抗TIF1γ-IgA与抗TIF1γ-IgG作为联合诊断标志物在肺癌诊断中的应用制造技术

本发明专利技术提供了抗TIF1γ‑IgA与抗TIF1γ‑IgG作为联合诊断标志物在肺癌早期诊断中的应用，属于医学诊断技术领域。本发明专利技术首次发现TIF1γ蛋白在肺癌早期患者癌组织中存在异常高表达；同时发现肺癌早期患者体内存在针对TIF1γ的强烈体液免疫反应，其中血清抗TIF1γ‑IgA与TIF1γ‑IgG自身抗体可成为肺癌早期诊断的标志物，且抗TIF1γ‑IgA与抗TIF1γ‑IgG的联合检测可在保证特异性的基础上，明显提高肺癌患者早期诊断的敏感性，适合开发成具有临床应用价值的联合检测试剂盒。因此，抗TIF1γ‑IgA与抗TIF1γ‑IgG的联合检测有助于进一步改进肺癌患者的早期血清学筛查质量，从而提高肺癌的治愈率与5年生存率。

The application of anti-tif1 \u03b3 - IgA and anti-tif1 \u03b3 - IgG in the diagnosis of lung cancer

【技术实现步骤摘要】
抗TIF1γ-IgA与抗TIF1γ-IgG作为联合诊断标志物在肺癌诊断中的应用
本专利技术属于医学诊断
，具体而言，涉及抗TIF1γ-IgA与抗TIF1γ-IgG作为联合诊断标志物在肺癌早期诊断中的应用。
技术介绍
肺癌是当今世界上发病率和致死率高居首位的恶性肿瘤，对人类健康危害重大。早期诊断、及时的手术根治性切除对于肺癌患者的预后意义重大，研究显示，Ⅰ期接受手术的肺癌患者5年生存率可高达92％[GoldstrawP,ChanskyK,CrowleyJ,etal.TheIASLCLungCancerStagingProject:ProposalsforRevisionoftheTNMStageGroupingsintheForthcoming(Eighth)EditionoftheTNMClassificationforLungCancer.JThoracOncol.2016；11(1):39-51.]；但肺癌早期多无特异临床症状，难以被察觉，大多数患者就诊时已处于疾病的晚期，从而失去了手术的最佳治疗时期，致5年生存率仅5％-15％[Jantus-LewintreE,UsoM,SanmartinE,CampsC.Updateonbiomarkersforthedetectionoflungcancer.LungCancer(Auckl).2012；3:21-29.]。因此，提高肺癌的早期诊断效率对于改善患者的预后具有重要作用。血清学指标具有检测方便、安全等优点，但目前常用的肿瘤抗原类标志物不同程度存在检测敏感度或特异性问题，临床实际应用效果欠理想，尤其早期诊断价值有限。近年来的研究发现在癌症发生发展的过程中，少量异常表达的肿瘤相关抗原(TAAs)即可刺激B细胞产生大量的自身抗体，这使得血清自身抗体标志物的检测有助于癌症的早期诊断。文献报道肺癌患者在影像学改变出现的前5年即可在血清中检测到针对TAAs的自身抗体[ZhongL,CoeSP,StrombergAJ,KhattarNH,JettJR,HirschowitzEA.Profilingtumor-associatedantibodiesforearlydetectionofnon-smallcelllungcancer.JThoracOncol.2006；1(6):513-519.]。越来越多的研究证明，癌症早期异常表达的TAAs可诱导机体的体液免疫应答，产生针对TAAs的自身抗体并释放到外周血中，通过检测外周血中针对TAAs的自身抗体可以区分正常人和癌症患者。即使TAA水平很低，免疫系统仍能监测到该特异蛋白的存在，产生的大量抗体对抗原信号起到一定的放大作用，因此自身抗体与抗原类标志物相比，在癌症早期具有更高的敏感性；其次，产生的肿瘤相关自身抗体半衰期长，能稳定存在于血清中相当长的一段时间，易于临床检测。TAAs相关自身抗体的这些特点，使其有望成为肺癌早期诊断的理想血清学标志物。因此，发现新的早期肺癌生物标志物作为非侵入性筛查试验以提高患者的存活率是至关重要的。转录中介因子1γ(Transcriptionalintermediaryfactor-1γ，TIF1γ)，是一种TGF-β/Smad通路的调控因子，具E3泛素蛋白连接酶活性。研究表明TIF1γ可通过抑制Smad4调节TGF-β信号通路的方式参与细胞增殖、分化与迁移侵袭的调控。