基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨及其制备方法技术

本发明专利技术公开了基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，将间充质干细胞和内皮祖细胞按1:1比例，种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外加入成骨诱导培养液继续培养13～15天，在‑70～80℃冷冻48～72小时，冻干24小时～30小时，冷冻保存1～3个月，获得基质依赖型组织工程骨。体外研究结果显示，用本发明专利技术方法构建的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞的基质依赖型组织工程骨，体外能够显著促进内皮祖细胞迁移、划痕修复和管腔形成，以及促进间充质干细胞的成骨分化；体内实验显示其能够显著促进新骨形成，成功修复骨缺损。

Matrix dependent tissue engineering bone based on mesenchymal stem cells / endothelial progenitor cells as seed cells and its preparation

【技术实现步骤摘要】
基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨及其制备方法
本专利技术属于组织工程
，涉及基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨及其制备方法。
技术介绍
创伤、肿瘤和感染等导致的大段骨缺损救治一直是临床治疗的难点之一。自体骨移植目前仍然是临床上骨移植的“金标准”，但存在取骨量少、取骨区创伤等限制。组织工程骨(tissueengineeringbone，TEB)是近年来研究的热点，并取得了良好的临床效果，但也存在活细胞依赖、自体细胞依赖和储运条件苛刻等问题。为了解决上述问题，我们前期建立了含有脐带间充质干细胞分泌的多种蛋白的骨基质材料及制备方法(专利ZL201310449152.5)，并在此基础上，提出了“基质依赖型组织工程骨(Extracellularmatrix-basedtissueengineeringbone，ECM-TEB)”的构建概念和体系。即通过去除种子细胞活性、保留细胞分泌的多种细胞因子等活性蛋白的方式构建获得ECM-TEB。该技术方式虽然除去细胞活性，但细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，将间充质干细胞和内皮祖细胞按1:1比例，种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外加入成骨诱导培养液继续培养13～15天，在-70～80℃冷冻48～72小时，冻干24小时～30小时，冷冻保存1～3个月，获得基质依赖型组织工程骨。/n

【技术特征摘要】
1.基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，将间充质干细胞和内皮祖细胞按1:1比例，种植于多孔骨支架材料上构建组织工程复合体，再在体外加入成骨诱导培养液继续培养13～15天，在-70～80℃冷冻48～72小时，冻干24小时～30小时，冷冻保存1～3个月，获得基质依赖型组织工程骨。


2.如权利要求1所述的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞、外周血间充质干细胞、脐血间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或脐带间充质干细胞。


3.如权利要求2所述的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。


4.如权利要求1所述的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，所述多孔骨支架材料为人工合成骨支架材料、脱细胞骨基质或脱钙骨基质。


5.如权利要求4所述的基于间充质干细胞/内皮祖细胞作为种子细胞构建的基质依赖型组织工程骨的制备方法，其特征在于，所述多孔骨支架材料为脱钙骨基质。


...

【专利技术属性】
技术研发人员：董世武，董睿，罗飞，钟华，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50