猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法技术

本发明专利技术公开了一种猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法。本发明专利技术提供了一种猪乙型脑炎疫苗抗原大规模培养工艺，使用猪肾细胞PK‑15细胞培养猪乙型脑炎病毒，病毒接种一次可以连续收获多个批次的病毒，且病毒效价与BHK‑21、VERO细胞相当或高于现有培养工艺，极大的提高了病毒产量，降低了生产成本，是一种适宜规模化生产的猪乙型脑炎疫苗抗原培养工艺。

【技术实现步骤摘要】
猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法
本专利技术涉及生物疫苗领域，具体涉及一种猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法。
技术介绍
猪乙型脑炎病毒(Japaneseencephalitisvirus,JEV)可引起乙型脑炎疾病，乙型脑炎是一种经蚊虫传播的人畜共患病，是严重威胁人畜健康的一种中枢神经系统的急性传染病。猪是猪乙型脑炎病毒的重要储存宿主和扩增宿主，是乙型脑炎的主要传染源。猪乙型脑炎病毒是引起母猪繁殖障碍的主要病原之一，目前主要通过免疫接种的方式来预防。猪乙型脑炎病毒可在多种组织培养细胞内增殖，其中BHK-21、Vero及C6/36等细胞敏感性较高，可用于JEV的培养。JEV在BHK-21、VERO细胞等细胞中生长可导致细胞发生病变，导致细胞死亡。常规培养方法培养JEV病毒接种一次只能收获一次病毒，成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种适宜规模化生产的猪乙型脑炎疫苗抗原培养工艺。第一方面，本专利技术保护一种猪乙型脑炎疫苗抗原培养方法，包括如下步骤：(1)将猪乙型脑炎病毒接种于PK-15细胞，接种的病毒量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种猪乙型脑炎疫苗抗原培养方法，包括如下步骤：/n(1)将猪乙型脑炎病毒接种于PK-15细胞，接种的病毒量为0.4～10MOI；/n(2)完成步骤(1)后，继续培养细胞48h后开始连续收获病毒；每次收获方式如下：收集细胞培养液，从细胞培养液中获得病毒，并且添加新的细胞培养液继续培养细胞直至下次收获病毒。/n

【技术特征摘要】
1.一种猪乙型脑炎疫苗抗原培养方法，包括如下步骤：
(1)将猪乙型脑炎病毒接种于PK-15细胞，接种的病毒量为0.4～10MOI；
(2)完成步骤(1)后，继续培养细胞48h后开始连续收获病毒；每次收获方式如下：收集细胞培养液，从细胞培养液中获得病毒，并且添加新的细胞培养液继续培养细胞直至下次收获病毒。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：接种的病毒量为0.6～3MOI。


3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：完成步骤(1)后，在继续培养细胞的第48h至192h期间连续收获病毒，每次收获病毒间隔24h或48h或72h；每次收获方式如下：收集细胞培养液，从细胞培养液中获得病毒，并且添加新的细胞培养液继续培养细胞直至下次收获病毒。


4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：分...

【专利技术属性】
技术研发人员：周远成，邝声耀，阴文奇，
申请(专利权)人：畜科生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51