【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用裂解酶、切向流过滤和多模式色谱法的用于疫苗生产的多糖纯化相关申请的引用本申请要求2017年7月5日提交的美国临时申请号62/528,683的优先权，所述申请的全部内容通过引用并入本文。背景1.专利
本专利技术涉及用于有效纯化细菌多糖的方法和组合物。该方法是有效率的、成本上有效的和可规模化的，并且涉及去除杂质以制备包括缀合疫苗的疫苗。2.背景描述纯化的CPS(荚膜多糖)用于生产疫苗，特别是有效针对由细菌产生的感染的疫苗，CPS从所述细菌衍生。在常规方法中，在工业生物反应器中培养细菌，并将CPS纯化至预定或所需的纯度要求。用于疫苗生产的细菌CPS的传统纯化方法基于用溶剂（如乙醇和苯酚）以及阳离子去污剂的若干选择性沉淀步骤。流感嗜血杆菌(H.Influenzae)、脑膜炎奈瑟氏菌(N.meningitidis)、B族链球菌(GroupBStreptococcus)和肺炎链球菌(S.pneumonia)是婴儿和免疫缺陷成人中脑膜炎、肺炎和菌血症的最常见的媒介物中的一些。荚膜多糖(CPS)充当针...
【技术保护点】
1.纯化多糖的方法，其包括：/n提供革兰氏阳性和/或革兰氏阴性细菌的发酵收获物；/n用脱氧胆酸盐澄清所述发酵收获物；/n通过第一渗滤浓缩所述澄清的多糖；/n用酶处理所述经过第一渗滤的多糖以消化杂质；/n用乙酸沉淀所述酶；/n通过第二渗滤浓缩所述多糖；/n使所述经过第二渗滤的多糖通过多模式色谱树脂和/或内毒素去除树脂；以及/n收集所述纯化的多糖。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170705 US 62/5286831.纯化多糖的方法，其包括：
提供革兰氏阳性和/或革兰氏阴性细菌的发酵收获物；
用脱氧胆酸盐澄清所述发酵收获物；
通过第一渗滤浓缩所述澄清的多糖；
用酶处理所述经过第一渗滤的多糖以消化杂质；
用乙酸沉淀所述酶；
通过第二渗滤浓缩所述多糖；
使所述经过第二渗滤的多糖通过多模式色谱树脂和/或内毒素去除树脂；以及
收集所述纯化的多糖。
2.权利要求1所述的方法，其中所述多糖包含细菌细胞表面多糖。
3.权利要求2所述的方法，其中所述细菌细胞表面多糖包含荚膜多糖和/或胞外多糖。
4.权利要求1所述的方法，其中所述发酵收获物包含肺炎链球菌、B族链球菌、流感嗜血杆菌、鼠伤寒沙门菌和/或脑膜炎奈瑟氏菌。
5.权利要求1所述的方法，其中澄清之后将pH调节至约pH3.5-5.0。
6.权利要求5所述的方法，其中所述pH调节包含添加酸。
7.权利要求6所述的方法，其中所述酸包含乙酸。
8.权利要求1所述的方法，其中所述酶包含Benzonase、变溶菌素/溶菌酶、β-D-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和/或蛋白酶K中的一种或多种。
9.权利要求1所述的方法，其中用酶处理是用多种不同的酶依次地、单独地或在组合中进行的。
10.权利要求1所述的方法，其中所述杂质包含蛋白质、核酸、细胞壁组分和/或肽聚糖。
11.权利要求1所述的方法，其中所述通过多模式色谱树脂以流过式模式、切向流过滤模式和/或过滤模式进行。
12.权利要求1所述的方法，其中所述通过多模式色谱树脂以切向流过滤模式进行。
13.权利要求1所述的方法，其中所述发酵收获物包含革兰氏阴性细菌。
14.权利要求13所述的方法，其进一步包括将经过第一渗滤的多糖通过切向流过滤。
15.权利要求14所述的方法，其中所述切向流过滤包含脱氧胆酸盐/EDTA/Ca盐缓冲液。
16.权利要求13所述的方法，其中所述切向流过滤进一步包含通过50-100kDa膜。
17.权利要求1所述的方法，其中所述发酵收获物包含革兰氏阳性细菌。
18.权利要求17所述的方法，其进一步包括将经过第一渗滤的多糖通过切向流过滤。
19.权利要求18所述的方法，其中所述切向流过滤包含脱氧胆酸盐/EDTA/Ca盐缓冲液。
20.权利要求17所述的方法，其中所述切向流过滤进一步包...
【专利技术属性】
技术研发人员：SV卡普雷，AK达塔，
申请(专利权)人：创赏有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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