近年来TIF1γ与肿瘤的相关性引起关注。JainS等的研究表明TIF1γ在肠癌组织具异常高表达，表现为相比正常的肠粘膜组织，在Ⅰ和Ⅱ期肠癌组织TIF1γ蛋白的表达明显上调，且与患者的病程进展相关[JainS,SinghalS,FrancisF,etal.AssociationofoverexpressionofTIF1gammawithcolorectalcarcinogenesisandadvancedcolorectaladenocarcinoma.WorldJGastroenterol.2011；17(35):3994-4000.]。TIF1γ的异常高表达也见于乳腺癌，KassemL等通过对248例乳腺癌组织的免疫组化检测，发现核TIF1γ、细胞质TGF-β1的阳性染色率高达35.9％、30.4％，且TIF1γ、TGFβ1的高表达与患者的远端转移、复发等不良预后密切相关[KassemL,DeygasM,FattetL,etal.GIF1gammainterfereswithTGFbeta1/SMAD4signalingtopromotepooroutcomeinoperablebreastcancerpatients.BMCCancer.2015；15:453.]。以上研究表明TIF1γ的异常高表达可能参与了肠癌、乳腺癌的发生发展进程，但文献报道TIF1γ在单核细胞、胰腺癌的表达明显下调[AucagneR,DroinN,PaggettiJ,etal.Transcriptionintermediaryfactor1gammaisatumorsuppressorinmouseandhumanchronicmyelomonocyticleukemia.JClinInvest.2011；121(6):2361-2370.]、[VincentDF,GoutJ,ChuvinN,etal.GIF1gammasuppressesmurinepancreatictumoraltransformationbyaSmad4-independentpathway.AmJPathol.2012；180(6):2214-2221.]，提示TIF1γ参与不同肿瘤发生发展进程的作用方式可能不同，表现具复杂性。另外，WangL等采用Real-timePCR检测13例非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织与配对癌旁组织中TIF1γmRNA的表达，结果显示TIF1γ在癌组织中表达减弱[WangL,LeiZ,LiuX,LiuR,ZhangH.[AssociationofmutationandmethylationinthepromoterregionofTIF1gammawithnon-smallcelllungcancer].ZhongguoFeiAiZaZhi.2013；16(5):227-232.]。
技术实现思路
本专利技术人通过对60例肺癌早期患者癌组织及配对癌旁组织的免疫组化检测，结果显示TIF1γ在癌组织的阳性表达率83.33％(50/60)，明显高于配对癌旁组织25.00％(15/60)(P<0.01)，提示在肺癌早期患者血清可能存在高水平的针对TIF1γ的自身抗体，从而在蛋白质层面证明了TIF1γ在肺癌患者的癌组织存在异常高表达，克服了现有技术的偏见。鉴于TIF1γ蛋白在肺癌早期患者癌组织的异常高表达，专利技术人推测TIF1γ可刺激机体产生针对TIF1γ的自身抗体。进一步地，专利技术人想到相同抗原会激发机体产生不同Ig类型的自身抗体，为此我们构建了针对四种Ig型抗TIF1γ抗体的ELISA法，检测结果显示，肺癌早期患者组血本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.血清抗TIF1γ-IgA自身抗体与抗TIF1γ-IgG自身抗体作为联合诊断标志物在制备诊断肺癌的试剂盒中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.血清抗TIF1γ-IgA自身抗体与抗TIF1γ-IgG自身抗体作为联合诊断标志物在制备诊断肺癌的试剂盒中的应用。


2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄毅，余丽丽，吴庆伟，林晓青，章良铭，张松高，
申请(专利权)人：福建省立医院，
类型：发明
国别省市：福建;35