本发明专利技术公开了一种细胞培养装置，包括上下设置的皿盖和皿体，皿盖和皿体之间还设有衔接套筒，衔接套筒的外壁外套有固定圆盘，皿盖的顶盖内壁固接有支撑片，皿体内部形成放置腔a，放置腔a内设有滤过膜，衔接套筒的内部形成放置腔b，皿盖、衔接套筒、皿体和固定圆盘均为透明聚苯乙烯材料制成。本发明专利技术还具体公开了上述细胞培养装置的培养基富氢的方法，该富氢培养基既可满足上述科研人员对于富氢培养基的研究需求，又因其制备装置工艺简单，成本低，使用无毒无害而可广泛推广。
A cell culture device and the method of enriching hydrogen in cell culture medium
【技术实现步骤摘要】
一种细胞培养装置及使细胞培养基富氢的方法
本专利技术属于细胞培养领域，具体涉及一种细胞培养装置，还涉及使细胞培养基富氢的方法。
技术介绍
体外细胞培养实验中，经常要用到如RPMI-1640Medium、MinimumEssentialMedium(MEM)、DMEM-高糖(标准型)、DMEM-低糖(标准型)、等各种各样的细胞培养基。但是在细胞的培养过程中细胞经过代谢不可避免会产生了多种氧自由基(ROS)，如：羟基自由基等，主要会造成体内脂质过氧化而破坏细胞，可以造成生物膜系统损伤以及细胞内氧化磷酸化障碍，也会和糖类、氨基酸、磷脂质、核酸、有机酸等任何生物体内的物质反应，特别是和DNA中的嘌呤、嘧啶作用，导致细胞死亡或突变。氢气(H2)作为一种新型的抗氧化剂近年来受到国内外医疗界的广泛关注，它可作为一种医用气体，氢气能特异性的抑制有害的ROS，维持代谢氧化还原反应和其他较弱的ROS，如过氧化氢和一氧化氮等，可以通过调节氧化应激、炎症、凋亡来发挥对细胞的保护作用。随着氢分子医学的发展，氢气以及富氢液的抗氧化、抗炎、抗凋亡等生物学作用已经被全球多个研究单位在动物的体内的到证实。但是具体的相关机制至今尚无明确的报道，需要大量的体外实验来探究和验证。研究发现，液体中的氢气的溶解含量必须大于一定的浓度才能够发挥有效的生物学作用。陆瑞婷等人研究发现富氢水对小鼠星形胶质细胞氧化应激造成过的损伤具有保护作用。RL,YL,xueWDJZwzbjjy.Protectiveeffectofhydrogen-richwateronoxidativestresscellmodelandtheimpactofthephosphatidylinositol3kinase/proteinkinaseBpathway中RyokoAsada，YasukazuSaitoh等人研究表明使用氢气含量达300ppb的富氢水水浴可以改善内脏脂肪和皮肤上的斑点；天津医科大学发表的论文：含氢培养液对脂多糖(LPS)致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用中韩焕芝等也研究表明氢气含量到达300ppb的含氢培养液对脂多糖(LPS)致人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用而且随着ppb含量的提高氢气对于细胞的保护作用也会加强。氢气分子因分子量较小而较活泼。市场上现有的商品化富氢液制备工艺目前有两种方法：一种是高压、低温的条件下向溶液中充氢气来提高氢气的溶解度；另外一种是电离水的方法。无论采用哪一种方法，制备出的富氢液，均需要在铝罐中才能保存。经过我们研究发现培养基通过电解会破坏培养基中原有的营养物质，所以富氢培养基不能够通过电解的方式进行制备。如果想要制备出富含氢气的培养基，只能够通过低温充氢气的方式进行制备，制备出的培养基在塑料制品的培养瓶中仅可以在极为短暂的时间内含有一定量的氢气，无法保证可挥发生物学效应的氢气含量，无法满足探究其相关机制的细胞培养要求。另外，目前获取氧气的方法大多是通过化学法和电解法制取。但化学法会产生可溶的物质可能会影响培养基成分，进而影响实验。我们实验发现电解法也不可行，通过电解细胞培养基不仅会使培养基中原有的营养物质被破坏而且不能产生氧气，所以无法得到高氧培养基。综上，由于部分疾病出现缺氧和高浓度自由基的表现，但对于这些疾病缺少研究方法，因此我们专利技术了一种新的细胞培养装置，通过本装置以及技术可以得到液体培养基和高氧富氢培养基，以完成各种细胞实验，最终为治疗这些疾病提供方案，以及为研究氧气和氢气的生物学活性提供基础。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种细胞培养装置，将氢化珊瑚钙和液体培养基进行结合，以达到使液体培养基进行富氢形成富氢培养基的目的，还可以使得高氧培养基进行富氢形成富氢培养基的目的。本专利技术的另一目的是提供一种使细胞培养基富氢的方法。本专利技术所采用的第一种技术方案是：一种细胞培养装置，包括上下设置的皿盖和皿体，皿盖和皿体之间设有衔接套筒，衔接套筒的外壁外套有固定圆盘，皿盖的顶盖内壁固接有支撑片，皿体的内部形成放置腔a，放置腔a内设有滤过膜，衔接套筒的内部形成放置腔b，皿盖、衔接套筒、皿体和固定圆盘均为透明聚苯乙烯材料制成。