一种用于检测恶性肿瘤、肿瘤转移和类型的标志物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于检测恶性肿瘤、肿瘤转移和类型的标志物及其应用，所述肿瘤标志物包括甲状腺肿瘤标志物、乳腺癌前哨淋巴结转移标志物、区分肺癌类型的肿瘤标志物、恶性肿瘤标志物、早期胃癌诊断的标志物和非实体肿瘤的标志物。本发明专利技术标志物可以准确检测甲状腺和乳腺癌的转移、区分小细胞肺癌和非小细胞肺癌、准确检测早期胃癌，检测非实体肿瘤，对甲状腺癌、乳腺癌、肺癌、胃癌和非实体肿瘤的手术治疗方式和用药选择具有指导作用，延长患者生命。

A marker for detection of malignant tumor, tumor metastasis and type and its application

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测恶性肿瘤、肿瘤转移和类型的标志物及其应用
本专利技术涉及生物
，涉及基因诊断领域，涉及一种检测肿瘤的标志物，具体涉及一种用于检测恶性肿瘤、肿瘤转移和类型的标志物及其应用。
技术介绍
癌症是人类生命的重大威胁，全世界每年新增1400万癌症患者，同时有820万患者死于癌症。无限增殖和转移是癌细胞的重要特性，大部分癌症患者都是由于癌细胞广泛转移，引起器官衰竭等并发症而导致死亡。很多癌症在早期就会开始发生转移，此时从癌灶转移出来的癌细胞数量还较少，尚未形成稳定的转移灶，如果能够及时使用有效的化疗药物，将能够消灭转移的癌细胞，对防止病人术后复发和延长生命具有重要意义。目前对于癌症是否发生早期转移，通常是通过形态学观察癌灶附近的淋巴结中是否存在癌细胞来判定，但是形态学观察对病理医生的经验要求非常高，同时癌细胞在发生转移时会发生一些形态学上的变化，很容易造成漏诊，因此急需开发一种能够在早期发现癌细胞转移的检测技术。基因组印记是表观遗传学中基因调控的一种方式。其特点是，通过甲基化来自特定亲代的等位基因，使某个基因只有一个等位基因表达，而另一个则陷入基因沉默状态。该种类的基因，被称为印迹(记)基因。印迹缺失是印迹基因去甲基化导致沉默状态的等位基因被激活并且开始基因表达的一种表观遗传改变。大量研究表明，该现象(印迹缺失)普遍存在于各类癌症并且发生时间早于细胞和组织形态改变。与此同时，在健康细胞中，印迹缺失比例极低，与癌细胞成鲜明对比。所以，印迹基因的甲基化状态可以作为病理标记，通过特定分子检测技术，对细胞异常状态进行分析。由于印迹基因的功能涵盖细胞信号传递、细胞周期调控、细胞内外物质运输、细胞外基质形成等多个方面，所以在不同的癌症中印迹基因所表现的作用有所不同，表达的量也相差很大，故而形成了不同的敏感性和特异性，对肿瘤发生发展中的浸润和转移及预后起了巨大的作用。同时，不同印记基因的组合也可以对肿瘤的亚型进行区分。基于上述原因，目前的肿瘤的转移、肿瘤类型并没有明显区分的诊断标志物，解析肿瘤的转移、肿瘤类型在细胞层面上存在的分子标记物变化，以此提供更精确的预诊和诊断信息，并为治疗方案的选择作出指导。
技术实现思路
针对现有技术的不足及实际的需求，本专利技术提供了一种用于检测恶性肿瘤、肿瘤转移和类型的标志物及其应用，通过采用印记基因的检测，能够判断甲状腺肿瘤和乳腺肿瘤的转移性，区分肺癌的类型，作为恶性肿瘤的标志物，早期诊断胃癌，诊断非实体肿瘤，为后续的各种恶性肿瘤的治疗提供依据。为达上述目的，本专利技术提供如下技术方案：第一方面，本专利技术提供一种甲状腺癌转移标志物，所述标志物为印记基因Grb10。本专利技术中，甲状腺癌是一种惰性癌症，一般情况下鲜有转移，但通过对印记基因Grb10的总表达量、印记基因缺失表达量和印记基因拷贝数异常表达量的计算，发现印记基因Grb10表达量增加、印记基因缺失表达量增加和印记基因拷贝数异常表达量增加的时候与甲状腺癌转移显著相关。