一种果胶酸裂解酶编码基因及酶和制备与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种来源于寄生曲霉菌(Aspergillus parasiticus)的果胶酸裂解酶基因及其酶的制备方法与应用，即利用基因工程的技术方法，将该果胶酸裂解酶的基因克隆到毕赤酵母表达载体上，获得可异源表达该酶的毕赤酵母重组菌株，该菌株异源表达制备的果胶酸裂解酶，能高效降解果胶多糖和聚半乳糖醛酸(PGA)。本发明专利技术提供的果胶酸裂解酶可广泛应用于农业、工业、食品、饲料添加剂、医药及果胶寡糖制备等领域。

Coding gene, enzyme and preparation and application of Pectinase

【技术实现步骤摘要】
一种果胶酸裂解酶编码基因及酶和制备与应用
本专利技术涉及一种果胶酸裂解酶的基因序列及其制备方法和应用。本专利技术提供了该果胶酸裂解酶的重组质粒和重组基因工程菌株及其在多糖降解方面的应用。本专利技术提供的果胶酸裂解酶可广泛应用于农业、食品、饲料添加、医药及寡糖制备等领域。
技术介绍
果胶(Pectin)是植物细胞壁中结构和功能最为复杂的多糖，广泛存在于自然界中；果胶以果胶，果胶酸，原果胶三种形态分布在植物的软组织细胞壁，细胞间层，细胞与次生壁连接区等；果胶多糖是一种高分子化合物，平均分子量介于20000～400000之间。果胶多糖的结构十分复杂，主要包括同聚半乳糖醛酸(Homogalacturonan，HG)，约占果胶的65％；鼠李糖半乳糖醛酸聚糖I(Rhamnogalacturonan-I，RG-I)，约占果胶的20％～35％；鼠李糖半乳糖醛酸聚糖II(Rhamnogalacturonan-II，RG-II)三部分，约占果胶的10％。果胶的主要结构是半乳糖醛酸在α-1,4糖苷键的作用下线性聚合而成，是果胶的HG部分，也就是聚半乳糖醛酸(PGA)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种果胶酸裂解酶基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：/n1)具有序列表中SEQ ID NO.1的第1-1065位的脱氧核糖核酸(DNA)序列；/n2)具有序列表中SEQ ID NO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列；/n3)编码序列表中SEQ ID NO.2的第1-355位氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；/n4)编码序列表中SEQ ID NO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；/n5)对序列表中SEQ ID NO.1的第1-1065位的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有果胶酸裂解酶活性的核苷酸序列；/n6)对序列表...

【技术特征摘要】
1.一种果胶酸裂解酶基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：
1)具有序列表中SEQIDNO.1的第1-1065位的脱氧核糖核酸(DNA)序列；
2)具有序列表中SEQIDNO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列；
3)编码序列表中SEQIDNO.2的第1-355位氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；
4)编码序列表中SEQIDNO.2氨基酸序列的脱氧核糖核酸(DNA)序列；
5)对序列表中SEQIDNO.1的第1-1065位的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有果胶酸裂解酶活性的核苷酸序列；
6)对序列表中SEQIDNO.1的脱氧核糖核酸(DNA)序列进行一个或两个以上核苷酸取代、缺失或添加而得到的编码具有果胶酸裂解酶活性的核苷酸序列；
7)与序列表中SEQIDNO.1的第1-1065位限定的脱氧核糖核酸(DNA)序列的同源性达到80％及以上，且能编码降解果胶多糖和聚半乳糖醛酸的蛋白质的脱氧核糖核酸(DNA)序列。
8)与序列表中SEQIDNO.1限定的脱氧核糖核酸(DNA)序列的同源性达到80％及以上，且能编码降解果胶多糖和聚半乳糖醛酸的蛋白质的脱氧核糖核酸(DNA)序列。


2.一种权利要求1所述的果胶裂解酶基因编码的果胶裂解酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种：
1)序列表中SEQIDNO.2从氨基端开始的第1-355位氨基酸残基序列；
2)序列表中SEQIDNO.2氨基酸残基序列；
3)对序列表中SEQIDNO.2的第1-355位氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有果胶酸裂解酶活性的氨基酸序列；
4)对序列表中SEQIDNO.2所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代、缺失或添加而形成的具有果胶酸裂解酶活性的氨基酸序列。


3.一种权利要求2所述的果胶酸裂解酶的制备方法，其特征在于：将如权利要求1所述的果胶酸裂解酶基因克隆...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹恒，杨国军，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：辽宁;21