基于焦磷酸测序技术的GATA3基因甲基化检测试剂盒及检测方法技术

技术编号:24698936 阅读:97 留言:0更新日期:2020-06-30 22:57
本发明专利技术公开了一种基于焦磷酸测序技术的GATA3基因甲基化检测试剂盒及检测方法,试剂盒包括GATA3基因扩增引物GATA3‑mF:TAGGGGATGTAGTGGTTTAAAG和GATA3‑mR:Biotin‑CAGTCAAAAAAACCAACCCT,以及测序引物GATA3‑mS1:GATTGGTTTTTTTAGGTTT、GATA3‑mS2:CGTTTYGGGGTGTTTATTG。本发明专利技术可以低成本、高通量定位定量检测GATA3基因20个CpG位点的甲基化比例,从而精准评估GATA3基因的甲基化水平。

Methylation detection kit and detection method of GATA3 gene based on pyrosequencing technology

【技术实现步骤摘要】
基于焦磷酸测序技术的GATA3基因甲基化检测试剂盒及检测方法
本专利技术属于核酸体外扩增及甲基化的定位、定量检测领域,具体涉及一种基于焦磷酸测序技术的GATA3基因CpG岛甲基化定量检测引物、试剂盒及检测方法。
技术介绍
世界卫生组织(WHO)统计,全世界女性乳腺癌(Breastcancer)发病率为150万人/年,死亡率57万人/年,乳腺癌正成为危害女性健康、影响女性生活质量的最大威胁。由于乳腺癌的复杂性和异质性,致使临床分期、病理分级甚至分子分型相同的患者对同一治疗方案获益率差异极大,甚至引发毒副作用。由此表明癌细胞的特性并不完全由其DNA序列决定,表观遗传信息(包括组蛋白的乙酰化修饰、DNA甲基化、染色质重塑以及非编码RNA)也参与其中,并逐渐成为肿瘤分子病理研究新的热点。DNA甲基化主要是在CpG甲基化结合蛋白(MBDs)和DNA甲基转移酶(DNMTs)的作用下,将甲基从S-腺苷甲硫氨酸转移到胞嘧啶(C)的5’端,形成5-甲基胞嘧啶(5-mC)。正常人类基因组中约有5000万个5-mC,其中1-2%的CpG位点呈现高度聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的引物,其特征在于:包括GATA3基因甲基化测序引物GATA3-mS1和/或GATA3-mS2,该测序引物与GATA3基因测序片段相匹配,测序引物的序列如下所示:/nGATA3-mS1:5’-GATTGGTTTTTTTAGGTTT-3’/nGATA3-mS2:5’-CGTTTYGGGGTGTTTATTG-3’。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的引物,其特征在于:包括GATA3基因甲基化测序引物GATA3-mS1和/或GATA3-mS2,该测序引物与GATA3基因测序片段相匹配,测序引物的序列如下所示:
GATA3-mS1:5’-GATTGGTTTTTTTAGGTTT-3’
GATA3-mS2:5’-CGTTTYGGGGTGTTTATTG-3’。


2.根据权利要求1所述一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的引物,其特征在于:所述测序引物GATA3-mS1对应的测序程序编辑为:
5’-YGTTTTYGTTYGTTTYGTTTTTTTYGTTGGGGYGTTTYGGAGTYGYGTGTTTTTYGTTTYGGGGT-3’。


3.根据权利要求1所述一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的引物,其特征在于:所述测序引物GATA3-mS2对应的测序程序编辑为:5’-YGTAGAGYGTGGTTTGGAGATTYGYGAGTYGGGGAAGGTYGTYGTGGAGTTTYGATTAGAGGTYGGGGTT-3’。


4.根据权利要求1所述一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的引物,其特征在于:所述GATA3基因测序片段采用GATA3基因特异性扩增引物GATA3-mF和GATA3-mR扩增得到,扩增引物的序列如下所示:
GATA3-mF:5’-TAGGGGATGTAGTGGTTTAAAG-3’
GATA3-mR:5’-CAGTCAAAAAAACCAACCCT-3’。


5.一种基于焦磷酸测序技术检测GATA3基因甲基化的试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括GATA3基因特异性扩增引物及GATA3基因甲基化测序引物;
所述扩增引物的序列如下所示:
GATA3-mF:5’-TAGGGGATGTAGTGGTTTAAAG-3’
GATA3-mR:5’-CAGTCAAAAAAACCAACCCT-3’
所述测序引物的序列如下所示:
GATA3-mS1:5’-GATTGGTTTTTTTAGGTTT-3’
GATA3-mS2:5’-CGTTTYGGGGTGTTTATTG-3’。


6.根据权利要求5所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:王婷任娟贺钰婷乔晓宾问宇昕
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:陕西;61

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