【技术实现步骤摘要】
感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞的体外培养方法
本专利技术属于生物医学专业领域，具体涉及一种感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞的体外培养方法。
技术介绍
周围神经损伤的修复一直是临床治疗的一个难题，虽然随着显微外科学的发展，在神经缺损的桥接吻合方面取得了一定的进展，但神经功能恢复的效果仍不理想，其原因主要由于再生的神经未能准确地、选择性地再支配靶组织器官（感觉神经末梢和运动终板），即错向生长：如感觉神经轴突错向长入运动支的神经内膜管，运动神经轴突错向长入感觉支的神经内膜管。因此，充分理解周围神经特异性再生的细胞和分子生物学基础，在临床治疗中加以运用以促进周围神经功能更好的恢复具有非常重要的意义。周围神经主要由神经元的轴突、包绕在轴突上的施万细胞（SCs）和成纤维细胞（Fbs）组成。在神经损伤再生过程中，再生轴突沿着特定的通路延伸，而神经突起特异性引导延伸的现象是由于神经元、施万细胞和成纤维细胞之间复杂而精确的相互作用。成纤维细胞是组成神经内膜、神经外膜和神经束膜的主要成份，施万细胞仅在神经内膜中表达。体外培...
【技术保护点】
1.一种感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞的体外培养方法，其特征在于，包括如下步骤：/n（1）利用解剖学结构获取感觉神经和运动神经，将其消化培养后获得混合生长的感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞；/n（2）差速消化法结合差速贴壁法分离出感觉与运动施万细胞并收集；/n（3）差速消化法结合差速贴壁法分离出感觉与运动成纤维细胞并收集。/n
【技术特征摘要】
1.一种感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞的体外培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）利用解剖学结构获取感觉神经和运动神经，将其消化培养后获得混合生长的感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞；
（2）差速消化法结合差速贴壁法分离出感觉与运动施万细胞并收集；
（3）差速消化法结合差速贴壁法分离出感觉与运动成纤维细胞并收集。
2.根据权利要求1所述的感觉/运动神经施万细胞和成纤维细胞的体外培养方法，其特征在于，步骤（2）的具体步骤为：在培养皿中加入0.25%胰酶停留10s后迅速加入完全培养基终止消化，施万细胞变圆，轻轻吹打细胞，施万细胞脱落，而成纤维细胞仍然紧贴皿底，收集施万细胞接种至新的培养皿培养30min，此时施万细胞中夹杂的少量成纤维细胞已经贴壁，通过差速贴壁法收集含未贴壁施万细胞的上清接种在多聚赖氨酸预包被的培养皿中培养，培养2天后重复步骤（2）一遍，培养2-3天至细胞铺满皿底，胰酶消化后收集施万细胞用于后续研究。
3.根据权利要求1所述的感觉/运动神经施万细...
【专利技术属性】
技术研发人员：贺倩茹，沈宓，张琦，季煜华，
申请(专利权)人：南通大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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