一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条及制备方法，所述试剂条包括玻璃纤维、硝酸纤维膜、吸水纸、金标垫、塑料底板、检测线包被HIV‑I/II抗原、对照线包被鼠IgG，所述塑料底板上设置有玻璃纤维、硝酸纤维膜、吸水纸、金标垫，所述硝酸纤维膜两端左右分别相对设置金标垫、吸水纸，所述金标垫外端搭接玻璃纤维，所述检测线包被HIV‑I/II抗原混合包被在硝酸纤维膜上，所述金标垫上固化有胶体金标记SPA。本发明专利技术通过增加组合抗原片段的方式提高了HIV‑1型抗体检出率，该发明专利技术的试纸条灵敏度高，适于医院、个人进行艾滋病初筛，检测时间短，准确率高。

Detection of HIV (1 + 2) antibody in urine by colloidal gold method and its preparation

【技术实现步骤摘要】
一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条及其制备方法
本专利技术涉及医学领域，尤其涉及一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条及其制备方法。
技术介绍
现有的艾滋病检测首先通过初步筛选然后进行确诊，初步筛选主要通过血液检测、口腔粘膜检测两种方式进行，血液检测需要抽取待测人血液，存在交叉感染的风险，同时使用的器械处理不当存在感染风险；口腔粘膜检测采样操作繁琐，需要不断刮取渗透液，必须由经培训的专业人士操作，否则对检测准确性有较大影响。鉴于以上弊端，本申请人通过工艺的改进不断的创新，研发出一种新的胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，以作为艾滋病检测初步筛选试剂条，操作方便、快速，无创采样，适用于普通人群自测。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足而提供一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条及其制备方法，该专利技术能够快速检测艾滋病阳性，为达到上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现。一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，所述试剂条包括玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、吸水纸、金标垫、塑料底板、检测线包被HIV-I/II抗原、对照线包被鼠IgG，所述塑料底板上设置有玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、吸水纸、金标垫、检测线包被HIV-I/II抗原、对照线包被鼠IgG，所述硝酸纤维膜两端左右分别相对搭接金标垫、吸水纸，所述金标垫外端搭接玻璃纤维膜，所述金标垫上固化有胶体金标记SPA，所述以胶体金标记的SPA胶体金结合物垫，作为显色探针，所述硝酸纤维素膜上检测线混合包被HIV-I/II抗原、对照线包被鼠IgG，对照线包被鼠IgG与检测线包被HIV-I/II抗原相对设置。进一步，所述在硝酸纤维素膜上检测线包被HIV-I/II抗原包括gp41+gp36融合抗原，作为检测HIV1型抗体和HIV2型抗体的检测线。进一步，所述在硝酸纤维素膜2上检测线包被HIV-I/II抗原6还包括gp120抗原，作为检测HIV1型抗体检测线。进一步，金标垫的制备方法如下：1)标记SPA,以0.1M硼酸-硼砂缓冲液调节胶体金PH在8.0-8.5，10-20μg/ml金的比例加入SPA,震荡反应10-30分钟后，以BSA或casein进行封闭，封闭液的终浓度5-10mg/ml,10000rpm离心10-20min分钟,弃上清，沉淀复溶至原体积10％；2)复溶液为含有PEG、BSA、Casein、蔗糖、Tween-20的50mMTris-Hcl(pH8.5-9.0)缓冲液；3)用喷金仪将复溶液均匀喷涂于玻璃纤维膜膜上，喷金浓度为4.5μl/cm,于25℃，湿度10-30％，烘干处理，16-24h。进一步，在硝酸纤维素膜上包被的gp41+gp36融合抗原浓度为1.5-2.5mg/ml，gp120抗原浓度为0.25-0.5mg/ml。进一步，所述gp41+gp36融合抗原与gp120抗原采用混合包被一条检测线。进一步，所述检测线包被缓冲液为pH8.9、50mM的Tris-HCl缓冲液。进一步，所述金标垫的制备方法采用胶体金标记鼠抗人IgG或SPA中的任意一种。一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条检测笔所述试剂条安置于检测笔内，所述检测笔分为上、下两部分，且上、下两部分采用卡接方式固定，位于所述检测笔下部分笔体内开有安置槽与试剂条匹配，所述检测笔末端开有检测口，所述检测笔上部分中间位置开有可视窗口。本专利技术的有益效果：1、本专利技术的试纸条检测线包被选用gp41+gp36融合抗原，兼具HIV-1型和HIV-2型抗体的检测能力，等效于gp41抗原与gp36抗原混合包被，避免了混合包被时两种抗原的互相干扰，同时简化了生产工艺，降低了制造成本。2、本专利技术的试纸条检测线同时包被gp120抗原，与gp41互为补充，比单一包被gp41的HIV-1型抗体检出率更高更精准，达到与gp160等效的效果。gp160分解即为gp41和gp120两个片段，但gp120相比gp160具有更好的溶解性和分散性，包被缓冲液不用加入S9、脲等物质进行特殊处理，简化了生产工艺，提高产品稳定性。3、本专利技术的试纸条检测尿液，无创采样，避免因采血等使用方式造成的交叉感染。