一种低高聚体含量聚合血红蛋白的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种低高聚体含量聚合血红蛋白的制备方法，具体提供了交联血红蛋白的制备方法，包括：a、稀释脱氧血红蛋白；b、交联剂戊二醛与所述稀释脱氧血红蛋白发生交联反应；c、加入还原剂终止交联反应,用超滤换液的方式除去未反应的交联剂和终止还原剂,得到交联血红蛋白；其中：所述步骤a中，稀释脱氧血红蛋白浓度到1‑3g/dL，在所述血红蛋白中加入N‑乙酰‑L‑半胱氨酸，使溶液中血红蛋白与N‑乙酰‑L‑半胱氨酸的质量比为5‑10:1；且血红蛋白与交联剂的质量比为1000:29‑45。该方法制备的聚合血红蛋白中，不仅二聚体的含量较低，高聚体的含量也较低。

A preparation method of polymeric hemoglobin with low and high polymer content

【技术实现步骤摘要】
一种低高聚体含量聚合血红蛋白的制备方法优先权信息本专利申请要求申请日为2019年9月9日，专利技术名称为“交联血红蛋白的制备方法及包含该血红蛋白的器官灌注液”的中国专利申请201910846580.9的优先权，该优先权申请在此全文引用作为参考。
本专利技术属于生物制药领域，涉及血红蛋白的聚合方法，特别涉及低高聚体含量聚合血红蛋白的制备方法。
技术介绍
输血对于外科手术、抢险抗灾和战场救护来说是必不可少的医疗手段。近年来，全世界对输血用血液的需求量成几何级数增长。但是由于人类血液的血型十分复杂，输血反应始终难以克服，而天然血液的储存和运输又极为困难，再加上HBV以及HIV等病毒对血液污染严重，献血人员数量严重不足等众多原因，使得安全有效的血源日益紧缺。因此，红细胞代用品就成为国际关注的研究热点，并被列为二十一世纪的重大研究开发领域。理想的红细胞代用品要求具有天然红细胞的传递氧功能、生物相容性、安全性和稳定性，即：①具有较高的携氧能力，氧分压在正常生理范围内，能有效向组织供氧；②与人血液所有组分具有良好的生物相容性；⑦能维持本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种交联血红蛋白的制备方法，其包括如下步骤：/na、稀释脱氧的血红蛋白到X

【技术特征摘要】
20190909 CN 20191084658091.一种交联血红蛋白的制备方法，其包括如下步骤：
a、稀释脱氧的血红蛋白到X1；向所述稀释脱氧的血红蛋白中加入终浓度为X2的N-乙酰-L-半胱氨酸，得到反应液；将所述反应液移到无氧反应容器内；
b、在所述无氧反应容器顶部固定压力雾化器，在所述雾化器上接入进气管与进液管，在所述无氧反应容器顶部接上平衡气管路；封闭所述无氧反应容器，开启底部搅拌转子，通过水浴夹套加热所述反应液到42℃；打开进液管阀门，加入交联剂戊二醛，调整进液速度为X3，打开进气管阀门，通入惰性气体，优选高纯氮气，调控所述平衡气管路上的排气阀，使所述无氧反应容器的压力平衡在X4，按1g血红蛋白X5戊二醛的比例向所述反应液中加入所述交联剂戊二醛进行交联反应；
c、加入硼氢化钠终止所述交联反应，30kD超滤换液纯化，得到所述交联血红蛋白；...

【专利技术属性】
技术研发人员：游可为，史国营，张彦鹏，石松，陈浩源，
申请(专利权)人：润方北京生物医药研究院有限公司，润方北京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11