根据本专利技术，所述印记基因的总表达量、印记基因缺失表达量和印记基因拷贝数异常表达量的公式如下：总表达量＝(b+c+d)/(a+b+c+d)×100％；正常印记基因表达量＝b/(b+c+d)×100％；印记基因缺失基因表达量＝c/(b+c+d)×100％；印记基因拷贝数异常的基因表达量＝d/(b+c+d)×100％；其中，所述a为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内不存在标记，印记基因没有表达的细胞核；所述b为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在一个红色/棕色标记，印记基因存在的细胞核；所述c为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在两个红色/棕色标记，印记基因缺失的细胞核；所述d为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在两个以上红色/棕色标记，印记基因拷贝数异常的细胞核；根据本专利技术，所述印记基因Grb10的总表达量大于10％、印记基因缺失表达量大于10％和印记基因拷贝数异常表达量大于0.5％，则判断为甲状腺癌具有转移属性或甲状腺癌已转移。第二方面，本专利技术提供一种乳腺癌前哨淋巴结转移标志物，所述标志物为印记基因Grb10。根据本专利技术，所述印记基因Grb10的总表达量大于11％、印记基因缺失表达量大于5％和印记基因拷贝数异常表达量大于0.5％，则判断为乳腺癌前哨淋巴结具有转移属性或乳腺癌前哨淋巴结已转移。第三方面，本专利技术提供一种用于区分肺癌类型的标志物，所述标志物为印记基因Peg3和印记基因Slc38a4。根据本专利技术，所述印记基因Peg3的总表达量大于45％、印记基因Peg3的印记基因缺失表达量大于20％且印记基因Peg3的拷贝数异常表达量大于15％或所述印记基因Slc38a4的总表达量不小于50％、印记基因Slc38a4的印记基因缺失表达量不小于20％且印记基因Slc38a4的拷贝数异常表达量不小于10％中任意一种情况，则判断为小细胞癌。根据本专利技术，所述印记基因Peg3同时满足：总表达量不大于45％、印记基因Peg3的印记基因缺失表达量不大于20％、印记基因Peg3的拷贝数异常表达量不大于15％且所述印记基因Slc38a4的总表达量为0、印记基因Slc38a4的印记基因缺失表达量为0、印记基因Slc38a4的拷贝数异常表达量为0，则判断为非小细胞癌。本专利技术中，所述非小细胞癌包括肺腺癌、肺鳞癌、肺大细胞癌、肺类癌或肺癌组织类型未定中的任意一种或至少两种的组合。第四方面，本专利技术提供一种恶性肿瘤标志物，所述标志物为印记基因Gnas、印记基因Igf2、印记基因Peg10、印记基因Igf2r、印记基因Mest、印记基因Plagl1、印记基因Dcn、印记基因Dlk1、印记基因Gatm、印记基因Grb10、印记基因Peg3、印记基因Sgce、印记基因Slc38a4、印记基因Diras3或印记基因Snrpn/Snurf中的任意一种或至少两种的组合。本专利技术中，通过对印记基因Gnas，Igf2，Peg10，Igf2r，Mest，Plagl1，Dcn，Dlk1，Gatm，Grb10，Peg3，Sgce，Slc38a4，Diras3和Snrpn/Snurf的总表达量、印记基因缺失表达量和印记基因拷贝数异常表达量进行计算，发现印记基因Gnas，Igf2，Peg10，Igf2r，Mest，Plagl1，Dcn，Dlk1，Gatm，Grb10，Peg3，Sgce，Slc38a4，Diras3和Snrpn/Snurf对于同一个癌症的表达也有不同的表达通道，具体表现如下：根据本专利技术，所述印记基因Gnas的总表达量小于10％或印记基因Gnas的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Gnas与恶性肿瘤相关性不高；优选地，所述印记基因Igf2的总表达量小于10％或印记基因Igf2的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Igf2与恶性肿瘤相关性不高；优选地，所述印记基因Peg10的总表达量小于10％或印记基因Peg10的拷贝数异本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甲状腺癌转移标志物，其特征在于，所述标志物为印记基因Grb10。/n

