一种用于诊断喉癌的试剂盒及其专用生物标志物制造技术

本发明专利技术公开了一种用于诊断喉癌的试剂盒及其专用生物标志物。生物标志物由假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属组成。实验证明，检测待测者唾液中生物标志物的丰度，可以诊断喉癌且准确性较高。唾液样本取样难度小，且不会造成创伤，具有非侵袭性、安全、廉价的优势。本发明专利技术具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种用于诊断喉癌的试剂盒及其专用生物标志物
本专利技术属于生物
，具体涉及一种用于诊断喉癌的试剂盒及其专用生物标志物。
技术介绍
喉癌是头颈癌中预后较差的恶性肿瘤之一，五年总体生存率仅有15％-65％，早期五年生存率达60％左右，晚期仅有17-32％，且具有侵袭性强、转移率高、术后易复发的特点。然而，喉癌在早期是很难发现的，一经确诊，通常是晚期，且术后会严重影响患者的呼吸、吞咽、发声等生理功能，造成咽喉功能损害，严重影响患者的生活质量。因此，寻找有效的早期喉癌筛查方法对于预防喉癌发生，提高患者生存率和生活质量显得至关重要。导致喉癌发生的因素很多，其中酒精和吸烟史导致喉癌的主要因素，与不吸烟的喉癌患者相比，吸烟导致喉癌患者的死亡率提高20％。此外，人乳头状瘤病毒(HPV)也是引发喉癌的因素。近几年关于微生物菌群的研究越来越多，口腔、肠、胃、喉黏膜层定植着许多共生的微生物，这些微生物在人类的健康中起着重要作用。研究表明，微生物的多样性和丰度的改变与癌症的发生发展密切相关。如幽门螺杆菌是胃癌发生发展的重要致病因素，幽门螺杆菌感染可导致胃功能紊乱，从而导致癌症的发生。肠道中微生物的变化也与结直肠癌的发生发展有关，已有研究显示一些致病微生物可以作为早期结直肠癌诊断的生物标志物。口腔微生物与喉癌相关性的研究具有一定的优势和价值。相较组织样本，唾液样本取样难度小，且不会造成创伤，具有非侵袭性、安全、廉价的优势。通过研究口腔微生物与喉癌的相关性，筛选具有潜在应用价值的喉癌早期预防和诊断的生物标志物，可以对尚无临床症状的高危人群做出早期预警，防止喉癌的发生，提高患者生存率和生活质量。
技术实现思路
本专利技术的目的为诊断喉癌。本专利技术首先保护检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质在制备用于诊断喉癌的试剂盒中的应用。本专利技术还保护检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质在诊断喉癌中的应用。上述任一所述的应用中，所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质”具体可为检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质。本专利技术还保护一种用于诊断喉癌的试剂盒，可包括检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质。上述试剂盒中，所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质”可为检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质。所述试剂盒还可包括记载有判断标准的载体。所述判断标准可为：如果待测者唾液中待测微生物的丰度高于对照唾液中待测微生物的丰度，则所述待测者为或疑似为喉癌患者患者；如果待测者唾液中待测微生物的丰度不高于对照唾液中待测微生物的丰度，则所述待测者不为或疑似不为喉癌患者；所述对照唾液为非喉癌者的唾液；所述待测微生物为假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属。上述任一所述高于可为在统计学上的高于。上述任一所述高于可为显著高于(在统计学上)。上述试剂盒中，所述非喉癌者的唾液具体可为健康人的唾液或声带息肉患者的唾液。上述任一所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质”可包括引物对1、引物对2、引物对3、引物对4和引物对5。所述引物对1可由引物1F和引物1R组成；所述引物对1的靶序列可含有特异DNA片段1；所述特异DNA片段1可为如下y1)或y2)：y1)序列表的序列11所示的单链DNA分子；y2)将序列11经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子。所述引物对2可由引物2F和引物2R组成；所述引物对2的靶序列可含有特异DNA片段2；所述特异DNA片段2可为如下y3)或y4)：y3)序列表的序列12所示的单链DNA分子；y4)将序列12经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列12具有相同功能的DNA分子。所述引物对3可由引物3F和引物3R组成；所述引物对3的靶序列可含有特异DNA片段3；所述特异DNA片段3可为如下y5)或y6)：y5)序列表的序列13所示的单链DNA分子；y6)将序列13经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子。所述引物对4可由引物4F和引物4R组成；所述引物对4的靶序列可含有特异DNA片段4；所述特异DNA片段4可为如下y7)或y8)：y7)序列表的序列14所示的单链DNA分子；y8)将序列14经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列14具有相同功能的DNA分子。所述引物对5可由引物5F和引物5R组成；所述引物对5的靶序列可含有特异DNA片段5；所述特异DNA片段5可为如下y9)或y10)：y9)序列表的序列15所示的单链DNA分子；y10)将序列15经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子。所述引物1F可为如下a1)或a2)：a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子。所述引物1R可为如下a3)或a4)：a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子。所述引物2F可为如下b1)或b2)：b1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；b2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子。所述引物2R可为如下b3)或b4)：b3)序列表的序列4所示的单链DNA分子；b4)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子。所述引物3F可为如下c1)或c2)：c1)序列表的序列5所示的单链DNA分子；c2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子。所述引物3R可为如下c3)或c4)：c3)序列表的序列6所示的单链DNA分子；c4)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子。所述引物4F可为如下d1)或d2)：d1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；d2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子。所述引物4R可为如下d3)或d4)：d3)序列表的序列8所示的单链DNA分子；...

