA)、羧苯氨基-脱氧核糖-5-磷酸(CdRP)、吲哚-3-甘油磷酸(IGP)和吲哚进行生物合成。合成过程所涉及的酶包括由trpE基因编码的邻氨基苯甲酸合成酶(EC4.1.3.27),由trpD基因编码的邻氨基苯甲酸磷酸核糖基转移酶(EC2.4.1.28),由trpC基因编码的磷酸核糖氨基苯甲酸异构酶(EC5.3.1.24,PRAi)和吲哚-3-甘油磷酸合成酶(EC4.1.1.48,IGP), ...
【技术保护点】
1.一种基因突变以表达吲哚3-甘油磷酸合成酶IGPs的细菌细胞,其特征在于,该细菌细胞所产生的IGPs与野生型IGPs相比,对邻氨基苯甲酸的抑制敏感度降低。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171115 DE 102017126895.2;20171115 LU 1005211.一种基因突变以表达吲哚3-甘油磷酸合成酶IGPs的细菌细胞,其特征在于,该细菌细胞所产生的IGPs与野生型IGPs相比,对邻氨基苯甲酸的抑制敏感度降低。
2.根据权利要求1所述的细菌细胞,其特征在于,该细胞突变后产生:
a)细菌IGPs突变体,该突变体相较于野生型细胞产生的IGPs,对邻氨基苯甲酸的抑制敏感度降低,或
b)具有IGPs活性的异源酶,该酶相较于野生型IGPs,对邻氨基苯甲酸的抑制敏感度降低。
3.根据权利要求2所述的细菌细胞,其特征在于,所述细菌IGPs突变体与基因突变的细菌细胞是同源的。
4.根据权利要求2-3任一所述的细菌细胞,其特征在于,该细胞所产生的IGPs与野生型细胞IGPs相比,在邻氨基苯甲酸结合位点至少也有一个氨基酸发生突变,且突变后的IGPs具有活性并对氨基苯甲酸的抑制敏感度降低。
5.根据权利要求2-4任一所述的细菌细胞,其特征在于,所述细菌细胞突变后的IGPs具有以下特征:
a)与SEQIDNO:1序列相比,用丝氨酸替代第60位的丙氨酸或甘氨酸,并且/或者用异亮氨酸替代第8位的缬氨酸,并且/或者用亮氨酸代替第188位的苯丙氨酸,或者用丝氨酸代替第58位的谷氨酰胺,用脯氨酸代替第59位的缬氨酸,用丝氨酸替代第60位的苯丙氨酸,用赖氨酸替代第61位的谷氨酰胺;或者...
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