表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒和相关痘苗载体表达质粒及其应用。所述重组痘苗病毒的TK基因区包含人组织因子融合蛋白基因，人工合成的痘苗病毒早/晚期启动子驱动组织因子融合蛋白表达，该融合蛋白包含依次相连的分泌信号肽、串联的组氨酸标签、连接肽、截短的人组织因子及血管靶向肽(蛇毒锯鳞蝰素)。所述重组痘苗病毒感染靶细胞后可分泌表达能够靶向结合人脐静脉内皮细胞(模拟肿瘤血管内皮细胞)的组织因子融合蛋白，从而导致血管内凝血形成血栓，可望最终通过栓塞肿瘤血管切断其血液供应而抑制肿瘤细胞生长。

【技术实现步骤摘要】
表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒及其应用
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒及相关痘苗载体表达质粒及其应用。
技术介绍
当前，恶性肿瘤仍然是极大危害人类生命健康的严重疾病。随着分子生物学、免疫学及肿瘤生物学等基础研究的进步,肿瘤生物治疗异军突起,成为继外科手术，化学药物治疗(化疗)和放射治疗(放疗)等传统方法之后的肿瘤治疗“第四种模式”,日益引起重视、进展迅速，并酝酿突破。一些方案已获准临床应用，在某些类型的肿瘤(如黑色素瘤和肾细胞癌)已初见疗效。在肿瘤生物治疗策略中，肿瘤血管靶向治疗是一特别引人注目的方法。恶性肿瘤的发生发展涉及极为复杂的细胞信号传导通路和代谢途径的异常，针对任何单一环节的治疗干预都难以达到理想疗效，因为肿瘤细胞已进化出多种适应和代偿功能，往往足以抵消单一治疗干预，产生耐药性或放疗耐受性，最终使治疗归于失败。然而，任何类型的肿瘤，都有一共同的“软肋”或薄弱环节，那就是，相比于正常细胞，生长代谢更为旺盛的肿瘤细胞毫无例外都需要足够、通畅的血管供应丰富的血液营养物质和氧气，同时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒，其特征在于，人组织因子融合蛋白基因被插入痘苗病毒TK基因区，由人工合成的痘苗病毒早/晚期启动子驱动表达。/n

【技术特征摘要】
1.一种表达人组织因子融合蛋白的重组痘苗病毒，其特征在于，人组织因子融合蛋白基因被插入痘苗病毒TK基因区，由人工合成的痘苗病毒早/晚期启动子驱动表达。


2.如权利要求1所述重组痘苗病毒，其特征在于，所述人组织因子融合蛋白依次包括以下元件：分泌信号肽、串联的组氨酸标签、ND2连接肽、截短的人组织因子、蛇毒锯鳞蝰素血管靶向肽，它们的核酸序列依次如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2、SEQIDNo.3、SEQIDNo.4和SEQIDNo.5所示。


3.如权利要求2所述重组痘苗病毒，其特征在于，所述人组织因子融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNo.6所示。


4.如权利要求1所述重组痘苗病毒，其特征在于，所述重组痘苗病毒的母体病毒是痘苗病毒WR株。


5.如权利要求1所述重组痘苗病毒，其特征在于，所述由人工合成的痘苗病毒早/晚期启动子的核酸序列如SEQIDNo.7所示。


6.如权利要求1所述重组痘苗病毒，其特征在于，还包括与人组织因子融合蛋白基因表达盒串联的可选择第一标志基因表达盒，所述可选择第一标志基因表达盒中，可选择标志基因为gpt基因，gpt基因由痘苗病毒P7.5早/晚期启动子驱动表达...

【专利技术属性】
技术研发人员：阎辉，刘美丽，罗砚曦，
申请(专利权)人：杭州医学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33