预测对环磷酰胺疗法的反应者制造技术

本公开基于检测T效应细胞上CC趋化因子受体4(CCR4)的表达，以对受试者进行诊断或预防性预测，特别是那些对低剂量环磷酰胺治疗有反应的妇科癌症受试者。

Predicting responders to cyclophosphamide therapy

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】预测对环磷酰胺疗法的反应者本文引用或参考的所有文件、以及本文引用的文件引用或参考的所有文件、以及本文提及的任何产品或通过引用并入本文的任何文件的任何制造商说明书、说明、产品说明书和产品清单，均通过引用整体并入本文。本申请要求2017年5月19日提交的澳大利亚申请号AU2017901908的优先权。该申请的全部内容通过引用并入本文。
本公开基于检测T效应细胞上CC趋化因子受体4(CCR4)的表达以诊断性或预防性预测受试者，特别是对低剂量环磷酰胺治疗反应的那些妇科癌症受试者。
技术介绍
妇科癌症是女性生殖道的癌症，包括宫颈癌、阴道癌、外阴癌、子宫癌和卵巢癌。在全球范围内，这些癌症占女性所有癌症发病率的15％以上，每年诊断的超过100万例(BrayF等人，(2013)1；132(5):1133-45)。年死亡率接近50万，占报道的女性所有癌症相关死亡的14％。子宫癌、宫颈癌和卵巢癌是最常见的妇科癌症，而阴道癌和外阴癌很少见，占女性每年癌症发病率的不到0.6％。澳大利亚的流行模式与由发展中国家宫颈癌的高流行所驱动的全球趋势不同。平均每天有12名澳大利亚女性被诊断出患有妇科癌症，每年的总发病率超过4500例，占报道的所有女性癌症病例的近10％(2012年国家妇科癌症报告，AustraliaC编辑，SurryHills，NSW2012)。子宫癌和卵巢癌是澳大利亚最关注的公共健康问题，因为子宫癌最普遍，占妇科癌症病例的44％。卵巢癌占病例的28％，其占妇科癌症死亡人数的一半以上。由妇科癌症引起的过早死亡对经济产生负面影响。妇科癌症占女性癌症造成的所有疾病负担的8％以上，2012年，伤残调整生命年(DALY)超过22000。在2004-2005财政年度内，妇科癌症住院花费了国家6300万澳元，其中大部分钱用于卵巢癌(2500万澳元)、子宫癌(2200万澳元)和宫颈癌(1100万澳元)。大多数卵巢癌和子宫癌是由于偶发的体细胞突变而引起的，而5％的卵巢癌和10％的子宫癌具有遗传基础(WhangJD等人，(1997)Oct；12(5):383-9)。尚不清楚特异性遗传突变在肿瘤发生中的作用，但是在肿瘤抑制基因和致癌基因中存在几种遗传异常，通常与疾病的发作有关。引起偶发的卵巢癌的最常见体细胞突变是p53基因。在子宫癌中也经常见到p53突变。卵巢癌(OC)是女性癌症死亡的第五大常见原因。目前这些女性中有一半以上在诊断后五年内死亡(LuveroD等人，(2014)TherapeuticAdvancesinMedicalOncology6:229-239)。卵巢癌有几种形式，包括上皮癌、卵巢种系癌和卵巢基质癌。上皮性卵巢癌是该疾病的最常见形式。卵巢癌是一种主要影响绝经后女性的疾病，其诊断的年龄中位数为63岁。但是，这种疾病会影响所有年龄段的女性。卵巢癌分期的分类基于局限性(localisation)程度以及疾病超出卵巢的扩散程度。1期卵巢癌限于一个或两个卵巢。2期疾病涉及伴有骨盆延伸的一个或两个卵巢中的肿瘤。3期疾病涉及一个或两个卵巢中的肿瘤，并在显微镜下证实了骨盆外的腹膜转移和/或区域淋巴结转移。4期卵巢癌的特征在于是超出腹膜腔的远处转移。卵巢癌倾向于在晚期被诊断，这是由于原发灶的地形位置所致。仅当肿瘤发展到足以引起身体不适时，症状才会显现。即使这样，症状(包括腹痛或骨盆痛、尿频和呕吐)仍然模糊不清，并且经常被误认为是其他疾病，如胃炎、肠易激综合症或泌尿系统感染。相比之下，子宫癌由于在就诊患者中经常见到的异常阴道出血而被早期诊断。出现后，可通过组织活检的组织学分析诊断患者，并根据扩散程度和器官受累程度对疾病进行分期。卵巢癌通过从卵巢上皮局部脱落进入腹膜腔、然后植入腹膜并局部侵袭肠和膀胱而扩散。在诊断的卵巢癌的所有分期，卵巢癌中存在的淋巴结受累明显。卵巢癌患者的生存率与该疾病诊断时的分期有关，晚期疾病的5年生存率降低。通常以明显的临床症状表现检测卵巢癌，最明显的表现是腹痛、附件包块、腹胀和尿急。在早期(即1期)检测出卵巢癌使得使用标准手术和化疗的治愈率约为90％。