一种耐酸己酸菌液的培养方法技术

本发明专利技术涉及酿酒技术领域，具体涉及一种耐酸己酸菌液的培养方法。白酒企业在窖泥养护的实际应用过程中发现，所培养己酸菌在窖泥pH值低于4.5的条件下进行窖泥养护，因窖泥的酸度太高，培养的己酸菌提高所产酒己酸乙酯的效果并不明显。该方法采用的培养基包含的各个组分及其重量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，(NH

A culture method of acid resistant caproic acid bacteria

【技术实现步骤摘要】
一种耐酸己酸菌液的培养方法
本专利技术涉及酿酒
，具体涉及一种耐酸己酸菌液的培养方法。
技术介绍
在浓香型大曲酒中，其主体香味物质己酸乙酯的窖内生化合成是由窖泥中的己酸菌代谢的己酸与糟醅体系中的乙醇缩合而成。因此，窖泥中己酸菌类芽孢杆菌的数量、质量与酒质的关系极大。在人工窖泥的培养及窖泥的养护中，人工培养窖泥功能菌起着重要的作用，其培养方式一般为己酸菌的培养。但是，白酒企业在窖泥养护的实际应用过程中发现，所培养己酸菌在窖泥pH值低于4.5的条件下进行窖泥养护，因窖泥的酸度太高，培养的己酸菌提高所产酒己酸乙酯的效果并不明显。本专利技术公开了一种耐酸己酸菌液的培养方法，该方法采用的培养基包含的各个组分及其重量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，（NH4）2SO4：0.01～0.03%，K2HPO4：0.01～0.03%，MgSO4：0.01～0.02%，酵母膏：0.1～0.2%，蛋白胨：0.1～0.2%，乙酸：0.04～0.06%，乳酸：0.02～0.03%，95%vol酒精：2～4%，pH：4.2～4.5。该方法制得的耐酸己酸菌用于pH值低于4.5的窖泥养护，可大大提高耐酸己酸菌的生存和代谢适应性，提高窖池的产己酸乙酯能力，从而有效提高基酒质量。
技术实现思路
本专利技术所要解决技术问题是：如何提供一种耐酸己酸菌液的培养方法。该方法解决了白酒企业在窖泥养护的实际应用中，所培养的己酸菌液与pH值低于4.5的窖泥酸性环境不匹配，从而大大降低窖泥养护效果的实际问题。为了达到上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案为：提供一种耐酸己酸菌液的培养方法，其特征在于：所述培养方法依次包括如下步骤：三角瓶培养→卡氏罐培养→不锈钢种子罐培养→不锈钢发酵罐培养三角瓶、卡氏罐、不锈钢种子罐、不锈钢发酵罐的接种量均为10％，三角瓶、卡氏罐、不锈钢种子、不锈钢发酵罐均用耐酸己酸菌培养基。所述耐酸己酸菌培养基包含的各个组分及其质量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，（NH4）2SO4：0.01～0.03%，K2HPO4：0.01～0.03%，MgSO4：0.01～0.02%，酵母膏：0.1～0.2%，蛋白胨：0.1～0.2%，乙酸：0.04～0.06%，乳酸：0.02～0.03%，95%vol酒精：2～4%，pH：4.2～4.5。三角瓶培养：A、在三角瓶中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；B、将三角瓶于0.1Mpa高压灭菌30min,冷至32℃，将保藏的耐酸己酸菌液以10％的接种量加入三角瓶中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天。卡氏罐培养：A、在卡氏罐中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；B、将卡氏罐于0.1Mpa高压灭菌30min,冷至32℃，将三角瓶耐酸己酸菌液以10％的接种量加入卡氏罐中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天。不锈钢种子罐培养：A、检查种子罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗种子罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；B、按照配方，在种子罐中加入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；C、打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态30分钟，盖好人孔盖，当种子罐内物料自然降温到60℃时，打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至32℃时关闭冷却水阀；D.将卡氏罐耐酸己酸菌液以10％的接种量加入种子罐中，再加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，搅拌均匀后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖。保持温度在30～32℃范围内，培养7天。不锈钢发酵罐培养：A、检查发酵罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗发酵罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；B、按照配方，在发酵罐中加入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；C、打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态30分钟，盖好人孔盖，当发酵罐内物料自然降温到60℃时，打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至32℃时关闭冷却水阀；D.将种子罐耐酸己酸菌液以10％的接种量加入不锈钢发酵罐中，再加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，搅拌均匀后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖。保持温度在30～32℃范围内，培养7天。发酵期满，检测所制得的耐酸己酸菌的各指标如下：外观：浅黄色；气味：具有己酸气味；pH：4.0～4.5；耐酸己酸菌：≥1.0×108个/ml；综上所述，本专利技术所提供的己酸菌液的培养方法尅解决一下问题：（1）解决了目前己酸菌培养及应用与窖泥环境脱离和不匹配的问题；（2）解决了目前己酸菌的人工培养及应用中缸式培养中操作繁琐、质量有限且不稳定的问题；（3）解决了目前己酸菌使用效果欠佳的问题。具体实施方式本专利技术所提供的耐酸己酸菌液的培养方法依次包括如下步骤：三角瓶培养：在三角瓶中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；将三角瓶于0.1Mpa高压灭菌30min，冷至32℃，将保藏的耐酸己酸菌液以10％的接种量加入三角瓶中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天。所述耐酸己酸菌种为：四川省绵阳市丰谷酒业有限责任公司从丰谷天佑烧坊300多年老窖池中筛选的一株具有耐酸功能的己酸菌。所述耐酸己酸菌培养基包含的各个组分及其质量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，(NH4)2SO4：0.01～0.03%，K2HPO4：0.01～0.03%，MgSO4：0.01～0.02%，酵母膏：0.1～0.2%，蛋白胨：0.1～0.2%，乙酸：0.04～0.06%，乳酸：0.02～0.03%，95%vol酒精：2～4%，pH：4.2～4.5。卡氏罐培养：在卡氏罐中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；将卡氏罐于0.1Mpa高压灭菌30min,冷至32℃，将三角瓶耐酸己酸菌液以10％的接种量加入卡氏罐中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天。不锈钢种子罐培养：检查种子罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗种子罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照配方，在种子罐中加入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态30分钟，盖好人孔盖，当种子罐内物料自然降温到60℃时，打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至32℃时关闭冷却水阀；将卡氏罐耐酸己酸菌液以10％的接种量加入种子罐中，再加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，搅拌均匀后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖。保持温度在30～32℃范围内，培养7天。不锈钢发酵罐培养：检查发酵本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐酸己酸菌培养基，其特征在于：所述培养基包含的各个组分及质量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，(NH4)2SO4：0.01～0.03%，K2HPO4：0.01～0.03%，MgSO4：0.01～0.02%，酵母膏：0.1～0.2%，蛋白胨：0.1～0.2%，乙酸：0.04～0.06%，乳酸：0.02～0.03%，95%vol酒精：2～4%,pH：4.2～4.5。/n

