一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法技术

本发明专利技术公开了一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法。先将水浴锅温度设为实验温度，启动水浴锅加热，当水浴温度达到最终实验温度时，将装有需要热刺激培养细胞的细胞培养板/瓶和作为空白对照的细胞培养板/瓶分别放置于2个底架的槽位上，细胞培养板/瓶下部没于水中，上部开口露于水面以上，以红外温度监测系统监测空白对照细胞培养板/瓶内表面温度，先进行达温时间的加热，然后进行实验所需时间的加热刺激，完成后迅速取出含培养细胞的细胞培养板/瓶，如此完成精确而瞬时的培养细胞的热刺激实验。本发明专利技术能很好实现对培养细胞进行精确瞬时的热刺激处理，能很好满足诸如准确观察热刺激对细胞行为和功能的影响等实验需求。

A method of intracellular thermal stimulation of cultured cells

【技术实现步骤摘要】
一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法
：本专利技术属于生物
，具体涉及一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法。
技术介绍
：在细胞生物学研究工作中，常需要进行细胞培养。常规的细胞培养条件是：将细胞培养皿或培养瓶置于培养箱内，在37℃,5％CO2环境中培养。一般情况下，培养箱的温度恒定于37℃。如实验过程中，为达到特定的实验目的(如观察热刺激对细胞行为的影响，研究热敏感型离子通道或受体在受热后对细胞功能的影响等)，需对培养细胞进行热刺激处理。对此，现有的常规培养箱无法满足实验要求(尤其是需要瞬时或短时的精确的热刺激实验)。虽然目前已出现可调温的培养箱，但此培养箱升温或降温速度缓慢，不能满足对培养细胞进行瞬时而精确的热刺激的需要。
技术实现思路
：本专利技术旨在解决细胞生物学实验研究过程中对培养细胞进行短时而精确的热刺激的难题，提供一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法，它可满足对培养细胞进行热刺激处理(如观察热刺激对细胞行为的影响，研究热敏感型离子通道或受体在受热后对细胞功能的影响等)，尤其能很好满足对贴壁培养细胞进行瞬时而精确的热刺激处理的实验需要，从而实现精确观察热刺激对细胞行为的影响，达到研究热敏感型离子通道或受体在受热后对细胞功能的影响等目的。本专利技术的细胞间内对培养细胞热刺激的方法，其特征在于，包括以下步骤：热刺激装置，包括水浴锅、红外温度监测系统、细胞培养板/瓶、底架、固定支架和秒表，所述的红外温度监测系统的红外探头固定于固定支架上，在水浴锅中至少有2个底架，并列水平放置，在底架上设有放置细胞培养板/瓶的槽位；a、预实验：在水浴锅中装入纯净灭菌水，在其中的1个底架的槽位上放置空白的细胞培养板/瓶，细胞培养板/瓶的下部没于水中，距离水面4mm，上部开口露于水面以上，所述的红外探头以45度角，在距离5-6厘米外对准以培养基湿润过的、空白的细胞培养板/瓶的内壁，设定水浴温度至少高于所需刺激温度的10-12℃，然后水浴锅通电，加热其内部的水，同时红外温度监测系统监测细胞培养板/瓶内壁的温度变化，当内壁温度在10秒钟内能升至所需刺激温度时停止，设定该水浴温度为初步实验温度，然后重复测定至少三次，取平均值，为最终实验温度；b、正式实验：开启水浴锅，先将水浴锅温度设置为步骤a得出的最终实验温度，然后启动水浴锅加热其中的水，当水浴温度达到最终实验温度值的时候，将装有需要热刺激培养细胞的、去掉了培养基的细胞培养板/瓶和以培养基湿润过的、作为空白对照的细胞培养板/瓶分别放置于2个底架的槽位上，细胞培养板/瓶的下部均没入水中，距离水面4mm，上部均开口露于水面以上，通过红外温度监测系统以45度角，在距离5-6厘米外监测以培养基湿润过的、空白对照细胞培养板/瓶内表面温度，先进行达温时间的加热，然后启动秒表，进行实验所需时间的加热刺激，完成后迅速加盖，取出含培养细胞的细胞培养板/瓶，如此完成精确而瞬时的培养细胞的热刺激实验。