一种基于生物力学作用高效促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法技术

本公开涉及一种基于生物力学作用高效促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法，该方法包括以下步骤：在髓核原代细胞培养的过程中，对细胞进行力学加载。周期性机械应力在保持髓核原代细胞原有特性的基础上，能够促进髓核细胞增殖，分泌细胞外基质的生物学功能更强，显著提高组织工程髓核细胞的活性和生长状态。

An efficient method to promote the proliferation and secretion of extracellular matrix of primary cells of nucleus pulposus based on Biomechanics

【技术实现步骤摘要】
一种基于生物力学作用高效促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法
本公开涉及一种基于生物力学作用高效促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本公开的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。腰痛是骨科最常见的疾病，它不但给病人造成精神上的痛苦，而且还会造成巨大的经济负担，但目前临床上还缺乏有效的治疗方式。研究报道大约40％病人的腰痛是由于椎间盘退变引起的，而髓核组织中存在最明显的改变。最新研究发现，组织工程学方法有望用于针对椎间盘退行性变的临床治疗，椎间盘组织工程学日益成为研究热点，目前髓核细胞移入椎间盘是一种有效治疗椎间盘退变的方法，因此大量髓核细胞作为种子细胞是科研及临床的必要条件。但现阶段多使用脊柱侧凸矫形术中切除的椎间盘，来源有限。腰椎间盘突出症患者虽较为常见，但患者年龄偏大，椎间盘内髓核组织存在老化及髓核细胞数量较少，体外培养困难。髓核原代细胞在体外培养一般经过3-4次传代扩增后，细胞形态逐渐改本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：/n在髓核原代细胞培养的过程中，对细胞进行力学加载。/n

【技术特征摘要】
1.一种促进髓核原代细胞增殖和分泌细胞外基质的方法，其特征是，该方法包括以下步骤：
在髓核原代细胞培养的过程中，对细胞进行力学加载。


2.如权利要求1所述的方法，其特征是，所述力学加载条件为：拉伸幅度5～10％，0.1～0.3Hz，8000～9000循环。


3.如权利要求1所述的方法，其特征是，该方法具体包括以下步骤：
(1)将从髓核组织得到的髓核原代细胞培养至长满培养瓶后，做传代处理，取第二代髓核细胞；
(2)将消化后的第二代髓核细胞加入载体板的孔中进行预培养，培养液为含有胎牛血清(FBS)的DMEM培养液，培养18～36h；
(3)预培养结束后，更换孔中DMEM培养液，其中，DMEM培养液中的FBS含量比步骤(2)中的DMEM培养液低；
(4)对载体板孔中的细胞进行力学加载，力学加载条件为：拉伸幅度5～10％，0.1～0.3Hz，8000～9000循环；培养18～36h。


4.如权利要求3所述的方法，其特征是，步骤(2)中，所述消化后的第二代髓核细胞是通过以下方法制备得到的：
将第二代髓核细胞用胰蛋白酶消化，消化结束后，离心去上清；加入含FBS的DMEM培养液重悬髓核细胞沉淀，直到看不到组织团块为止，形成细胞悬液，即得到步骤(2)中所述的消化后的第二代髓核细胞。


5.如权利要求3所述的方法，其特征是，步骤(2)中，所述载体板为力学加载的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丹丹，曹盛楠，师浩钧，刘凡杰，李华忠，陈元振，王磊磊，王涛，任鹏程，孟岩，周军，
申请(专利权)人：王丹丹，
类型：发明
国别省市：山东;37