一种利用大肠杆菌发酵制备L-苯丙氨酸的方法技术

本发明专利技术属于微生物技术生产医药中间体技术领域，公开了一种利用大肠杆菌发酵制备L‑苯丙氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1)制备大肠杆菌种子液，步骤2）制备发酵培养基，步骤3）制备代谢调节物，步骤4）发酵产L‑苯丙氨酸。本发明专利技术方法针对代谢途径进行了优化，提高了L‑苯丙氨酸的发酵产量；使用的原料易得，环境友好性强。

A method of producing L-phenylalanine by E.coli fermentation

【技术实现步骤摘要】
一种利用大肠杆菌发酵制备L-苯丙氨酸的方法
本专利技术属于微生物技术生产医药中间体
，具体涉及一种利用大肠杆菌发酵制备L-苯丙氨酸的方法。
技术介绍
苯丙氨酸系统命名为“2-氨基苯丙酸”，是α-氨基酸的一种，具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸（L-Phenylalanine）比旋光度为-35.1°，pI=5.48。苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一，常温下为白色结晶或结晶性粉末固体，溶于水，难溶于甲醇、乙醇、乙醚。苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一，属芳香族氨基酸。在体内大部分经苯丙氨酸羟化酶催化作用氧化成酪氨酸，并与酪氨酸一起合成重要的神经递质和激素，参与机体糖代谢和脂肪代谢。L-苯丙氨酸是具有生理活性的芳香族氨基酸，是人体和动物不能靠自身自然合成的必需氨基酸之一，是复配氨基酸输液的重要成份；复合氨基酸输液国内近几年发展很快，已由单纯营养型发展到治疗型，用于肝、肺、脑、肾、婴儿生长不良，代血浆和癌症的辅助治疗等；用于医药，是苯丙氨苄、甲酸溶肉瘤素等氨基酸类抗癌药物的中间体，也是生产肾上腺素、甲状腺素和黑色素的原料药；已有研究表明，L-苯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用大肠杆菌发酵制备L-苯丙氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1)制备大肠杆菌种子液，步骤2）制备发酵培养基，步骤3）制备代谢调节物，步骤4）发酵产L-苯丙氨酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用大肠杆菌发酵制备L-苯丙氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1)制备大肠杆菌种子液，步骤2）制备发酵培养基，步骤3）制备代谢调节物，步骤4）发酵产L-苯丙氨酸。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
步骤1)制备大肠杆菌种子液：以产L-苯丙氨酸的大肠杆菌进行活化，然后接种到一级种子培养基、二级种子培养基中进行扩大培养，得到大肠杆菌种子液；
步骤2）制备发酵培养基：
取各原料：葡萄糖，玉米浆，磷酸二氢钾，碳酸钙，柠檬酸三钠，色氨酸，酪氨酸，七水硫酸镁，维生素B1以及三氯化镧，pH控制在6.5-7.0，灭菌；
步骤3）制备代谢调节物：将丙二酸钠或/和丙氨酸添加无菌水中，搅拌均匀；
步骤4）发酵产L-苯丙氨酸：
将大肠杆菌种子液接种到装有发酵培养基的发酵罐中进行发酵培养24h，然后进行超声处理，再添加占发酵液体积10-20%的步骤3）所述的代谢调节物，并继续发酵培养20-30h，停止发酵。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤2）制备发酵培养基，包括：按照如下配比浓度取各原料：葡萄糖80g/L，玉米浆50g/L，磷酸二氢钾5g/L，碳酸钙2g/L，柠檬酸三钠1g/L，色氨酸0.5g/L，酪氨酸0.5g/L，七水硫酸镁0.1g/L，维生素B10.01g/L，三氯化镧0.005g/...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘加林，霍萧勇，刘加海，方朝杰，张渊源，
申请(专利权)人：杭州巴洛特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33