所述的底架优选为聚氯乙烯底架，其为长方体形，在顶部开口处设有与细胞培养板/瓶相适应的形状槽位，使细胞培养板/瓶卡入聚氯乙烯底架中，从而固定细胞培养板/瓶。所述的水浴锅优选为温度分辨率为±0.1℃的精密水浴锅。所述的红外温度监测系统优选为响应时间为±100ms，温度分辨率为0.1℃的红外温度监测系统，红外温度监测系统是现有技术中已知的仪器，如华洪牌IC-LI在线式红外温度监测系统。目前细胞间的细胞培养箱和已有的相关设备无法满足细胞生物学实验研究过程中对培养细胞进行短时(1分钟内)而精确的热刺激的需求(现有的最灵敏的可调温培养箱，其升高1℃的温度至少需要3分钟的时间)。本专利技术可以很好解决此难题，能很好实现对培养细胞进行精确瞬时的热刺激处理(响应时间为±100ms，温度分辨率为0.1℃)，能很好满足诸如准确观察热刺激对细胞行为的影响，研究热敏感型离子通道或受体在受热后对细胞功能的影响等实验需求，从而提高了相关科研实验的精确性、可靠性和可重复性，提高科研工作质量。附图说明：图1是本专利技术的热刺激装置的结构示意图；其中1、信号线；2、固定夹；3、固定支架；4、红外探头；5、水浴锅；6、底架；7、细胞培养板；8、红外温度监测系统；9、电源；图2是细胞培养板；其中10、空白对照的细胞培养板；11、含培养细胞的细胞培养板；12、空白对照培养孔；13、含培养细胞的培养孔；14、探温红外线。具体实施方式：以下实施例是对本专利技术的进一步说明，而不是对本专利技术的限制。实施例1：如图1和图2所示，热刺激装置，包括水浴锅5、红外温度监测系统8、细胞培养板7、底架6和固定支架7，所述的红外温度监测系统的红外探头4(红外探头通过信号线1与红外温度监测系统的主机相连)通过固定夹2固定于固定支架3上，在水浴锅5中至少只有2个底架6，在底架上设有放置细胞培养板/瓶的槽位；a、预实验：在水浴锅5中装入灭菌纯净水，以液面没过底架6上表面0.4cm为限，此时液面离水浴锅上缘2-3cm，在其中的1个底架的槽位上安装细胞培养板7，细胞培养板的下部没于水中，上部开口露于水面以上，保证细胞培养板底部完整水平侵入水里，所述的红外探头4以45度角，在距离5-6厘米外，对准以培养基湿润过的、空白细胞培养板的内壁，设定水浴温度至高于所需刺激温度的10-12℃(例如实验所需刺激温度为52℃，则水浴温度可设置为64℃，如此可在实验时，加快热传导通过细胞培养板的底面，从而加快达到对实验细胞进行有效热刺激的进程)，水浴锅加热其内部的水，红外温度监测系统(接上电源9)监测以培养基湿润过的空白细胞培养板/瓶内壁的温度变化，当内壁温度在10秒钟内能升至所需刺激温度时停止，设定该水浴温度为初步实验温度，然后重复测定三次，取平均值，为最终实验温度；b、正式实验：先将水浴锅温度设置为步骤a得出的最终实验温度，启动水浴锅加热其中的水，在水浴锅升温的同时，可在超净工作台对空白对照培养板10进行湿润(即加培养基后，立即吸走)及吸走需进行需要热刺激培养细胞的细胞培养板11内的培养液，当水浴温度达到最终实验温度值的时候，将装有需要热刺激培养细胞的细胞培养板11和作为空白对照的细胞培养板10分别放置于2个底架的槽位上，装有需要热刺激培养细胞的细胞培养板中含有贴壁细胞的培养孔13，而空白对照的细胞培养板10含由空白对照培养孔12，细胞培养板的下部没于水中4毫米，上部均开口露于水面以上，以红外温度监测仪监测以培养基湿润过的、空白对照培养板内壁表面温度，红外探头以45度角在距离细胞培养板内壁表面5-6cm处，探温红外线14照射细胞培养板内壁表面，按下秒表计时，先进行达温时间的加热(10秒钟左右)，然后进行实验所需时间的加热刺激，完成后迅速加盖，取出含培养细胞的细胞培养板，放回常规培养箱内，如此完成精确而瞬时的培养细胞的热刺激实验。