一种天然皮革及其制品核酸提取的膜吸附柱法制造技术

技术编号:24698869 阅读:46 留言:0更新日期:2020-06-30 22:56
本发明专利技术公开天然皮革及其制品核酸提取的膜吸附柱方法。本发明专利技术涉及天然皮革种源鉴定技术领域,具体涉及一种基因组DNA提取方法,尤其涉及一种天然皮革及其制品核酸的提取方法。本发明专利技术旨在提供一种行之有效的天然皮革DNA提取方法,可用于天然皮革的荧光PCR种源鉴定,为天然皮革的成分鉴定提供一个方案。

A membrane adsorption column method for nucleic acid extraction from natural leather and its products

【技术实现步骤摘要】
一种天然皮革及其制品核酸提取的膜吸附柱法
:本专利技术涉及天然皮革种源鉴定
,具体涉及一种基因组DNA提取方法,尤其涉及一种天然皮革及其制品核酸膜吸附柱提取方法。
技术介绍
:由于天然皮革、再生皮革和人造皮革之间性能和价格差异以及消费者对产品质量尤其是材料属性的要求不断提高,但随着处理技术日益成熟,收缩了合成皮革的外观差异和天然皮革,让消费者和监管机构对产品属性很难定义,如何快速准确地鉴别皮革材料一直是消费者和检测机构关注的焦点。DNA鉴定法主要是动物的DNA特征来确定它的物种,实现准确判定真正皮革产品的属性,但天然皮革在制作中一般经过浸灰、软化、浸酸、鞣制等过程,DNA破坏严重且样品基质中含有多种PCR抑制成分,因此DNA鉴定法其难点在于从天然皮革中提取适合试验所需的DNA含量。本专利技术旨在提供一种行之有效的天然皮革及其制品核酸膜吸附柱提取方法,可用于天然皮革的荧光PCR种源鉴定,为天然皮革及其制品的成分鉴定提供一个方案。
技术实现思路
:本专利技术旨在提供一种天然皮革及其制品核酸膜吸附柱提取的方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种天然皮革及其制品核酸提取的膜吸附柱方法,其特征在于包括以下步骤:/n1)样品预处理:尽量除去表面涂层,用PBS溶液或者蒸馏水浸泡样品24小时,期间进行多次换液,晾干样品并将其剪成约1mm

【技术特征摘要】
1.一种天然皮革及其制品核酸提取的膜吸附柱方法,其特征在于包括以下步骤:
1)样品预处理:尽量除去表面涂层,用PBS溶液或者蒸馏水浸泡样品24小时,期间进行多次换液,晾干样品并将其剪成约1mm2的小块,使用液氮对样品进一步低温冷冻粉碎。
2)DNA裂解:过程中称取约30mg样品2份分别置于2mL的无菌离心管中,加入500uL核酸裂解液A以及50uL蛋白酶K溶液(200ug/mL),60℃裂解24小时,期间进行多次混匀。
3)DNA分离:在上述溶液中加入500uL分离液B,于70℃孵育30min。
4)DNA吸附:将上述溶液转移至DNA硅胶膜吸附柱中,10000rpm离心1min。
5)DNA洗涤:倒去离心液,在吸附柱中加入500uL洗涤液C,10000rpm离心1min,重复2次。
6)DNA洗脱:将DNA硅胶膜吸附柱于36℃干燥2min,置于一个空的无菌1.5mL离心管中,在硅胶膜上加入50~100uL洗脱液D,10000rpm离心1min,收集核酸。...

【专利技术属性】
技术研发人员:金萍丁洪流陈英
申请(专利权)人:苏州市产品质量监督检验院
类型:发明
国别省市:江苏;32

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