一种结核分枝杆菌刺激抗原的制备方法技术

本发明专利技术涉及生物医学检验领域，尤其涉及结核分枝杆菌刺激抗原及其制备方法。本发明专利技术提供的结核分枝杆菌刺激抗原其具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与其具有至少80％序列同源性的序列。并且还提供了编码该抗原片段的多核苷酸、表达载体，以及重组产结核分枝杆菌刺激抗原的大肠杆菌菌株，并通过控制培养及发酵诱导条件，实现重组大肠杆菌的高密度培养的同时，避免了后期因自身所产生的蛋白对菌体所带来的异常现象。该抗原在刺激γ‑干扰素的产生时，能够降低干扰，从而使检测具有更好的特异性和灵敏度，检测结果更加可靠。

A preparation method of Mycobacterium tuberculosis stimulating antigen

【技术实现步骤摘要】
一种结核分枝杆菌刺激抗原的制备方法
本专利技术涉及生物医学检验领域，尤其涉及结核分枝杆菌刺激抗原及其制备方法。
技术介绍
结核病是由结核分枝杆菌(tuberclebacillus，TB)感染引起的人畜共患的慢性传染病。结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。结核病是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病。潜伏期4～8周。其中80％发生在肺部，其他部位(颈淋巴、脑膜、腹膜、肠、皮肤、骨骼)也可继发感染。人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。结核病的病因包括：①原发性：当人体抵抗力降低时，经呼吸道或消化道初次侵入人体的结核菌，常在肺部或肠壁形成原发病灶。②血型播散：当机体抵抗力降低时，大量结核菌一次或在极短时间内多次侵入血循环而引起，此时，由于机体变态反应增高，可致血管通透性增强。③继发性：指原发感染过程中肺内遗留下的潜在性病灶重新复燃或结核杆菌再次感染所引起的。我国是结核病流行严重的国家之一、同时也是全球耐多药结核病流行严重的国家之一，人类的健康受到了结核病的严重威胁。结核分枝杆菌的检测对结核病的诊断和防治存在重要意义。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.结核分枝杆菌刺激抗原，其具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列或与其具有至少80％序列同源性的序列。/n

【技术特征摘要】
1.结核分枝杆菌刺激抗原，其具有如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列或与其具有至少80％序列同源性的序列。


2.编码权利要求1所述结核分枝杆菌刺激抗原的多核苷酸。


3.根据权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


4.一种核酸载体，包括权利要求1或2所述的多核苷酸。


5.根据权利要求4所述的核酸载体，其特征在于，其骨架载体为pET30a。


6.重组宿主，转化有权利要求4或5所述的核酸载体。


7.根据权利要求6所述的重组宿主，其特征在于，所述宿主为大肠杆菌。


8.结核分枝杆菌刺激抗原的制备方法，包括：培养权利要求6或7所述的重组宿主，诱导结核分枝杆菌刺激抗原的表达。


9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，
所述培养步骤的条件为：37℃，压力0.05Mpa，溶氧40％，搅拌速度为200-400rpm；以氨水调节pH值为6.8～7.0，培养至OD600值为5.0～7.0；
所述培养步骤中：培养基包括水和葡萄糖40g/L，酵母粉50g...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘梁涛，李新乐，尚朋林，张文婧，赵巧辉，李欢欢，李桂林，付光宇，吴学炜，杨增利，
申请(专利权)人：郑州伊美诺生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41