【技术保护点】
1.检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质在制备用于诊断喉癌的试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质在制备用于诊断喉癌的试剂盒中的应用。


2.检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质在诊断喉癌中的应用。


3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质”为检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质。


4.一种用于诊断喉癌的试剂盒，包括检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质。


5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物的物质”为检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质。


6.如权利要求4或5所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括记载有判断标准的载体；
所述判断标准为：如果待测者唾液中待测微生物的丰度高于对照唾液中待测微生物的丰度，则所述待测者为或疑似为喉癌患者患者；如果待测者唾液中待测微生物的丰度不高于对照唾液中待测微生物的丰度，则所述待测者不为或疑似不为喉癌患者；
所述对照唾液为非喉癌者的唾液；
所述待测微生物为假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属。


7.如权利要求1至3任一所述的应用或权利要求4至6任一所述的试剂盒，其特征在于：所述“检测唾液中假单胞菌属、凝聚杆菌属、拟杆菌属、粪杆菌属和瘤胃梭菌属五种微生物丰度的物质”包括引物对1、引物对2、引物对3、引物对4和引物对5；
所述引物对1由引物1F和引物1R组成；所述引物对1的靶序列含有特异DNA片段1；所述特异DNA片段1为如下y1)或y2)：
y1)序列表的序列11所示的单链DNA分子；
y2)将序列11经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子；
所述引物对2由引物2F和引物2R组成；所述引物对2的靶序列含有特异DNA片段2；所述特异DNA片段2为如下y3)或y4)：
y3)序列表的序列12所示的单链DNA分子；
y4)将序列12经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列12具有相同功能的DNA分子；
所述引物对3由引物3F和引物3R组成；所述引物对3的靶序列含有特异DNA片段3；所述特异DNA片段3为如下y5)或y6)：
y5)序列表的序列13所示的单链DNA分子；
y6)将序列13经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子；
所述引物对4由引物4F和引物4R组成；所述引物对4的靶序列含有特异DNA片段4；所述特异DNA片段4为如下y7)或y8)：
y7)序列表的序列14所示的单链DNA分子；
y8)将序列14经过一个或几个核苷酸的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽丽，黄志刚，郭伟，郭盈，尹高菲，石太平，刘如银，
申请(专利权)人：北京创新乐土生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11