【技术特征摘要】
1.一种耐酸己酸菌培养基，其特征在于：所述培养基包含的各个组分及质量百分比为：NaAC：0.1～0.2%，(NH4)2SO4：0.01～0.03%，K2HPO4：0.01～0.03%，MgSO4：0.01～0.02%，酵母膏：0.1～0.2%，蛋白胨：0.1～0.2%，乙酸：0.04～0.06%，乳酸：0.02～0.03%，95%vol酒精：2～4%,pH：4.2～4.5。


2.一种耐酸己酸菌液培养方法，其特征在于：所述培养方法包括如下步骤：
A、三角瓶培养：在三角瓶中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；将三角瓶于0.1Mpa高压灭菌30min,冷至32℃，将保藏的耐酸己酸菌液以10％的接种量加入三角瓶中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天；
B、卡氏罐培养：在卡氏罐中装入除95%vol酒精、乙酸、乳酸外的耐酸己酸菌培养基；将卡氏罐于0.1Mpa高压灭菌30min,冷至32℃，将三角瓶耐酸己酸菌液以10％的接种量加入卡氏罐中，按配方要求加入95%vol酒精、乙酸、乳酸，密封，30～32℃培养7天；
C、锈钢种子罐培养：检查种子罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗种子罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照配方，在种子罐中加...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢中明，杜礼泉，谢菲，郑敏，范昌明，王文超，张媛，蒲浩，陈源，王素娟，唐聪，
申请(专利权)人：四川省绵阳市丰谷酒业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：四川;51