当前的早期检测卵巢癌的筛选方法还不够。当前的卵巢癌筛查实践采用CA125和经阴道超声检查(超声检查)的使用。血清CA125水平升高与卵巢癌相关，随后利用经阴道超声有助于检测卵巢癌的存在。卵巢疾病的确诊基于侵入性程序，如剖腹手术。然而，由于有限的敏感性、有限的特异性和不良的阳性预测值<3％的问题，使用CA125对于一般人群的筛选无效(Bast(2003)J.ClinOncol.21(10Suppl):200-205)。妇科癌症(如卵巢癌)的一线治疗包括减瘤手术，以去除所有肉眼可见的疾病，使残留疾病小于2cm。根据疾病的扩散情况，手术可包括腹腔镜或全子宫切除术、双侧输卵管卵巢切除术和淋巴结切除术。根据疾病的分期，手术后还可以建议对子宫癌患者进行卡铂和表柔比星辅助放疗或化疗，对卵巢癌进行卡铂和紫杉醇辅助放疗或化疗。在某些情况下，由于存在医学合并症或由于疾病的扩散程度，患者不适合手术。这些患者接受子宫癌的原发放疗或卵巢癌的化疗。尽管妇科癌症的初次治疗相对成功，但经常发生疾病复发。复发性疾病的二线治疗包括放疗、激素疗法或化疗。用于子宫癌和卵巢癌的标准化疗分别包括基于铂的顺铂和卡铂，反应率徘徊在20％左右(Fung-Kee-FungM等人，(2007)CurrentoncologyOct；14(5):195-208)。疾病复发的患者的后续治疗选择基于疾病分类。如果疾病复发发生在基于铂的治疗的最后一个周期后不到6个月，则该疾病被认为对铂有抗药性，而铂敏感疾病则在治疗后6个月以上复发。对于铂抗性疾病的治疗，使用的可选化疗策略包括用紫杉烷(多西紫杉醇和紫杉醇)、蒽环类药物(多柔比星和多柔比星脂质体)、草氮磷类药物(环磷酰胺和异环磷酰胺)、吉西他滨、依托泊苷和拓扑替康治疗，每种药物具有相对可比的反应率，介于12％至30％之间(HandoliasD等人，(2013)Asia-Pacificjournalofclinicaloncology2013年5月29日)。有两种类型的标准可用于评估患者对治疗的反应：实体肿瘤的反应评估标准(RECIST)或妇科癌症组间(GCIG)CA125反应标准。RECIST标准使用计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)来测量靶标肿瘤的最大直径或新病变的任何全新(de-novo)出现，GCIC则测量CA125的血清水平。组合使用这两个标准，可以将患者的反应分类为完全反应(CR)、部分反应(PR)、稳定疾病(SD)和进展性疾病(PD)(RustinGJ等人，(2011)InternationaljournalofgynaecologicalcancersocietyFeb；21(2):419-23)。低剂量环磷酰胺通常用于治疗晚期和/或复发性癌症，如复发性卵巢癌(Handolias等人(2013)AsiaPacJClinOncol12(1):e154–e160)。然而，低剂量环本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鉴定对环磷酰胺或其类似物或衍生物治疗产生临床反应的癌症受试者的方法，所述方法包括检测施用至少一个剂量或周期的环磷酰胺或其类似物或衍生物后受试者的Teff细胞上CCR4的表达，其中Teff细胞上CCR4表达的上调指示所述受试者将对治疗产生临床反应。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170519 AU 20179019081.一种鉴定对环磷酰胺或其类似物或衍生物治疗产生临床反应的癌症受试者的方法，所述方法包括检测施用至少一个剂量或周期的环磷酰胺或其类似物或衍生物后受试者的Teff细胞上CCR4的表达，其中Teff细胞上CCR4表达的上调指示所述受试者将对治疗产生临床反应。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者患有妇科癌症。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中Teff细胞上而不是Tsupp细胞上CCR4表达的上调将受试者鉴定为将对环磷酰胺或其类似物或衍生物的治疗产生临床反应。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述Teff细胞是辅助T细胞和/或细胞毒性T细胞。