并且本试纸条设置为检测笔的形式，可以直接插入待测样本，使用人全程无需接触样本，操作简单，方便检测。4、本专利技术试纸条检测灵敏度高，适合个人辅助检测，在医学观察及医学检测时起到自检筛选的作用。附图说明图1为本专利技术的结构示意图；图2为本专利技术的检测笔结构示意图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步说明，但不局限于说明书上的内容。如图1-2所示为达到上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现。一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，所述试剂条包括玻璃纤维膜1、硝酸纤维膜2、吸水纸3、金标垫4、塑料底板5、检测线包被HIV-I/II抗原6、对照线包被鼠IgG7，所述塑料底板5上设置有玻璃纤维膜1、硝酸纤维膜2、吸水纸3、金标垫4、检测线包被HIV-I/II抗原6、对照线包被鼠IgG7，所述硝酸纤维膜2两端左右分别相对搭接金标垫4、吸水纸3，所述金标垫4外端搭接玻璃纤维膜1，所述金标垫4上固化有胶体金标记SPA，所述以胶体金标记的SPA胶体金结合物垫，作为显色探针，所述硝酸纤维素膜2上检测线混合包被HIV-I/II抗原6、对照线包被鼠IgG7，对照线包被鼠IgG7与检测线包被HIV-I/II抗原6相对设置。在本实施例中，所述在硝酸纤维素膜2上检测线包被HIV-I/II抗原6包括gp41+gp36融合抗原，作为检测HIV1型抗体和HIV2型抗体的检测线。在本实施例中，所述在硝酸纤维素膜2上检测线包被HIV-I/II抗原6还包括gp120抗原，作为检测HIV1型抗体检测线。金标垫的制备方法如下：4)标记SPA,以0.1M硼酸-硼砂缓冲液调节胶体金PH在8.0-8.5，10-20μg/ml金的比例加入SPA,震荡反应10-30分钟后，以BSA或casein进行封闭，封闭液的终浓度5-10mg/ml,10000rpm离心10-20min分钟,弃上清，沉淀复溶至原体积10％；5)复溶液为含有PEG、BSA、Casein、蔗糖、Tween-20的50mMTris-Hcl(pH8.5-9.0)缓冲液；6)用喷金仪将复溶液均匀喷涂于玻璃纤维膜膜上，喷金浓度为4.5μl/cm,于25℃，湿度10-30％，烘干处理，16-24h。在本实施例中，在硝酸纤维素膜上包被的gp41+gp36融合抗原浓度为1.5-2.5mg/ml，gp120抗原浓度为0.25-0.5mg/ml。在本实施例中，所述gp41+gp36融合抗原与gp120抗原采用混合包被一条检测线。在本实施例中，所述检测线包被缓冲液为pH8.9、50mM的Tris-HC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，其特征在于：所述试剂条包括玻璃纤维膜(1)、硝酸纤维膜(2)、吸水纸(3)、金标垫(4)、塑料底板(5)、检测线包被HIV-I/II抗原(6)、对照线包被鼠IgG(7)，所述塑料底板(5)上设置有玻璃纤维膜(1)、硝酸纤维膜(2)、吸水纸(3)、金标垫(4)、检测线包被HIV-I/II抗原(6)、对照线包被鼠IgG(7)，所述硝酸纤维膜(2)两端左右分别相对搭接金标垫(4)、吸水纸(3)，所述金标垫(4)外端搭接玻璃纤维膜(1)，所述金标垫(4)上固化有胶体金标记SPA，所述以胶体金标记的SPA胶体金结合物垫，作为显色探针，所述硝酸纤维素膜2上检测线混合包被HIV-I/II抗原6、对照线包被鼠IgG(7)，对照线包被鼠IgG(7)与检测线包被HIV-I/II抗原(6)相对设置。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，其特征在于：所述试剂条包括玻璃纤维膜(1)、硝酸纤维膜(2)、吸水纸(3)、金标垫(4)、塑料底板(5)、检测线包被HIV-I/II抗原(6)、对照线包被鼠IgG(7)，所述塑料底板(5)上设置有玻璃纤维膜(1)、硝酸纤维膜(2)、吸水纸(3)、金标垫(4)、检测线包被HIV-I/II抗原(6)、对照线包被鼠IgG(7)，所述硝酸纤维膜(2)两端左右分别相对搭接金标垫(4)、吸水纸(3)，所述金标垫(4)外端搭接玻璃纤维膜(1)，所述金标垫(4)上固化有胶体金标记SPA，所述以胶体金标记的SPA胶体金结合物垫，作为显色探针，所述硝酸纤维素膜2上检测线混合包被HIV-I/II抗原6、对照线包被鼠IgG(7)，对照线包被鼠IgG(7)与检测线包被HIV-I/II抗原(6)相对设置。


2.根据权利要求1所述的一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，其特征在于：所述在硝酸纤维素膜(2)上检测线包被HIV-I/II抗原(6)包括gp41+gp36融合抗原，作为检测HIV1型抗体和HIV2型抗体的检测线。


3.根据权利要求1所述的一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条，其特征在于：所述在硝酸纤维素膜(2)上检测线包被HIV-I/II抗原(6)还包括gp120抗原，作为检测HIV1型抗体检测线。


4.根据权利要求1所述一种基于胶体金法检测尿液中HIV(l+2)抗体试剂条的制备方法，其特征在于，金标垫的制备方法如下：
1)标记SPA,以0.1M硼酸-硼砂缓冲液调节胶体金PH在8.0-8.5，10-20μg/ml金的比例加入SPA,震荡反应10-30分钟后，以BSA或casein进行封...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆建，
申请(专利权)人：北京华晟源医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11