一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法技术

本发明专利技术提供一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，所述方法，包括人口腔黏膜干细胞的培养、诱导、分化。本发明专利技术采用自体口腔黏膜干细胞诱导分化为星形胶质细胞，采用自体口腔黏膜干细胞诱导的星形胶质细胞用于临床不存在伦理问题，且降低免疫排斥反应。经口腔黏膜干细胞诱导的星形胶质细胞纯度高，纯度达95%以上，诱导分化时间为8‑10天。

A culture method for transforming human oral mucosa stem cells into astrocytes

【技术实现步骤摘要】
一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法
本专利技术涉及一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，属于生物与新医药

技术介绍
星形胶质细胞，是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞，历来被认为是神经系统的支持细胞，起着营养和保护、离子缓冲、递质代谢的作用。CN104870634A公开了再生用于在神经系统中治疗疾病和损伤的功能性神经元，使用特殊的转录因子可使大脑皮层的星形胶质细胞转化为功能性神经细胞，因此，体内方法可以治疗老年痴呆以及脑梗等神经疾病。但是，在中枢神经系统损伤（例如：帕金森病、多发性硬化症、癫痫、肌萎缩性脊髓侧索硬化症）的治疗中，无法通过体内方法大量获得星形胶质细胞，仍需通过外科手术补充大量星形胶质细胞。因此，通过体外方法大量获得星形胶质细胞具有重要的现实意义。口腔黏膜干细胞（hOMSC）是由口腔粘膜的固有层细胞培养而成。口腔粘膜干细胞和神经嵴起源于同一胚层，且有报道hOMSC是一种由神经嵴衍生的干细胞类型。口腔粘膜损伤的愈合主要靠再生，愈合速度比皮肤或其他结缔组织快，而且似乎不受年龄和性别的影响本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述方法，包括人口腔黏膜干细胞的培养、诱导、分化。/n

【技术特征摘要】
1.一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述方法，包括人口腔黏膜干细胞的培养、诱导、分化。


2.根据权利要求1所述的一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述诱导，将第3-5代人口腔黏膜干细胞放在NIM培养基中诱导3天以上。


3.根据权利要求2所述的一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述NIM培养基的组成为：Neurobasal和DMEM/F12培养基按照1：0.5-1的体积比混合，添加体积百分比为0.5-1%的N2添加剂，体积百分比为1-3%的B27添加剂，2-4mM的谷氨酰胺，15-25ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子bFGF，15-25ng/mL的表皮细胞生长因子EGF。


4.根据权利要求2所述的一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述NIM培养基的组成为：Neurobasal和DMEM/F12培养基按照1：1的体积比混合，添加体积百分比为0.5%的N2添加剂，体积百分比为2%的B27添加剂，2mM的谷氨酰胺，20ng/mL的碱性成纤维细胞生长因子bFGF，20ng/mL的表皮细胞生长因子EGF。


5.根据权利要求1所述的一种人口腔黏膜干细胞转化成星形胶质细胞的培养方法，其特征在于：所述分化，将诱导阶段后的细胞消化下来，收集细胞离心，用NDM培养基重新悬浮细胞，贴壁培养30-60min，去除培养基，加入新的分化用培养基，继续培养5-7天，定期更换新鲜的培养基，诱导成星形胶质细胞。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明录，韩庆梅，卢永灿，王立新，金海锋，张传鹏，许淼，冯建海，强邦明，
申请(专利权)人：山东兴瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37