一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒及使用方法技术

本发明专利技术提供一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，包括用于检测TYMS基因表达水平的引物组和探针、用于检测内参基因β‑actin表达水平的引物组和探针，还包括标准对照品和阴性对照品。本发明专利技术还提供了一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒的使用方法。本发明专利技术通过设计扩增TYMS的特异性引物和探针，利用人工构建基因标准品模拟群体样本的中位值作为对照进行检测，并使用热启动酶保证检测结果的准确性和体系的稳定性。

A human gene expression assay using TYMS

【技术实现步骤摘要】
一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒及使用方法
本专利技术应用于基因检测
，具体涉及一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒及使用方法。
技术介绍
氟类药物包括5-FU、替加氟、卡莫氟、氟尿苷、脱氧氟尿苷以及卡培他滨等,对消化道肿瘤及其他实体瘤均有良好疗效，在肿瘤内科治疗中占有重要地位。当氟类药物进入人体后，可被转化为活性代谢产物一磷酸氟尿嘧啶脱氧核苷(FdUMP)、三磷酸氟尿嘧啶脱氧核苷(FdUTP)和三磷酸氟尿嘧啶(FUTP)等嘧啶类核苷酸类似物，进而产生抗肿瘤活性。TYMS(ThymidylateSynthetase，TS)基因编码的胸苷酸合成酶，是嘧啶核苷酸合成的限速酶，是肿瘤生长的重要因子，也是氟类药物发挥细胞毒作用的目标酶。氟类药物转化为FdUMP后，与TS、5,10-亚甲基四氢叶酸结合形成三联复合物，dUMP与TS结合后转化为脱氧胸腺嘧啶核苷dTMP，使DNA合成受限。多种肿瘤的临床研究均显示TYMSmRNA表达水平与氟类药物疗效密切相关，例如：结直肠癌、肺癌、乳腺癌、头颈鳞状细胞癌等。临床研究表明，低TYMSmRN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：包括用于检测TYMS基因表达水平的引物组和探针、用于检测内参基因β-actin表达水平的引物组和探针：/nTYMS-F上游引物：TGACTTTATACACACTTTGGGAGA，/nTYMS-R下游引物：CCTTCAATCTGAAAGTCTTCA，/nTYMS-P探针：FAM-CTTCGAAAAGTTGAGAAAATTGATG-TRAMA；/nβ-actin-F上游引物：ACCATGTACCCGGGCATT，/nβ-actin-R下游引物：TCTGCTGGAAGGTGGACAGTG，/nβ-actin-P探针：VIC-CATCGCACCC...

【技术特征摘要】
1.一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：包括用于检测TYMS基因表达水平的引物组和探针、用于检测内参基因β-actin表达水平的引物组和探针：
TYMS-F上游引物：TGACTTTATACACACTTTGGGAGA，
TYMS-R下游引物：CCTTCAATCTGAAAGTCTTCA，
TYMS-P探针：FAM-CTTCGAAAAGTTGAGAAAATTGATG-TRAMA；
β-actin-F上游引物：ACCATGTACCCGGGCATT，
β-actin-R下游引物：TCTGCTGGAAGGTGGACAGTG，
β-actin-P探针：VIC-CATCGCACCCCCAGAGCGCAAGT–TRAMA。


2.如权利要求1所述一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：还包括标准对照品和阴性对照品。


3.如权利要求2所述一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：所述阴性对照品为DEPC处理的去离子水。


4.如权利要求1所述一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：所述探针5’端荧光基团为适用于荧光定量PCR分析的常规使用的荧光报告基团，所述荧光报告基团为FAM、VIC、HEX、cy5或者ROX；3’端的淬灭基团为适用于荧光定量PCR的常规使用的荧光淬灭基团，所述荧光淬灭基团为TAMRA、BHQ1、BHQ2、MGB或者Dabcy1。


5.如权利要求4所述一种人类TYMS基因表达水平检测试剂盒，其特征在于：用于检测TYMS基因表达水平的探针5’端荧光报告基团选用FAM，3’...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙松松，韩勋领，罗锋，
申请(专利权)人：重庆浦洛通基因医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆;50