所述的底架为聚氯乙烯底架，其为长方体形，在顶部开口处设有与细胞培养板相适应的形状槽位，使细胞培养板卡入聚氯乙烯底架中，从而固定细胞培本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n热刺激装置，包括水浴锅、红外温度监测系统、细胞培养板/瓶、底架、固定支架和秒表，所述的红外温度监测系统的红外探头固定于固定支架上，在水浴锅中至少有2个底架，并列水平放置，在底架上设有放置细胞培养板/瓶的槽位；/na、预实验：在水浴锅中装入纯净灭菌水，在其中的1个底架的槽位上放置空白的细胞培养板/瓶，细胞培养板/瓶的下部没于水中，距离水面4mm，上部开口露于水面以上，所述的红外探头以45度角，在距离5-6厘米外对准以培养基湿润过的、空白的细胞培养板/瓶的内壁，设定水浴温度至少高于所需刺激温度的10-12℃，然后水浴锅通电，加热其内部的水，同时以红外温度监测系统监测细胞培养板/瓶内壁的温度变化，当内壁温度在10秒钟内能升至所需刺激温度时停止，设定该水浴温度为初步实验温度，然后重复测定至少三次，取平均值，为最终实验温度；/nb、正式实验：开启水浴锅，先将水浴锅温度设置为步骤a得出的最终实验温度，然后启动水浴锅加热其中的水，当水浴温度达到最终实验温度值的时候，将装有需要热刺激培养细胞的、去掉了培养基的细胞培养板/瓶和以培养基湿润过的、作为空白对照的细胞培养板/瓶分别放置于2个底架的槽位上，细胞培养板/瓶的下部均没入水中，距离水面4mm，上部均开口露于水面以上，通过红外温度监测系统以45度角，在距离5-6厘米外监测以培养基湿润过的、空白对照细胞培养板/瓶内表面温度，先进行达温时间的加热，然后启动秒表，进行实验所需时间的加热刺激，完成后迅速加盖，取出含培养细胞的细胞培养板/瓶，如此完成精确而瞬时的培养细胞的热刺激实验。/n...

【技术特征摘要】
1.一种细胞间内对培养细胞热刺激的方法，其特征在于，包括以下步骤：
热刺激装置，包括水浴锅、红外温度监测系统、细胞培养板/瓶、底架、固定支架和秒表，所述的红外温度监测系统的红外探头固定于固定支架上，在水浴锅中至少有2个底架，并列水平放置，在底架上设有放置细胞培养板/瓶的槽位；
a、预实验：在水浴锅中装入纯净灭菌水，在其中的1个底架的槽位上放置空白的细胞培养板/瓶，细胞培养板/瓶的下部没于水中，距离水面4mm，上部开口露于水面以上，所述的红外探头以45度角，在距离5-6厘米外对准以培养基湿润过的、空白的细胞培养板/瓶的内壁，设定水浴温度至少高于所需刺激温度的10-12℃，然后水浴锅通电，加热其内部的水，同时以红外温度监测系统监测细胞培养板/瓶内壁的温度变化，当内壁温度在10秒钟内能升至所需刺激温度时停止，设定该水浴温度为初步实验温度，然后重复测定至少三次，取平均值，为最终实验温度；
b、正式实验：开启水浴锅，先将水浴锅温度设置为步骤a得出的最终实验温度，然后启动水浴锅加热其中的水，当水浴温度达到最终实验温度值的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李志远，黄荣奇，田超，汤凤，刘雨杰，徐浚杰，
申请(专利权)人：广州浚远康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44