一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型制造技术

本发明专利技术公开一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，包括以下步骤：将秀丽隐杆线虫同期化处理；将大肠杆菌培养形成菌苔；将已同期化处理的秀丽隐杆线虫置于含有大肠杆菌菌苔的培养基中，即为鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型；所述的同期化处理为经裂解、离心、沉淀后培养40~60h，获得同期化的L4期线虫；所述大肠杆菌先置于LB固体培养基37℃培养18 h~24 h后，再置于LB肉汤中37℃摇床中摇菌18 h~24 h，最后置于SK培养基中置于20℃生化培养箱中过夜烘干形成菌苔。本发明专利技术建立线虫模型更加快速简便，节省时间和成本，可以用秀丽隐杆线虫致病模型来研究病原菌的致病机制，并进一步做抗菌药物的筛选。

【技术实现步骤摘要】
一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型
本专利技术涉及生物模型
，尤其涉及一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型。
技术介绍
大肠杆菌(Escherichiacoli)是肠杆菌科，埃希菌氏属，革兰阴性短杆菌，大小0.5×1～3μm，是肠道正常菌群的重要组成部分，一般不具有致病性，但一些特殊血清型可引起人和动物的严重腹泻和败血症，统称为致病性大肠杆菌。根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为以下6种:肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠黏附性大肠杆菌(EAEC)和弥散粘附性大肠杆菌(DAEC)。随着广西养牛业的发展，规模化养牛场越来越普遍，致病性大肠杆菌给养牛业也带来重大的经济损失，寻找关键的解决方法迫在眉睫。秀丽隐杆线虫(Caenorhabditiselegans)是一种生活在土壤中的小型线虫，以细菌为食，作为一种典型的模式生物，秀丽隐杆线虫有以下几个特点：身体透明，结构简单，显微镜下易于观察；生命周期短，分为4个阶段：胚胎发育期、生长发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）将秀丽隐杆线虫同期化处理；/n（2）将大肠杆菌在SK培养基中培养形成菌苔；/n（3）将已同期化处理的秀丽隐杆线虫置于含有大肠杆菌菌苔的培养基中；即为鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型；/n所述的同期化处理为经裂解、离心、沉淀后培养40~60h，获得同期化的L4期线虫；/n所述大肠杆菌先置于LB固体培养基37 ℃培养18 h~24 h后，再置于LB肉汤中37 ℃摇床中摇菌18 h ~24 h，最后置于SK培养基中置于20 ℃生化培养箱中过夜烘干形成菌苔。/n

【技术特征摘要】
1.一种鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将秀丽隐杆线虫同期化处理；
（2）将大肠杆菌在SK培养基中培养形成菌苔；
（3）将已同期化处理的秀丽隐杆线虫置于含有大肠杆菌菌苔的培养基中；即为鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型；
所述的同期化处理为经裂解、离心、沉淀后培养40~60h，获得同期化的L4期线虫；
所述大肠杆菌先置于LB固体培养基37℃培养18h~24h后，再置于LB肉汤中37℃摇床中摇菌18h~24h，最后置于SK培养基中置于20℃生化培养箱中过夜烘干形成菌苔。


2.根据权利要求1所述鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，所述同期化处理过程的裂解时间为4~5min。


3.根据权利要求1所述鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，所述述同期化处理过程的离心转速为2500~3500r/min，离心时间为1~3min。


4.根据权利要求2所述鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，所述的裂解的裂解液先置于20℃、150r/min的摇床中震荡20h。


5.根据权利要求1所述鉴定牛源大肠杆菌毒力的秀丽隐杆线虫模型，其特征在于，所述同期化处理过程的培养是将离心管底部...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭昊，李军，白慧丽，李常挺，陶立，陈忠伟，吴翠兰，潘艳，冯世文，钟舒红，马春霞，贺会利，胡帅，谢永平，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45