一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于生物化工技术领域，具体公开了一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用。所述方法包括如下步骤：将南极假丝酵母脂肪酶与HEPES缓冲液混合，配制得到HEPES‑脂肪酶液；然后将所得HEPES‑脂肪酶液与GMP或AMP母液混合得到混合溶液，再加入金属离子混合均匀，过滤后冷冻干燥，得到固载酶。本发明专利技术固载酶制备方法简单，所得固载酶其酶活性高，能高效催化酯化反应，并且重复利用性好，但是它不能催化醇解反应，具有定向催化性质，即能催化酯化反应而不能催化醇解反应，因此本发明专利技术具有非常好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用
本专利技术属于生物化工
，特别涉及一种定向催化酯化反应的固载酶及其制备方法与应用。
技术介绍
脂肪酶(lipase,E.C.3.1.1.3)即三酰基甘油酯水解酶，其功能是催化水解天然油脂，生成甘油二酯、甘油一酯、游离脂肪酸以及甘油，彻底水解油脂得到的是游离脂肪酸和甘油。脂肪酶除了催化水解反应之外，还可以催化其他反应，包括酯化反应、酯交换反应以及醇解反应。脂肪酶的这些性质，使其广泛应用于食品、化工、制药等行业。但是，游离态的脂肪酶存在较多的问题，包括稳定性差、易失活、无法回收重复利用、反应后混入产品中造成分离困难等，因此，脂肪酶在工业化的应用仍存在较大的困难。脂肪酶的固定化可实现其重复利用，采用适宜的载体以及固定化工艺，可得到酶学性质优良(酶活高、稳定性好等)的固定化酶。脂肪酶的固定化，目前研究较多的是侧重于提高酶活、热稳定性、重复利用性、耐pH能力等基本酶学性质方面。对于酶的选择性催化(定向催化)的研究相对较少。脂肪酶除了可以催化水解反应，同时还可以催化酯化、酯交换、醇解等反应。但是本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种定向催化酯化反应的固载酶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：/n将南极假丝酵母脂肪酶与HEPES缓冲液混合，配制得到HEPES-脂肪酶液；然后将所得HEPES-脂肪酶液与核苷酸二钠盐母液混合得到混合溶液，再加入金属离子混合均匀，过滤后冷冻干燥，得到固载酶。/n

【技术特征摘要】
1.一种定向催化酯化反应的固载酶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
将南极假丝酵母脂肪酶与HEPES缓冲液混合，配制得到HEPES-脂肪酶液；然后将所得HEPES-脂肪酶液与核苷酸二钠盐母液混合得到混合溶液，再加入金属离子混合均匀，过滤后冷冻干燥，得到固载酶。


2.根据权利要求1所述的定向催化酯化反应的固载酶的制备方法，其特征在于：所述HEPES-脂肪酶液中南极假丝酵母脂肪酶的浓度为0.36～12.3mg/ml。


3.根据权利要求1所述的定向催化酯化反应的固载酶的制备方法，其特征在于：所述HEPES缓冲液的浓度为0.07-0.35g/ml，pH为5.8-8.3。


4.根据权利要求1所述的定向催化酯化反应的固载酶的制备方法，其特征在于：
所述核苷酸二钠盐为GMP和AMP中的至少一种；
所述核苷酸二钠盐母液的浓度为0.014-0.08g/ml。

【专利技术属性】
技术研发人员：钟南京，陈文艺，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44