5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述Tsupp细胞是调节性T细胞(Treg)。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述检测包括：
(i)使从所述受试者获得的生物样品中的Teff细胞在体外与试剂接触，所述试剂结合Teff细胞表面上的CCR4；和
(ii)测量细胞上CCR4的表达水平，
其中Teff细胞上CCR4表达的上调指示所述受试者将对环磷酰胺或其类似物或衍生物的进一步体内治疗产生临床反应。


7.根据权利要求6所述的方法，其中所述方法还包括从所述生物样品中分离或纯化Teff细胞。


8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述方法包括比较根据步骤(ii)测量的CCR4的表达水平与来自用环磷酰胺治疗前的受试者的Teff细胞上的CCR4的表达水平。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括从所述受试者获得包含Teff细胞的生物样品。


10.一种预测先前未接受环磷酰胺的癌症受试者是否将对环磷酰胺或其类似物或衍生物治疗产生临床反应的方法，所述方法包括从所述受试者获得的生物样品中的Teff细胞在体外暴露于环磷酰胺或其类似物或衍生物后，检测Teff细胞上CCR4的表达，其中暴露后Teff细胞上CCR4表达的上调指示所述受试者将对治疗产生反应。


11.根据权利要求10所述的方法，其中所述受试者患有妇科癌症。


12.根据权利要求10或11所述的方法，其中Teff细胞上而不是Tsupp细胞上CCR4表达的上调将受试者鉴定为将对环磷酰胺或其类似物或衍生物的治疗产生临床反应。


13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述Teff细胞是辅助T细胞和/或细胞毒性T细胞。


14.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中所述Tsupp细胞是调节性T细胞(Treg)。


15.根据权利要求10至14中任一项所述的方法，其中检测表达包括：
(i)使所述生物样品在体外暴露于环磷酰胺或其类似物或衍生物；
(ii)使来自所述受试者的生物样品中的Teff细胞与试剂接触，所述试剂结合Teff细胞表面上的CCR4；和
(iii)测量细胞上CCR4的表达水平，
其中Teff细胞上CCR4表达的上调指示受试者将对环磷酰胺或其类似物或衍生物治疗产生临床反应。


16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中使所述细胞在体外暴露于马磷酰胺3天。


17.根据权利要求10至16中任一项所述的方法，其中所述方法包括比较根据步骤(iii)测量的CCR4的表达水平与来自预暴露于环磷酰胺或其类似物或衍生物的受试者的Teff细胞上的CCR4的表达水平。


18.根据权利要求10至16中任一项所述的方法，其中所述方法包括比较步骤(iii)中测量的CCR4表达的水平与来自对照受试者的Teff细胞上的CCR4表达的水平。


19.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括用低剂量环磷酰胺治疗所述受试者或由用低剂量环磷酰胺治疗所述受试者组成。


20.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·普尔班斯基，M·T·马达多，
申请(专利权)人：皇家墨尔本理工大学，
类型：发明
国别省市：澳大利亚;AU