一种检测PRRSV和PCV的引物组合物、试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种检测PRRSV和PCV的引物组合物、试剂盒及方法。本发明专利技术设计筛选出的引物组合物包括2组特异性引物和探针，在本发明专利技术优选的反应体系和反应条件下，能够在同一反应管中同时鉴别检测猪蓝耳病和猪圆环病毒病，具有特异性好、灵敏度高、方便快捷等特点。

A primer composition, kit and method for detecting PRRSV and PCV

【技术实现步骤摘要】
一种检测PRRSV和PCV的引物组合物、试剂盒及方法
本申请涉及病毒检测
，具体而言，涉及一种检测PRRSV和PCV的引物组合物、试剂盒及方法。
技术介绍
猪繁殖与呼吸障碍综合症(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(porcinereproductiveandrespiratorysyndromeviruses，PRRSV)引起的一种猪急性传染病，俗称猪蓝耳病，病猪表现为食欲不振，体温升高，以耳根和腹部发红为明显特征，发病率和死亡率极高，该病对猪的危害性极大，引起极大的经济损失。猪圆环病毒病(porcinecircovirusdisease,PCVD))是由猪圆环病毒Ⅱ型(porcinecircovirus2,PCV-2)引起的一种猪传染病，病猪以早期淋巴结肿大，食欲不振，呼吸困难，腹泻，早产及死胎等为特征，发病率20％-60％和死亡率5％-35％。PRRSV和PCV-2引起的PRRS和PCVD是猪两种很常见的疫病，临床上还常常有PR本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测PRRSV和PCV的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括2组特异性引物和探针，其中第一组特异性引物和探针包括PCV-F3，PCV-B3，PCV-FIP，PCV-BIP，以及PCV-Probe，第二组特异性引物和探针包括PRRSV-F3，PRRSV-B3，PRRSV-FIP，PRRSV-BIP，以及PRRSV-probe，所述第一组和第二组特异性引物和探针依次为序列表中SEQ ID No.1至SEQID No.10所示核苷酸序列，或为将所述序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.10所示的核苷酸序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与所述序列表中所示的...

【技术特征摘要】
1.一种检测PRRSV和PCV的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括2组特异性引物和探针，其中第一组特异性引物和探针包括PCV-F3，PCV-B3，PCV-FIP，PCV-BIP，以及PCV-Probe，第二组特异性引物和探针包括PRRSV-F3，PRRSV-B3，PRRSV-FIP，PRRSV-BIP，以及PRRSV-probe，所述第一组和第二组特异性引物和探针依次为序列表中SEQIDNo.1至SEQIDNo.10所示核苷酸序列，或为将所述序列表中SEQIDNo.1至SEQIDNo.10所示的核苷酸序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与所述序列表中所示的核苷酸序列具有相同功能的核苷酸序列；所述PCV-probe的5’端标记CY5.5荧光基团，3’端标记BHQ2淬灭基团，该CY5.5荧光基团在690nm波长下呈红色；所述PRRSV-probe的5’端标记FAM荧光基团，3’端标记BHQ1淬灭基团，该FAM荧光基团在520nm波长下呈绿色。


2.一种检测PRRSV和PCV的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组合物。


3.根据权利要求2所述的检测PRRSV和PCV的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中内引物PRRSV-FIP、PRRSV-BIP、PCV-FIP、PCV-BIP，外引物PRRSV-F3、PRRSV-B3、PCV-B3、PCV-F3和探针PRRSV-Probe、PCV-Probe的浓度比为80：10：1。


4.根据权利要求2或3所述的检测PRRSV和PCV的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的每25ul反应体系中包括模板RNA/DNA2μL，2×缓冲液12.5μL，Bst3.0DNA聚合酶320U,内引物PRRSV-FIP、PRRSV-BIP、PCV-FIP和PCV-BIP各40pmol，外引物PRRSV-F3、PRRSV-B3、PCV-B3和PCV-F3各5pmol，探针PRRSV-Probe和PCV-Probe各0.5pmol，加双蒸水补...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢芝勋，谢志勤，张民秀，范晴，罗思思，谢丽基，黄娇玲，王盛，曾婷婷，张艳芳，邓显文，
申请(专利权)人：广西壮族自治区兽医研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45