【技术特征摘要】
1.一种甲状腺癌转移标志物，其特征在于，所述标志物为印记基因Grb10。


2.根据权利要求1所述的标志物，其特征在于，所述印记基因的总表达量、印记基因缺失表达量和印记基因拷贝数异常表达量的公式如下：
总表达量＝(b+c+d)/(a+b+c+d)×100％；
正常印记基因表达量＝b/(b+c+d)×100％；
印记基因缺失基因表达量＝c/(b+c+d)×100％；
印记基因拷贝数异常的基因表达量＝d/(b+c+d)×100％；
其中，所述a为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内不存在标记，印记基因没有表达的细胞核；所述b为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在一个红色/棕色标记，印记基因存在的细胞核；所述c为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在两个红色/棕色标记，印记基因缺失的细胞核；所述d为将细胞进行苏木素染色后，细胞核内存在两个以上红色/棕色标记，印记基因拷贝数异常的细胞核；
优选地，所述印记基因Grb10的总表达量大于10％、印记基因缺失表达量大于10％和印记基因拷贝数异常表达量大于0.5％，则判断为甲状腺癌具有转移属性或甲状腺癌已转移。


3.一种乳腺癌前哨淋巴结转移标志物，其特征在于，所述标志物为印记基因Grb10；
优选地，所述印记基因Grb10的总表达量大于11％、印记基因缺失表达量大于5％和印记基因拷贝数异常表达量大于0.5％，则判断为乳腺癌前哨淋巴结具有转移属性或乳腺癌前哨淋巴结已转移。


4.一种用于区分肺癌类型的标志物，其特征在于，所述标志物为印记基因Peg3和印记基因Slc38a4；
优选地，所述印记基因Peg3的总表达量大于45％、印记基因Peg3的印记基因缺失表达量大于20％且印记基因Peg3的拷贝数异常表达量大于15％或所述印记基因Slc38a4的总表达量不小于50％、印记基因Slc38a4的印记基因缺失表达量不小于20％且印记基因Slc38a4的拷贝数异常表达量不小于10％中任意一种情况，则判断为小细胞肺癌；
优选地，所述印记基因Peg3的总表达量不大于45％、印记基因Peg3的印记基因缺失表达量不大于20％、印记基因Peg3的拷贝数异常表达量不大于15％且所述印记基因Slc38a4的总表达量为0、印记基因Slc38a4的印记基因缺失表达量为0、印记基因Slc38a4的拷贝数异常表达量为0，则判断为非小细胞肺癌。


5.一种恶性肿瘤标志物，其特征在于，所述标志物为印记基因Gnas、印记基因Igf2、印记基因Peg10、印记基因Igf2r、印记基因Mest、印记基因Plagl1、印记基因Dcn、印记基因Dlk1、印记基因Gatm、印记基因Grb10、印记基因Peg3、印记基因Sgce、印记基因Slc38a4、印记基因Diras3或印记基因Snrpn/Snurf中的任意一种或至少两种的组合。


6.根据权利要求5所述的标志物，其特征在于，所述印记基因Gnas的总表达量小于10％或印记基因Gnas的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Gnas与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Igf2的总表达量小于10％或印记基因Igf2的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Igf2与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Peg10的总表达量小于10％或印记基因Peg10的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Peg10与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Igf2r的总表达量小于10％或印记基因Igf2的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Igf2与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Mest的总表达量小于10％或印记基因Mest的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Mest与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Plagl1的总表达量小于10％或印记基因Plagl1的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Plagl1与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Dcn的总表达量小于10％或印记基因Dcn的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Dcn与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Dlk1的总表达量小于10％或印记基因Dlk1的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Dlk1与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Gatm的总表达量小于10％或印记基因Gatm的拷贝数异常的基因表达量小于1％中的任意一种情况，所述印记基因Gatm与恶性肿瘤相关性不高；
优选地，所述印记基因Grb10的总表达量小于10％或印记基因Grb10...

【专利技术属性】
技术研发人员：成彤，周宁，
申请(专利权)人：立森印迹诊断技术无锡有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32