鉴定蛋白质相互作用的方法技术

本发明专利技术公开了鉴定蛋白质相互作用的方法，该方法包括以下步骤：a)将包含一种第一蛋白质和一种其它蛋白质的样品在一个预选的持续时间暴露于至少一种预选条件；b)将至少一种可溶性级分与不溶性级分分离并分开；和c)分析可溶性/不溶性级分，以鉴定所述蛋白质相互作用。在一个实施方案中，步骤a)中的预选条件是至少一个变性温度，与不和其它蛋白质相互作用时的第一蛋白质相比，该变性温度能够引起和所述其它蛋白质相互作用时的所述第一蛋白质沉淀的变化，且在步骤c)中使用邻近共聚集(PCA)特征来鉴定细胞或组织中蛋白质‑蛋白质相互作用和蛋白质复合物的动力学。还公开了所述方法用于筛选治疗药物靶标和疾病进展预后的用途。

Methods for identifying protein interactions

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】鉴定蛋白质相互作用的方法相关申请的交叉引用本申请要求2017年8月18日提交的新加坡临时申请第10201706788W号的优先权权益，其内容出于所有目的通过引用整体并入本文。
本专利技术一般涉及分子生物学和计算生物学领域。特别地，本专利技术涉及直接在细胞和组织中鉴定和监测蛋白质-蛋白质相互作用的方法。
技术介绍
活细胞源自在时间和空间上，在蛋白质与核酸、代谢物和脂质之间发生的无数生物分子相互作用。这种复杂的生物网络的中心是介导细胞的生物化学过程和结构组织的蛋白质复合物。它们根据细胞需要动态装配和解离，并且富含牵涉遗传和感染疾病的蛋白质。蛋白质可以在不同的物理、细胞或生理状态和条件下彼此相互作用以形成蛋白质复合物。这些相互作用是复杂的和动态的，其中蛋白质和蛋白质复合物可以根据细胞的需要进行装配或解离。至关重要的是，能够进行实时观察并在蛋白质组水平(proteome-widelevel)上研究细胞内的这些相互作用以便更好地理解生理状态中的这些复杂相互作用。迫切需要这样的方法，因为它们将缓和当前在理解动态蛋白质相互作用的复杂性本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于鉴定一种或多种第一蛋白质与一种或多种其它蛋白质之间的蛋白质相互作用的方法，所述方法包括以下步骤：/na)使包含所述一种或多种第一蛋白质和所述一种或多种其它蛋白质的一种或多种样品暴露于至少一种预选条件，达至少一个预选的持续时间；/nb)将所述一种或多种样品的至少一种可溶性级分与不溶性级分分离并分开；以及/nc)分析步骤b)的所述至少一种可溶性级分或所述不溶性级分，以鉴定所述一种或多种样品中一种或多种第一蛋白质与一种或多种其它蛋白质之间的所述蛋白质相互作用。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170818 SG 10201706788W1.一种用于鉴定一种或多种第一蛋白质与一种或多种其它蛋白质之间的蛋白质相互作用的方法，所述方法包括以下步骤：
a)使包含所述一种或多种第一蛋白质和所述一种或多种其它蛋白质的一种或多种样品暴露于至少一种预选条件，达至少一个预选的持续时间；
b)将所述一种或多种样品的至少一种可溶性级分与不溶性级分分离并分开；以及
c)分析步骤b)的所述至少一种可溶性级分或所述不溶性级分，以鉴定所述一种或多种样品中一种或多种第一蛋白质与一种或多种其它蛋白质之间的所述蛋白质相互作用。


2.如权利要求1所述的方法，其中，步骤a)中的所述至少一个预选条件是预选温度。


3.如权利要求2所述的方法，其中，与不和一种或多种其它蛋白质相互作用时的所述第一蛋白质相比，所述至少一个预选温度能够引起和一种或多种其它蛋白质相互作用时的所述第一蛋白质沉淀的变化。


4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种样品中的所述第一蛋白质包含在细胞内或细胞上。


5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种样品是生物样品。


6.权利要求5所述的方法，其中，所述生物样品是完整细胞或细胞裂解物。


7.如权利要求6所述的方法，其中，所述一种或多种样品是完整细胞。


8.如权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种样品是从相同样品或不同样品获得的。


9.如权利要求6至8中任一项所述的方法，其中，所述一种或多种样品在用于所述方法中之前被修饰。


10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中，所述第一蛋白质或所述一种或多种其它蛋白质可以是野生型蛋白质或重组蛋白质。


11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中，步骤b)包括在将所述至少一种可溶性级分与所述不溶性级分分离并分开之前裂解细胞以获得细胞裂解物的步骤。


12.如权利要求11所述的方法，其中，步骤b)还包括在将所述至...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈顺兴，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG