利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法技术

本发明专利技术公开了一种利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法。所述基因表达方法包括：优选以包含目标基因的AAV载体、辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后共转染宿主细胞；或者，先以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂孵育形成的阳离子多聚体DNA复合物和包含目标基因的AAV载体中的任意一者转染宿主细胞，之后以其中的另一者在设定时间内转染所述宿主细胞。本发明专利技术通过利用阳离子多聚体的本身特性，将其与AAV介导的基因治疗联合起来，进而提高AAV介导的基因表达效果，提高基因表达效率，并加强AAV介导的基因治疗效果，对推动基因治疗、细胞治疗、细胞工程等领域发展有重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法
本专利技术涉及一种促进AAV介导的基因表达方法，具体的，尤其涉及一种利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法，属于基因工程

技术介绍
基因治疗是现在人类治疗肿瘤、传染病、遗传病的重要技术手段，指将特定的外源基因通过多种方式导入到目的细胞内以达到治疗甚至彻底治愈疾病的一种有效的方案。其中基因治疗最为关键的技术，即选用合适方式或者载体将用来治疗的外源基因，稳定、安全地导入目的细胞中，并高效的进行治疗。不同的方式和载体的递送效率，极大的影响着后续的研究和临床治疗效果。因此，专利技术出一种用于高效促进载体表达的方法是亟需必要的。目前，用于基因递送的载体主要分为病毒载体和非病毒载体。AAV作为重要的病毒载体，在科学研究和临床应用中都有着很广泛的应用。AAV是一种细小病毒，自然缺陷、无包被和无致病原性。AAV基因组是一个线性、单链DNA(ssDNA)分子，由4680个核苷酸构成，在每个末端含有一个145个碱基组成的末端重复序列(ITR)。随着AAV的研究发展，其在科本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法，其特征在于包括：/n以包含目标基因的AAV载体、辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后共转染宿主细胞；/n或者，先以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂孵育形成的阳离子多聚体DNA复合物和包含目标基因的AAV载体中的任意一者转染宿主细胞，之后以其中的另一者在设定时间内转染所述宿主细胞。/n

【技术特征摘要】
1.一种利用阳离子多聚体DNA复合物促进AAV介导的基因表达方法，其特征在于包括：
以包含目标基因的AAV载体、辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后共转染宿主细胞；
或者，先以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂孵育形成的阳离子多聚体DNA复合物和包含目标基因的AAV载体中的任意一者转染宿主细胞，之后以其中的另一者在设定时间内转染所述宿主细胞。


2.根据权利要求1所述的基因表达方法，其特征在于包括：
以包含目标基因的AAV载体、辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后共转染宿主细胞；
或者，先以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后转染宿主细胞，之后再在选定时间内以包含目标基因的AAV载体转染所述宿主细胞，所述设定时间小于24h，优选小于12h，更优选为6h以内；
或者，先以包含目标基因的AAV载体转染宿主细胞，之后再在选定时间内以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后转染所述宿主细胞，所述设定时间小于24h以内，优选小于6h；其中同时转染为最佳。


3.根据权利要求1所述的基因表达方法，其特征在于包括：
以包含目标基因的AAV载体、辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂共孵育后共转染宿主细胞，并进行基因表达24h以上，优选48h以上，尤其优选72h以上；
或者，先以辅助DNA与带正电荷的细胞转染试剂孵育形成的阳离子多聚体DNA复合物和包含目标基因的AAV载体中的任意一者转染宿主细胞，之后以其中的另一者在设定时间内转染所述宿主细胞，并进行基因表达24h以上，优选48h以上，尤其优选72h以上。


4.根据权利要求1所述的基因表达方法，其特征在于包括：当以包含目标基因的AAV载体、辅...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵嘉红，张宗德，谈鹏程，赵晓明，吴相，盛必成，
申请(专利权)人：苏州吉恒基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32