本专利技术所采用第一种技术方案的特点还在于，皿盖和皿体均为圆柱状，衔接套筒为环柱形。皿盖的内径大于衔接套筒的外径，皿盖的外径不大于固定圆盘的外径。支撑片位于衔接套筒的上边缘的正上方，支撑片到衔接套筒上边缘的距离小于皿盖下边缘到固定圆盘的距离。衔接套筒和皿体的连接处设有粘合剂。衔接套筒的底部外侧设有上螺纹，上螺纹位于固定圆盘的底部，皿体的内侧壁设有下螺纹，上螺纹与下螺纹相互匹配。滤过膜为圆形，滤过膜的直径大于放置腔a的内径。本专利技术所采用的第二种技术方案是：一种使培养基富氢的方法，具体按照以下步骤实施：将液体培养基放置在衔接套筒的放置腔b内，将放置腔a内加入氢化珊瑚钙，待液体培养基中水分子通过滤过膜与氢化珊瑚钙进行接触产生氢气并融入液体培养基中即得到富氢培养基。本专利技术所采用第二种技术方案的特点还在于，液体培养基还可以替换为高氧培养基，高氧培养基按照以下方法制备：将无菌培养基灌入塑料封口瓶中，将其与医用制氧机置于无菌操作间中进行充氧，即可得到高氧培养基。本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种富含氢气的培养基的制备方法以及相关的细胞培养装置，各实验室工作人员可以配合RPMI-1640Medium、MinimumEssentialMedium(MEM)、DMEM-高糖(标准型)、DMEM-低糖(标准型)等各种常规液体培养基来使用。该富氢培养基既可满足上述科研人员对于液体培养基和高氧富氢培养基的研究需求，又因其制备装置工艺简单，成本低，使用无毒无害而可广泛推广。本研究为相关科研工作者提供了一个可以进行体外研究的平台，将对氢分子医学领域的研究工作产生重大的影响和突破。附图说明图1为本专利技术一种细胞培养装置的结构示意图；图2为本专利技术一种细胞培养装置的俯视图；图3为本专利技术一种细胞培养装置衔接套筒的结构示意图；图4为本专利技术一种细胞培养装置皿体的结构示意图；图5为本专利技术一种细胞培养装置皿盖的结构示意图；图6为本专利技术不同浓度氢化珊瑚钙在水中释放氢气含量折线图；图7为本专利技术7.5g/L氢化珊瑚钙的培养基氢气含量折线图；图8为本专利技术富氢水的氢气含量折线图；图9为本专利技术氢化珊瑚钙7.5g/L在培养基中，在水中，以及富氢水氢气含量折线图；图10为本专利技术富氧培养基与其他高氧溶液的溶解氧含量对比图；图11为本专利技术富氧培养基在培养皿和培养瓶中氧含量图。图中：1.皿盖，2.衔接套筒，3.滤过膜，4.皿体，5.固定圆盘，6.上螺纹，7.支撑片，8.下螺纹，9.放置腔a，10.放置腔b。具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对本专利技术进行详细说明。如图1和图2所示，依次为本专利技术一种细胞培养装置的结构本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种细胞培养装置，其特征在于，包括上下设置的皿盖(1)和皿体(4)，所述皿盖(1)和皿体(4)之间设有衔接套筒(2)，所述衔接套筒(2)的外壁外套有固定圆盘(5)，皿盖(1)的顶盖内壁固接有支撑片(7)，皿体(4)的内部形成放置腔a(9)，放置腔a(9)内设有滤过膜(3)，衔接套筒(2)的内部形成放置腔b(10)，所述皿盖(1)、衔接套筒(2)、皿体(4)和固定圆盘(5)均为透明聚苯乙烯材料制成。/n
【技术特征摘要】
1.一种细胞培养装置，其特征在于，包括上下设置的皿盖(1)和皿体(4)，所述皿盖(1)和皿体(4)之间设有衔接套筒(2)，所述衔接套筒(2)的外壁外套有固定圆盘(5)，皿盖(1)的顶盖内壁固接有支撑片(7)，皿体(4)的内部形成放置腔a(9)，放置腔a(9)内设有滤过膜(3)，衔接套筒(2)的内部形成放置腔b(10)，所述皿盖(1)、衔接套筒(2)、皿体(4)和固定圆盘(5)均为透明聚苯乙烯材料制成。
2.根据权利要求1所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述皿盖(1)和皿体(4)均为圆柱状，衔接套筒(2)为环柱形。
3.根据权利要求2所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述皿盖(1)的内径大于衔接套筒(2)的外径，皿盖(1)的外径不大于固定圆盘(5)的外径。
4.根据权利要求2所述的一种细胞培养装置，其特征在于，所述支撑片(7)位于衔接套筒(2)上边缘的正上方，支撑片(7)到衔接套筒(2)上边缘的距离小于皿盖(1)下边缘到固定圆盘(5)的距离。
5.根据权利要求1所述的一种细胞培养装置，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：栾晶，侯外方，赵鑫，徐浩，张茂森，
申请(专利权)人：西安医学院，
类型：发明
国别省市：陕西;61
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